根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒(méi)有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂好為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分較廣。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力,有時(shí)用來(lái)保藏菌種。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):無(wú)需排干空氣。中國(guó)澳門培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。中國(guó)澳門培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試培養(yǎng)基制備器啟停、正反、全速,調(diào)速、狀態(tài)記憶(掉電記憶)等功能。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基各種微生物的營(yíng)養(yǎng)要求雖不相同,但多數(shù)微生物需要的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)相同。按一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制的培養(yǎng)基即成為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分,再根據(jù)某種微生物的特殊要求,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。根據(jù)培養(yǎng)基的特殊用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等。基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可供大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)。在牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調(diào)節(jié)pH7.2~7.6,經(jīng)滅菌處理后,即為基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基;如再加入0.3%~0.5%的瓊脂,則為基礎(chǔ)半固體培養(yǎng)基;加入1%~2%的瓊脂,則為基礎(chǔ)固體培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分,再根據(jù)某種微生物的特殊要求,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
培養(yǎng)基pH值不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)的問(wèn)題:出現(xiàn)此類情況有很多原因,生物大致分為①?gòu)S家質(zhì)量:出廠時(shí)pH不穩(wěn)定。②滅菌問(wèn)題:是蒸壓過(guò)高或殺菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng),導(dǎo)致葡萄糖焦化,因此,pH值降低。③存放周期:保存時(shí)間超過(guò)保質(zhì)期或結(jié)塊水的質(zhì)量有問(wèn)題。④水質(zhì)問(wèn)題:采用去離子水/蒸餾水/純凈水等,不要采用礦泉水和自來(lái)水。⑤存儲(chǔ)溫度:儲(chǔ)存溫度過(guò)高。⑥光線直射等六種原因,可逐一檢查排除解決問(wèn)題。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點(diǎn)還添加克菌素、色素、和血清。為方便長(zhǎng)期保管,培養(yǎng)基的成分均制成粉末狀。使用時(shí)再配制成可用的培養(yǎng)基,整個(gè)制備過(guò)程培養(yǎng)基需要嚴(yán)格的滅菌。目前對(duì)培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽法,因?yàn)檎羝哂泻軓?qiáng)的穿透能力,能夠殺死各種微生物,微生物受熱死亡的原因,主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì),如酶等,發(fā)生凝固、變性,從而導(dǎo)致微生物無(wú)法生存而死。滅菌中加熱溫度和受熱時(shí)間與滅菌程度和營(yíng)養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系。微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。中國(guó)澳門培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。中國(guó)澳門培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
分裝:配制好的培養(yǎng)基根據(jù)不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中,分裝試管,如果試管量很大,可用自動(dòng)分液器。如果試管量少,可用漏斗分裝。分裝量不超過(guò)容器容積的三分之二。三角瓶以不超過(guò)容積的二分之一為宜;瓊脂斜面以不超過(guò)試管長(zhǎng)度的五分之一為宜,滅菌后,擺成的斜面為培養(yǎng)基的三分之一、底層為三分之二的量為宜;半固體瓊脂分裝量為試管長(zhǎng)度的的三分之一;用來(lái)接種或保菌的高層瓊脂,分裝量為試管長(zhǎng)度的四分之一或三分之一,用來(lái)接種厭氧菌的要達(dá)到三分之二;瓊脂平板,內(nèi)徑90mm的以13ml~15ml為宜,內(nèi)徑70mm的平板為8ml~10ml,制成的瓊脂平板。中國(guó)澳門培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試