不同的外泌體提取試劑盒可能適用于不同的樣本類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)條件。因此,在選擇試劑盒時(shí)需要考慮其適用性和通用性。一些試劑盒可能只適用于特定類(lèi)型的樣本或?qū)嶒?yàn)條件,而另一些試劑盒則具有更普遍的適用范圍。根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求和條件選擇適合的試劑盒,可以提高實(shí)驗(yàn)的靈活性和效率。市場(chǎng)上存在多種品牌和型號(hào)的外泌體提取試劑盒,它們的性能和質(zhì)量可能存在差異。在選擇試劑盒時(shí),建議對(duì)不同品牌和型號(hào)的試劑盒進(jìn)行比較和評(píng)估。可以查閱相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道、用戶評(píng)價(jià)和技術(shù)參數(shù)等信息,了解各品牌試劑盒的優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍,從而選擇很適合自己實(shí)驗(yàn)需求的試劑盒。試劑盒中的關(guān)鍵組分經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選,確保提取效果佳。外泌體的生產(chǎn)在臨床診斷領(lǐng)域,外泌體提...
如何評(píng)估試劑盒提取的外泌體純度和活性?隨著外泌體研究的日益深入,外泌體提取試劑盒的應(yīng)用也越來(lái)越普遍。然而,如何評(píng)估這些試劑盒提取的外泌體的純度和活性,一直是科研人員關(guān)注的焦點(diǎn)。本文將從多個(gè)方面探討如何評(píng)估試劑盒提取的外泌體的純度和活性,為相關(guān)研究提供參考。流式細(xì)胞儀分析:流式細(xì)胞儀分析可用于檢測(cè)外泌體表面的特異性抗原或標(biāo)志物。通過(guò)比較不同樣本中外泌體表面標(biāo)志物的表達(dá)水平,可以評(píng)估外泌體的純度。此外,該方法還可以對(duì)外泌體進(jìn)行分選和純化,提高外泌體的純度。外泌體提取試劑盒的設(shè)計(jì)考慮了用戶的實(shí)際需求,操作更加人性化。GalNAc綴合修飾外泌體提取試劑盒的可靠性分析:可靠性是指外泌體提取試劑盒在不同實(shí)...
隨著外泌體研究的不斷深入,科研工作者對(duì)高質(zhì)量外泌體的需求也日益迫切。然而,外泌體在體液中的含量極低,且提取過(guò)程復(fù)雜,容易受到污染。因此,開(kāi)發(fā)一種高效、便捷、穩(wěn)定的外泌體提取試劑盒成為了一項(xiàng)迫切的任務(wù)。在這樣的背景下,各大生物科技公司紛紛投入研發(fā)力量,推出了一系列外泌體提取試劑盒,以滿足科研工作的需求。Tumibio?UR52121外泌體提取純化試劑盒是一款專(zhuān)門(mén)用于從細(xì)胞上清(如尿液)中提取外泌體的試劑盒。該試劑盒采用先進(jìn)的提取技術(shù),可以在短時(shí)間內(nèi)從400ml的細(xì)胞上清液中提取出高質(zhì)量的外泌體。與傳統(tǒng)的外泌體提取方法相比,該試劑盒具有更高的提取效率和純度,可以更好地滿足科研工作的需求。試劑盒提取...
外泌體提取試劑盒的重要性體現(xiàn)在哪些地方?在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中,外泌體作為細(xì)胞間通信的關(guān)鍵媒介,已逐漸成為研究的熱點(diǎn)。這些微小的囊泡在細(xì)胞間傳遞信息、參與生理和病理過(guò)程,因此,對(duì)于外泌體的研究具有重大的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。而外泌體提取試劑盒作為研究外泌體的關(guān)鍵工具,其重要性不言而喻。本文將詳細(xì)探討外泌體提取試劑盒的重要性體現(xiàn)在哪些方面。外泌體提取試劑盒的設(shè)計(jì)初衷就是為了更高效地提取和純化外泌體,從而確保后續(xù)研究的準(zhǔn)確性和可靠性。外泌體提取試劑盒采用先進(jìn)技術(shù),確保提取的外泌體高純度。外泌體資訊費(fèi)用外泌體提取試劑盒的可靠性分析:可靠性是指外泌體提取試劑盒在不同實(shí)驗(yàn)條件下,能夠準(zhǔn)確、可重復(fù)地提取...
