培養(yǎng)基制備器:培養(yǎng)基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個(gè)步驟:用水、稱量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經(jīng)消毒過后的無菌水。2、培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍,預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對培養(yǎng)基進(jìn)行加熱時(shí),若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時(shí)間。加熱的過程中不斷進(jìn)行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進(jìn)行加熱,預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時(shí)應(yīng)使用沸水浴或流動蒸汽進(jìn)行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對培養(yǎng)基實(shí)施滅菌時(shí),需嚴(yán)格按照說明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說明的時(shí)間進(jìn)行,需結(jié)合實(shí)際情況,合理調(diào)節(jié)滅菌時(shí)間,防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過度而造成的成分變性。物料殘留嚴(yán)重需優(yōu)化清洗程序周期設(shè)定。江蘇培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基好終pH之用。江蘇培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)選購時(shí)需結(jié)合樣本量、成分敏感性及預(yù)算,優(yōu)先選擇控溫精確、升/降溫速度快且具備無菌保護(hù)設(shè)計(jì)的設(shè)備。
培養(yǎng)基配制方法:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便溯源。
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):培養(yǎng)基滅菌處理:分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養(yǎng)基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當(dāng)中'海培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時(shí)可以使用此方法。高效加熱和冷卻能力是培養(yǎng)基制備器的重要性能,直接關(guān)聯(lián)滅菌可靠性、培養(yǎng)基質(zhì)量及實(shí)驗(yàn)效率。
培養(yǎng)基的類別按照培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分:培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類。(1)古體培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入凝固劑,有瓊脂、明膠、硅膠等。古體培養(yǎng)基常月于微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方面。(2)液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。這種培養(yǎng)基的成分均勻,微生物能充按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng),目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長,并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài),非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長或無生長。培養(yǎng)基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁!新疆不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
高溫下長時(shí)間停留會導(dǎo)致瓊脂過度凝固、糖類焦化或蛋白質(zhì)變性。江蘇培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基成分,介質(zhì)中使用的化學(xué)物質(zhì)應(yīng)該是化學(xué)純品,銅鍋或鐵鍋易導(dǎo)致銅、鐵混入培養(yǎng)基,使細(xì)菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋?zhàn)樱捎脺厮訜幔S時(shí)攪拌,防止結(jié)焦。若發(fā)現(xiàn)結(jié)焦,則不能使用介質(zhì),需重新調(diào)配。在溶解大多數(shù)固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基的pH值,由于加熱消毒過程中培養(yǎng)基的pH值會發(fā)生變化,因此應(yīng)在培養(yǎng)基組分完全溶解后,調(diào)整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經(jīng)驗(yàn),掌握培養(yǎng)基的很終pH值,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在調(diào)整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養(yǎng)基沉淀。江蘇培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)