HE染色切片中出現類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發現氧化過度應及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。HE染色取材、染色以及分析方法介紹。西藏專業的HE染色多少錢
HE染色標本一般是針對石蠟標本,脂滴和石蠟都是的有機物, 都具有非極,脂滴應該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。 H:Hematoxylin,蘇木精 E:Eosin,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色,被堿染料染色的結構具有嗜堿。 伊紅(,E)是一種酸染料,能將細胞質染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。南京英瀚斯生物西藏專業的HE染色多少錢什么是HE染色,HE染色實驗的目的。
HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)組織未及時固定,部分自溶;或固定不佳,深部組織未處理到。這種只能重新固定了。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,因為其會導致組織發硬變脆,染色效果不好。(3)包埋時蠟的溫度過高,或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好,可能會導致無法染色。(4)脫蠟不徹底;染料有問題;分化過度導致的顏色變淡,鏡下組織界限不清;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上。(5)通風窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧)。
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中**基本、使用*****的技術方法。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態結構特點均可顯示出來。科研常備實驗操作之HE染色。
HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,固定過久,導致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,而透明、脫水、浸蠟均是如此,這樣在后期染色時就會出現染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,切片厚薄不一,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,導致脫蠟不徹底。(4)染色液過少,著色不均勻;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,這樣會導致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。關于HE染色,你不知道的實驗技巧。西藏專業的HE染色多少錢
常用HE染色試劑配制方法。西藏專業的HE染色多少錢
HE染色細胞質過染分析及應對原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在;(2)切片在伊紅染色時間過長;(3)切片在伊紅染色后經乙醇脫水步驟時過的太快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產生。對策:適當稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時間,或者使切片在乙醇脫水等步驟時,停留時間相對均勻。同樣,也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現藍黑色沉淀物分析及應對原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上。對策:每天染色前仔細過濾蘇木精染色液,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產生。西藏專業的HE染色多少錢