配置培養(yǎng)基注意問題:1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。3、將培養(yǎng)基的pH控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時候注意時間的把握。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:可連接電腦進行打印。江西培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水?dāng)嚢杈鶆颉H鐪?zhǔn)備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因為銅或鐵容器可能會導(dǎo)致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標(biāo),影響實驗結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細(xì)菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細(xì)菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應(yīng)和沉淀的藥物應(yīng)單獨溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。江西培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),配制針對性強的培養(yǎng)基。
牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細(xì)菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中,于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜),或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用。化學(xué)分類:天然培養(yǎng)基指一類利用動、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基制備器:培養(yǎng)基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經(jīng)消毒過后的無菌水。2、培養(yǎng)基進行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍,預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對培養(yǎng)基進行加熱時,若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進行加熱,預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養(yǎng)基進行再融化時應(yīng)使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對培養(yǎng)基實施滅菌時,需嚴(yán)格按照說明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結(jié)合實際情況,合理調(diào)節(jié)滅菌時間,防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過度而造成的成分變性。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基倒入平板,將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過多的冷凝水;溫度太低,中海培養(yǎng)基容易凝固成塊狀,不能做成平板。倒平板時,要靠近酒精的火焰以防止外來細(xì)菌落入盤中。左手托住培養(yǎng)皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞,燒灼燒瓶口,用拇指和食指在培養(yǎng)皿蓋上打開一條縫,直到燒瓶口剛好伸手進去,倒入培養(yǎng)基,直到底部被覆蓋。不要超過培養(yǎng)皿高度的三分之一,迅速蓋上蓋子,放在桌子上,輕輕旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基分布均勻,凝結(jié)后即可。培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行PH的初步調(diào)正。江西培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器不要過早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。江西培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的質(zhì)量測試:每批培養(yǎng)基制備好以后,應(yīng)仔細(xì)檢查一遍,如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測定其好終pH。將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜,如發(fā)現(xiàn)有菌生長,即棄去。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基,培養(yǎng)24~48小時,如無菌生長或生長不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次,如結(jié)果仍同前,則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不能使用。培養(yǎng)基的保存:培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處,好好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽。江西培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器