在外泌體提取試劑盒的操作過(guò)程中,離心與沉淀是關(guān)鍵的步驟之一。離心過(guò)程中,要確保離心機(jī)的轉(zhuǎn)速、時(shí)間和溫度等參數(shù)按照說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行設(shè)置。不正確的離心條件可能導(dǎo)致外泌體沉淀不完全或破壞。此外,離心后要小心處理離心管,避免碰觸到尖銳的物品或化學(xué)品,以防外泌體樣本的污染或損失。在進(jìn)行外泌體提取試劑盒的操作過(guò)程中,還需要注意一些操作技巧和事項(xiàng)。首先,要避免過(guò)度攪拌或劇烈震蕩樣本,以減少外泌體的破壞和損失。其次,在操作過(guò)程中要保持實(shí)驗(yàn)室的整潔和衛(wèi)生,避免灰塵和雜質(zhì)的污染。此外,還需要注意實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的溫度控制,確保樣本在適宜的溫度下進(jìn)行處理。外泌體提取試劑盒提取的外泌體適用于多種下游分析,如蛋白質(zhì)組學(xué)。無(wú)外...
外泌體提取試劑盒的提取效率受到多種因素的影響。首先,樣本來(lái)源和質(zhì)量對(duì)提取效率具有決定性影響。不同來(lái)源的樣本中外泌體的數(shù)量、大小和活性可能存在差異,因此提取效率也會(huì)有所不同。其次,提取方法的選擇和操作步驟的規(guī)范性也會(huì)影響提取效率。不同的提取方法可能對(duì)外泌體的回收率和純度產(chǎn)生不同的影響,而操作步驟的不規(guī)范可能導(dǎo)致外泌體的損失和污染。此外,實(shí)驗(yàn)條件、試劑質(zhì)量、操作人員的技術(shù)水平等因素也可能對(duì)提取效率產(chǎn)生一定的影響。外泌體提取試劑盒提取的外泌體在藥物篩選中具有重要作用。外泌體粒徑檢測(cè)銷(xiāo)售不同的外泌體提取試劑盒可能適用于不同的樣本類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)條件。因此,在選擇試劑盒時(shí)需要考慮其適用性和通用性。一些試劑盒可...
外泌體提取試劑盒的提取結(jié)果是否穩(wěn)定可靠?首先,通過(guò)對(duì)比不同批次試劑盒的提取結(jié)果,可以評(píng)估其批次間的穩(wěn)定性。如果不同批次間提取結(jié)果差異較小,說(shuō)明試劑盒的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)較為穩(wěn)定,從而保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。其次,通過(guò)在不同時(shí)間點(diǎn)使用同一批次試劑盒進(jìn)行提取實(shí)驗(yàn),可以評(píng)估其時(shí)間穩(wěn)定性。如果長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)提取結(jié)果保持一致,說(shuō)明試劑盒在存儲(chǔ)和使用過(guò)程中具有良好的穩(wěn)定性,能夠保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。此外,穩(wěn)定性分析還應(yīng)考慮不同實(shí)驗(yàn)條件下的提取結(jié)果。例如,在不同溫度、pH值或離子強(qiáng)度下,提取結(jié)果是否保持穩(wěn)定。這些因素可能對(duì)提取過(guò)程中的蛋白質(zhì)相互作用、膜穩(wěn)定性等產(chǎn)生影響,從而影響提取效率和純度。因此,在...
為了評(píng)估外泌體提取試劑盒的提取效率,科研人員通常采用以下幾種方法:電子顯微鏡觀察:通過(guò)電子顯微鏡觀察提取的外泌體的形態(tài)和大小,可以初步判斷其提取效率。若提取的外泌體數(shù)量多、形態(tài)完整、大小均一,則可能說(shuō)明提取效率較高。粒徑分析:利用納米顆粒追蹤分析等技術(shù)手段,對(duì)外泌體的粒徑分布進(jìn)行定量分析,從而評(píng)估提取效率。若提取的外泌體粒徑分布集中、大小均一,則可能說(shuō)明提取效率較高。標(biāo)志物檢測(cè):通過(guò)檢測(cè)外泌體特異性標(biāo)志物(如CD63、CD81等)的表達(dá)水平,可以評(píng)估外泌體的純度和提取效率。若提取的外泌體中這些標(biāo)志物的表達(dá)水平較高,則可能說(shuō)明提取效率較高。功能性實(shí)驗(yàn):通過(guò)檢測(cè)外泌體的生物學(xué)功能(如促進(jìn)細(xì)胞遷移、...
