培養(yǎng)基制備器-培養(yǎng)基使用規(guī)程：1.目的：規(guī)范本中心微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基的使用和管理。2.適用范圍，本規(guī)程適用于培養(yǎng)基的儲(chǔ)存、融化和廢棄等。3.職責(zé)，3.1檢驗(yàn)人員：按照本規(guī)程規(guī)范使用培養(yǎng)基、定期檢查培養(yǎng)基是否失效。3.2科室負(fù)責(zé)人：負(fù)責(zé)指導(dǎo)、監(jiān)督檢驗(yàn)人員規(guī)范使用培養(yǎng)基。4.使用程序，4.1培養(yǎng)基的儲(chǔ)存，4.1.1除特殊說明和標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，通常情況下基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）應(yīng)在4℃冰箱中保存不超過3個(gè)月，或在室溫（20℃）下保存不超過一個(gè)月。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。河南培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基成分的稱取:培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，較好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼萵加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。河南培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：具有快速升溫和迅速冷卻功能。

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：1.pH的測(cè)定和調(diào)整：用pH計(jì)測(cè)定pH,必要時(shí)在滅菌前調(diào)節(jié)pH，除特殊說明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),要求pH的變化不超過0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L（約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH，溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時(shí),滅菌前無需調(diào)節(jié)pH。2.分裝：將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦校萜鞯捏w積至少為體積的1.2倍。

配制培養(yǎng)基的原則：調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長(zhǎng)的Eh值一般為+0.3~+0.4V，厭氧微生物只能在+0.1V以下生長(zhǎng)，因此，培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng)，可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大，會(huì)使?jié)B透壓過高，使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來源的選擇力求節(jié)約：配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則，盡量選用價(jià)格便宜、來源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中，培養(yǎng)基用量大，更應(yīng)注意利用低成本的原料，降低產(chǎn)品成本。培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入，確保了添加劑的無菌添加。

培養(yǎng)基的制備：復(fù)水時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養(yǎng)基中，影響微生物的生長(zhǎng)；容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上，避免在加熱溶解過程中，培養(yǎng)基溢出；含有瓊脂粉的培養(yǎng)基，在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘；加熱培養(yǎng)基時(shí)一定要進(jìn)行攪拌，特別是瓊脂類培養(yǎng)基。為避免燒焦和沸騰溢出，對(duì)于少量的培養(yǎng)基很好使用沸水浴進(jìn)行加熱。燒糊的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被破壞，并可產(chǎn)生有毒物質(zhì)，如發(fā)現(xiàn)焦化，或未溶解均勻前培養(yǎng)基有溢出，該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。對(duì)于瓊脂類培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時(shí)應(yīng)使用沸水浴或流動(dòng)蒸汽進(jìn)行加熱，很多只能加熱兩次，第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。液體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞，是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。河南培養(yǎng)基制備器

一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形。河南培養(yǎng)基制備器

制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）方法步驟：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。（2）倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。河南培養(yǎng)基制備器

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