三角培養瓶是細胞培養中的常用耗材，也可用于培養基的配制、混合及儲存。利用三角培養瓶制備培養基可以按照以下步驟操作：配料：配方換算→在容器中加入少量水（蒸餾水，自然水）→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。溶解：淀粉溶解：少量冷水調成糊狀。加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調PH：用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。過濾：濾紙或棉花進行過濾。分裝：一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養瓶：若作靜置培養，則100ml培養基/250ml的三角培養瓶，很多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶，否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養，則15-20ml培養基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。試管分裝：液體培養基一般裝4-5ml，約試管的1/4高度；固體斜面培養基一般裝3-4ml，約試管的1/5高度。在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時，常需在培養基中加入少量螯合劑。自動培養基制備器定制

如何避免沉淀物的產生：在使用血清的時候，注意下列的操作：①解凍血清時，請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產生沉淀物。②解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。湖南培養基滅菌 培養基制備器全自動培養基制備儀主要特點：水蒸氣高溫滅菌，保證整個制備過程在無菌下進行。

血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理：血清中沉淀物的出現有許多種原因，但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質量。若想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養基內一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。何謂熱滅活：一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟可以使補體去活化，而補體所參與的反應有：溶細胞活性，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和啟動。

培養基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后，均要對分配器的管道系統進行沖洗，在分裝無菌培養基前，則要采用無菌硅膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3—4h，如用塑料平皿須在35℃培養箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基，如沾有培養基應用布抹去，以避免污染。培養基根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等。

MS培養基的特點：MS培養基普遍被使用，它的無機鹽濃度較高，十分有利于組織生長所需的礦質營養和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高，在配制、貯存、消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養基可以用來對愈傷組織可以進行誘導，或者用來培養胚、莖段、莖尖及花藥。在進行細胞懸浮培養時，它的液體培養基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養基中，有比較適當比例和數量的無機養分，能夠滿足植物細胞在營養上和生理上的需要。所以，通常情形下，氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養基的基本成分要更加的高，這亦是其的明顯特征。液體培養基在靜止的條件下，在菌體或培養細胞的周圍，形成透過養分的壁障，養分的攝入受到阻礙。廣東瓊脂培養基 培養基制備器

制備培養基的操作要點：易于控制微生物的生長代謝狀態。自動培養基制備器定制

配制培養基需要哪些制備：（1）稱出規定數量的瓊脂和蔗糖，加水直到培養基較終容積的34，加熱溶解，完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養基（不加瓊脂）時無需加熱。（2）按需要加入一定量的各種貯存母液，包括生長調節物質和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要，培養基中所需的維生素，可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。（3）蒸餾水定容。充分混合后調節培養基的pH，一般以5.66.0為好。（4）培養基分裝，分裝量一般以占培養容器的1514為宜。之后在24h內完成高壓滅菌，也可以高壓滅菌后再進行培養基的無菌分裝，室溫下存放備用。暫時不用的培養基應放置于10攝氏度下保存，而含有生長調節物質的培養基在45攝氏度保存更佳。自動培養基制備器定制