外泌體提取試劑盒的原理是什么?外泌體提取試劑盒的原理主要基于外泌體的物理和化學(xué)特性。在提取過(guò)程中,試劑盒中的特殊試劑能夠識(shí)別并結(jié)合外泌體,然后通過(guò)離心、過(guò)濾等步驟將外泌體與其他雜質(zhì)分離。這種分離方法既保證了外泌體的完整性,又提高了提取的純度。外泌體提取試劑盒在生命科學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。首先,在基礎(chǔ)研究中,科研人員可以利用該試劑盒提取外泌體,進(jìn)而研究外泌體的成分、結(jié)構(gòu)和功能。這對(duì)于揭示細(xì)胞間通信機(jī)制、探索疾病發(fā)生的發(fā)展過(guò)程具有重要意義。提取的外泌體可用于開(kāi)發(fā)新型的生物藥物和調(diào)理方法。hyclone無(wú)外泌體血清外泌體提取試劑盒的質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。通過(guò)制定嚴(yán)格的質(zhì)...
隨著外泌體研究的不斷深入和其在疾病診斷、調(diào)理及藥物研發(fā)等領(lǐng)域的應(yīng)用前景逐漸明朗,外泌體提取試劑盒的市場(chǎng)需求也在不斷增加。目前,各大生物科技公司都在積極推出自己的外泌體提取試劑盒,市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)日益激烈。然而,隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和科研工作者對(duì)外泌體需求的增加,外泌體提取試劑盒的市場(chǎng)前景仍然十分廣闊。外泌體提取試劑盒作為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要工具之一,其研發(fā)和應(yīng)用對(duì)于推動(dòng)外泌體研究的發(fā)展具有重要意義。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和市場(chǎng)需求的增加,相信未來(lái)會(huì)有更多高效、便捷的外泌體提取試劑盒問(wèn)世,為科研工作者提供更好的實(shí)驗(yàn)工具和支持。同時(shí),我們也期待外泌體在疾病診斷和調(diào)理等領(lǐng)域的應(yīng)用能夠取得更多的突破和進(jìn)展,為人類(lèi)健康...
外泌體提取試劑盒的重要性體現(xiàn)在哪些地方?在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中,外泌體作為細(xì)胞間通信的關(guān)鍵媒介,已逐漸成為研究的熱點(diǎn)。這些微小的囊泡在細(xì)胞間傳遞信息、參與生理和病理過(guò)程,因此,對(duì)于外泌體的研究具有重大的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。而外泌體提取試劑盒作為研究外泌體的關(guān)鍵工具,其重要性不言而喻。本文將詳細(xì)探討外泌體提取試劑盒的重要性體現(xiàn)在哪些方面。外泌體提取試劑盒的設(shè)計(jì)初衷就是為了更高效地提取和純化外泌體,從而確保后續(xù)研究的準(zhǔn)確性和可靠性。外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。外泌體實(shí)驗(yàn)費(fèi)用由于卵巢中流細(xì)胞質(zhì)膜上的磷脂酰絲氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可以...
在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,隨著對(duì)外泌體(Exosomes)的深入研究,這一小囊泡在細(xì)胞間通訊、疾病診斷、藥物傳遞等方面展現(xiàn)出了巨大的潛力。為了滿足科研工作者對(duì)高質(zhì)量外泌體提取的需求,各大生物科技公司紛紛推出了一系列高效、便捷的外泌體提取試劑盒。現(xiàn)在,我們就來(lái)詳細(xì)介紹一款備受關(guān)注的外泌體提取試劑盒——Tumibio?UR52121外泌體提取純化試劑盒。外泌體是由細(xì)胞分泌的包含RNA和蛋白質(zhì)的小囊泡,直徑約為30-150納米。它們普遍存在于血液、唾液、尿液及乳汁等體液中,參與細(xì)胞間的通訊和信號(hào)傳遞。近年來(lái),外泌體在疾病診斷、調(diào)理及藥物研發(fā)等領(lǐng)域的應(yīng)用前景日益凸顯。例如,某些疾病的外泌體特征可以作為診斷依據(jù);...
