培養基制備的基本方法和注意事項:1.培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對.再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄,包括培養推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。縮短冷卻時間可加速后續分裝、倒平板等操作。山西瓊脂滅菌 培養基制備器
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應緊貼內壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內,上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札,準備滅菌。山東培養基滅菌 培養基制備器培養基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁!
簡單制作培養基,需要完成以下幾個主要步驟:需要對其進行消毒處理,普通介質使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發明適用于各種介質的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應該單獨制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術加入到培養液中。在低溫下,明膠培養基也能殺菌。血、體液及素應經無菌處理后,加至約50℃冷卻培養基中。需要對培養基的質量進行檢測。每次處理完培養基,都要仔細檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進行篩選和棄置,才能確定pH值。培養基培養一晚,若有細菌生長,培養基將被丟棄。常規菌株接種1×2管或瓶培養基,24h培養,對生長不良或無菌的菌株進行培養,追蹤其產生原因,并反復接種。如不發生變化,應丟棄培養基,禁止使用。
培養基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀。顯示屏閃爍可嘗試重置系統或更新固件。
物理分類:液體培養基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。固體培養基,一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。半固體培養基,指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。脫水培養基,又稱預制干燥培養基,指含有除水分外的一切成分的商品培養基。微生物分類;選擇性培養基:一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能,較廣用于菌種篩選等領域。鑒別培養基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。培養基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養基流進去!山東培養基滅菌 培養基制備器
全自動滅菌程序可快速完成高溫高壓滅菌流程。山西瓊脂滅菌 培養基制備器
溶化:培養基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養基中不含有瓊脂,培養基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時攪動,防止焦化,如有焦化現象,配制的培養基就不能使用,要重新配制。配制培養基時不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會使培養基中的銅和鐵的含量超標,影響實驗(培養基中銅含量大于0.3mg/L,細菌不宜生長,鐵含量超過0.14mg/L,妨礙細菌產有害)。對容易發生反應,產生沉淀的藥品,要分開溶解,較后加入培養基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。山西瓊脂滅菌 培養基制備器