⑴倒置的小管充滿培養基，不留氣泡。⑵在關閉殺菌鍋的排氣閥之前，將鍋內的氣體排空。⑶試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時，請勿使用橡膠塞。⑷不可過早打開殺菌鍋，等殺菌鍋內的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時再打開殺菌鍋。如果按照以上方法操作還有氣泡，可以用水作為培養基組的對照試驗。如果培養基組有氣泡，對照組沒有氣泡，可以確定培養基本身原因。為有效體現培養基其生物學特性，其制備生長及繁殖需要特定的PH范圍。一般培養基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。自動攪拌培養基制備器品牌

固體斜面培養基配制：培養基各成份的混合和溶化：培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸。如為瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發而丟失的水分，較后必須加以補足。培養基pH的初步調正：因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，培養基各成分完全溶解后，應進行PH的初步調正。自動攪拌培養基制備器品牌為防止冷凝水過多，也可將培養基冷卻至45 ~ 50°C再倒平板。

過濾：配成的培養基，若無特殊要求，可省略此步。若有沉淀或渾濁，需要澄清的，液體培養基可用濾紙過濾。而固體培養基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過濾。如果過濾法還不能達到澄清的要求，則可用蛋清澄清法，即培養基加熱冷卻到50℃~60℃，裝入三角瓶內（不超過容量的二分之一），按1000ml加入1個~2個雞蛋的蛋清，用力搖晃3min~5min，高壓蒸汽滅菌121℃、20min，取出趁熱過濾即可。擺斜面：裝在試管中的瓊脂培養基，在滅菌完成后，趁熱立即擺放在木棒（或玻璃棒）上，并完成適時地斜度，冷卻后，瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不要超過試管的二分之一。

培養基滅菌方法有哪五種類型：1、輻射滅菌原理方法：輻射滅菌原理：是用高能電磁輻射和細菌核酸的光化學反應引起細菌死亡。常用的是紫外線，X射線和伽馬射線。主要用于室內空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法：干熱滅菌原理：是采用高溫氧化微生物，使蛋白質變性并濃縮電解質以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法，化藥滅菌原理：使用化藥與微生物細胞中的成分發生反應，從而使蛋白質變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法：過濾滅菌原理：是使用不能滲透的微生物濾膜進行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細孔濾膜對壓縮空氣，酶溶液和其他對熱不穩定的復合溶液進行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法：在工業生產中，用于滅菌對于培養基，管道和設備，通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間，這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理：是直接用蒸汽進行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱。蒸汽具有強大的穿透力，破壞細菌蛋白質和核酸的化學鍵，使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。液體培養基，固體培養基的對應詞，是微生物或動植物細胞的液狀培養基。

實驗室在制作培養基時候的經驗總結：培養基分裝：培養基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時，分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒，以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中，隨該批培養基同時滅菌，以為測定該批培養基較終pH之用。培養基由于富含營養物質，易被污染或變質。自動攪拌培養基制備器品牌

強力磁力攪拌培養基在內腔里混合的均勻性得到確保，并避免凝結。自動攪拌培養基制備器品牌

培養基的稱量和溶解：小心稱量所需量的脫水合成培養基（必要時佩戴口罩或在通風柜中操作，以防吸入含有有毒物質的培養基粉末），先加入適量的水，充分混合（注意避免培養基結塊），然后加水至所需的量后適當加熱，并重復或連續攪拌使其快速分散，必要時應完全溶解。含瓊脂的培養基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意：培養基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用，應重新制備。自動攪拌培養基制備器品牌

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