培養基制備器:培養基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經消毒過后的無菌水。2、培養基進行復水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復水后培養基總體積的2倍,預防出現溢出情況。4、在對培養基進行加熱時,若培養基內含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現培養基結底炭化從而造成成分損害。部分培養基則需要使用沸水進行加熱,預防發生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。6、而當對培養基實施滅菌時,需嚴格按照說明規范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結合實際情況,合理調節滅菌時間,防止出現培養基滅菌過度而造成的成分變性。**大規模生產**:優先考慮工業化滅菌釜(如**Systec高壓滅菌器**)或連續流培養基制備系統。寧夏自動攪拌培養基制備器
在制備培養基時,通常要考慮以下因素:(1)pH值多數細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4~7.7,轉化細胞以pH=7.0~7.4更合適。據報道,上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍色,pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標準樣,放在與制備培養基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統由于毒性小、成本低、對培養物有營養作用,因此比其他緩沖系統用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數培養細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。天津培養基制備器在選購培養基制備器時,快速加熱和冷卻能力是重要考量因素,直接影響培養基的質量、實驗效率及操作便利性。
培養基的稱量和溶解:小心稱量所需量的脫水合成培養基(必要時佩戴口罩或在通風柜中操作,以防吸入含有有毒物質的培養基粉末),先加入適量的水,充分混合(注意避免培養基結塊),然后加水至所需的量后適當加熱,并重復或連續攪拌使其快速分散,必要時應完全溶解。含瓊脂的培養基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意:培養基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。
種子培養基:種子培養基是供孢子發芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強的“種子”。所以種子培養基的營養成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種子培養基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩定的pH,其組成還要根據不同菌種的生理特征而定。一般種子培養基都用營養豐富而完全的天然有機氮源,因為有些氨基酸能刺激孢子發芽。但無機氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養基中常包括有機及無機氮源。較后一級的種子培養基的成分好好能較接近發酵培養基,這樣可使種子進入發酵培養基后能迅速適應,快速生長。全自動培養基制備儀主要特點:具有快速升溫和迅速冷卻功能!
培養基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養基還含有素和色素,用于單種微生物培養和鑒定。液體培養基是培養基物理分類一種,是相對固體培養基而言的,是微生物或動植物細胞的液狀培養基。在液體培養基中的培養稱為液中培養、液體培養或液內培養。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內。快速冷卻技術避免熱敏感成分降解,保護活性物質。 設備兼容不同規格容器,滿足小試到中試生產需求。寧夏自動攪拌培養基制備器
一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。寧夏自動攪拌培養基制備器
培養基的性能測試:外觀控制:制備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。污染控制:從每批制備好的培養基中選取部分進行污染測試(空白試驗),確定無微生物生長方可使用。同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,很終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。寧夏自動攪拌培養基制備器