瘤釋放的外泌體可以通過(guò)削弱免疫效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細(xì)胞的擴(kuò)增,來(lái)營(yíng)造一個(gè)免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細(xì)胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊,從而幫助瘤細(xì)胞逃過(guò)免疫系統(tǒng)的識(shí)別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥,利用基質(zhì)浸潤(rùn)細(xì)胞的反應(yīng)營(yíng)造出利于瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境。研究表明,在過(guò)去短短的5年里,對(duì)外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進(jìn)展。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個(gè)重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對(duì)改善病癥患者的命運(yùn)發(fā)揮出舉足輕重的影響。超速離心是從生物體液或細(xì)胞上清分離外泌體的金標(biāo)準(zhǔn)方法。外泌體 超聲法外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡,直徑約為30-200...
瘤釋放的外泌體可以通過(guò)削弱免疫效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細(xì)胞的擴(kuò)增,來(lái)營(yíng)造一個(gè)免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細(xì)胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊,從而幫助瘤細(xì)胞逃過(guò)免疫系統(tǒng)的識(shí)別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥,利用基質(zhì)浸潤(rùn)細(xì)胞的反應(yīng)營(yíng)造出利于瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境。研究表明,在過(guò)去短短的5年里,對(duì)外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進(jìn)展。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個(gè)重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對(duì)改善病癥患者的命運(yùn)發(fā)揮出舉足輕重的影響。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型均可分泌外泌體。羊奶提取試劑盒原理外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA、micr...
在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中,由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過(guò)基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸,因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞,而后將SR4987與PTX共混,使SR4987分泌的外泌體含有PTX,再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來(lái),研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能,小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047~0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%,這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。超速離心是從生物體液或細(xì)胞上清...
外泌體是細(xì)胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過(guò)三種方式介導(dǎo)細(xì)胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細(xì)胞相互作用,通過(guò)受體–配體作用黏附到靶細(xì)胞表面,隨后被內(nèi)吞入靶細(xì)胞,或直接將內(nèi)容物釋放到靶細(xì)胞內(nèi),從而激huo靶細(xì)胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產(chǎn)生的片段可以與靶細(xì)胞的細(xì)胞表面受體結(jié)合,從而激huo靶細(xì)胞;(3)外泌體還可以與靶細(xì)胞直接接觸發(fā)生膜融合,導(dǎo)致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉(zhuǎn)移到目標(biāo)細(xì)胞,從而引起靶細(xì)胞的響應(yīng)。通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過(guò)程,比如消除胞內(nèi)陳舊分子、呈遞抗原、分化調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞或髓樣細(xì)胞以抑制免疫反應(yīng),而且還可以參與疾病形成的病理...
外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD9作為生物標(biāo)記,通過(guò)將CD9與熒光蛋白偶聯(lián),帶熒光的膜蛋白會(huì)在表達(dá)至外泌體膜上,便于后續(xù)進(jìn)行、觀察內(nèi)化或其他實(shí)驗(yàn)。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細(xì)胞系的輔助下,經(jīng)過(guò)病毒包裝成為有g(shù)anran力的病毒顆粒,通過(guò)ganran細(xì)胞或組織,實(shí)現(xiàn)外源基因在細(xì)胞或組織中表達(dá)。外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信...
目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法,但這些方法混有非常多的雜質(zhì),必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定,不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機(jī)、無(wú)法進(jìn)行多樣品分析等問(wèn)題。因此外泌體研究相對(duì)困難,需要盡快開(kāi)發(fā)操作簡(jiǎn)單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此,日本和光著眼于巨噬細(xì)胞的外泌體受體Tim4蛋白,制備Tim4細(xì)胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過(guò)磷酯酰絲氨酸(PS)法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠,再經(jīng)過(guò)含有EDTA的洗脫緩沖液進(jìn)行分離,提取高純度的完整外泌體。有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。泌佑外泌體血清中的miR-122和miR...
