培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(nèi)(6.4-7.2)起調(diào)節(jié)作用。有些微生物,如乳酸菌能大量產(chǎn)酸,上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用,此時可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進(jìn)行調(diào)節(jié),CaCO3難溶于水,不會使培養(yǎng)基pH過度升高,但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸,同時釋放出CO2,將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi)。在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng),如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì),也可起到緩沖劑的作用。培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。青海培養(yǎng)基制備器哪家好
—種培養(yǎng)基制備分裝一體機(jī),其包括培養(yǎng)基制備器和自動分裝系統(tǒng),以及分別與該培養(yǎng)基制備器和自動分裝系統(tǒng)連接的控制系統(tǒng),其中所述培養(yǎng)基制備器包括外裝殼體,該外裝殼體設(shè)有容腔,所述容腔內(nèi)設(shè)有攪拌罐,所述攪拌罐與所述容腔內(nèi)壁呈間隔設(shè)置,其內(nèi)設(shè)有夾腔,所述攪拌罐的底部與所述容腔內(nèi)壁之間設(shè)有磁力攪拌器,所述磁力攪拌器的攪拌子向上延伸穿過所述攪拌罐的底部伸入至攪拌罐中;所述容腔的頂部設(shè)有外裝箱蓋,所述外裝箱蓋上設(shè)有箱蓋保險鎖;所述外裝箱蓋上分別設(shè)有分裝連接孔和傳感器安裝孔,所述分裝連接孔上設(shè)有帶流量栗的出料管,所述出料管一端向外延伸穿過所述外裝箱蓋與所述自動分裝系統(tǒng)連接,其另一端向內(nèi)延伸伸入至培養(yǎng)基底部,所述傳感器安裝孔上連接有溫度傳感器,所述溫度傳感器也向下延伸伸入至培養(yǎng)基內(nèi);所述外裝殼體上端設(shè)有多個進(jìn)水管,所述進(jìn)水管向內(nèi)延伸穿過所述夾腔與所述攪拌罐內(nèi)壁觸接,所述外裝殼體底部設(shè)有至少一個出水管,所述容腔底部設(shè)有加熱元件;所述流量栗、磁力攪拌器、溫度傳感器、進(jìn)水管和出水管、加熱元件均與所述控制系統(tǒng)連接。海南培養(yǎng)基制備器廠家培養(yǎng)基制備器可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。
微生物限度:細(xì)胞培養(yǎng)基不是無菌產(chǎn)品,其中的微生物在一定條件下會吸收細(xì)胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效。控制細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌,是延長細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當(dāng)?shù)厮幍洹?005版二部附錄第100頁的口服給藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn),并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細(xì)菌數(shù)每1g不得超過200個,霉菌數(shù)每1g不得超過50個。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,混勻即得試樣。按中華人民當(dāng)?shù)厮幍?005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進(jìn)行,檢查項(xiàng)目為細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)。檢查法采用平皿法。
培養(yǎng)基的過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強(qiáng)力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):數(shù)據(jù)追溯性好,。
三角培養(yǎng)瓶是細(xì)胞培養(yǎng)中的常用耗材,也可用于培養(yǎng)基的配制、混合及儲存。利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進(jìn)行過濾。分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養(yǎng)瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角培養(yǎng)瓶,很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。培養(yǎng)基制備器啟停、正反、全速,調(diào)速、狀態(tài)記憶(掉電記憶)等功能。陜西進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器外控高低電平控制啟停,正反,簡易分裝,光耦隔離;外控模擬量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。青海培養(yǎng)基制備器哪家好
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應(yīng)采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶內(nèi),上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札,準(zhǔn)備滅菌。青海培養(yǎng)基制備器哪家好