細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱(chēng)為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類(lèi)型的膜囊泡。這些細(xì)胞外囊泡(EVs)表示了細(xì)胞間通訊的一個(gè)重要模式,作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡,由大多數(shù)細(xì)胞分泌。在抗原呈遞細(xì)胞中的外泌體發(fā)揮作用的報(bào)道后,人們對(duì)外泌體的興趣增強(qiáng),并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過(guò)去幾年中,有幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室報(bào)道了各種細(xì)胞類(lèi)型的外泌體分泌,并討論了其潛在的生物學(xué)功能。然而,我們對(duì)于EV形成的分子機(jī)制知識(shí)的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專(zhuān)注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功...
外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用。外泌體通過(guò)內(nèi)含的miRNA直接調(diào)控基因表達(dá),將信息傳遞給靶細(xì)胞。盡管干細(xì)胞移植治理是一種很有前景的修復(fù)損傷心臟組織并使其再生的輔助手段,但由于缺血心臟中移植細(xì)胞的存活狀況不佳,一般只能觀察到心臟功能的輕度改善。近期的研究表明,干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心臟修復(fù)潛在的無(wú)細(xì)胞治理劑。干細(xì)胞分泌的外泌體相比干細(xì)胞有如下優(yōu)點(diǎn):(1)旁分泌效應(yīng),外泌體作為干細(xì)胞旁分泌作用的一種媒介;(2)組合起效,外泌體可與現(xiàn)有的組合物或方法進(jìn)行組合;(3)個(gè)性化,外泌體可改造特定活性成分;(4)靶向特異性,外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細(xì)胞類(lèi)型或組織的功能;(5)安全性高,外泌體治...
臨床上,干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護(hù)膚方面,主要是對(duì)外傷受損、衰老進(jìn)行修復(fù),比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì),令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。干細(xì)胞外泌體可以再生皮膚和強(qiáng)化皮膚屏障,具有比較好的再生效果,且沒(méi)有其它副作用。干細(xì)胞外泌體或?qū)⒊蔀橹巍⑻禺愋云ぱ椎葘挿貉装Y性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今,干細(xì)胞外泌體已在幾種不同類(lèi)型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果,包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機(jī)制可能是外泌體介導(dǎo)了MSC的旁分泌/自分泌機(jī)制。神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。北京外泌體染色雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢(shì),但在...
在多細(xì)胞生物體內(nèi),遠(yuǎn)處的細(xì)胞可以通過(guò)傳遞單個(gè)分子或細(xì)胞外囊泡(EVs,包括exosomes和microvesicles等)交換信息。該綜述介紹了一些EVs引人注目的功能,以及我們目前對(duì)其生理作用認(rèn)識(shí)的局限。盡管有初步研究表明,EVs在體內(nèi)具有一些生理功能,但EVs的本質(zhì)特性仍有待進(jìn)一步澄清。這篇綜述主要關(guān)注種瘤細(xì)胞和微環(huán)境,但類(lèi)似的結(jié)果和挑戰(zhàn)也適用于EVs介導(dǎo)的其他的病理/生理過(guò)程。功能神經(jīng)的能力和完整性需要感覺(jué)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞之間的交互式信息交流。目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。潤(rùn)微外泌體外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性較好,可保護(hù)內(nèi)部生物分子免...
外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對(duì)相鄰細(xì)胞具有交換信息的功能。作為細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門(mén)。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍,但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù),關(guān)于需要改進(jìn)的課題存在很多。例如,外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質(zhì),給后續(xù)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生了許多障礙。抗體親和法和密度梯度離心法,雖然可以提取到高純度的外泌體,但不能提取完整外泌體,無(wú)法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問(wèn)題所在。而免疫印跡法(WB)和Elisa檢測(cè)法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測(cè)...
血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定,將血清在4°C短期保存期間即發(fā)生降解,這可能是由外泌體的異質(zhì)性所導(dǎo)致的。–80°C保存被公認(rèn)是保存各種生物標(biāo)本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境,雖然這樣保存血漿可能產(chǎn)生含有大量“污染物”的外泌體。4°C保存雖然容易導(dǎo)致外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過(guò)程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80°C環(huán)境下,但在處理或運(yùn)輸過(guò)程中有時(shí)很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體,在冷凍過(guò)程中使用海藻糖作為保護(hù)劑,海藻糖可以提供生物保護(hù)作用,如穩(wěn)定蛋白質(zhì)、細(xì)胞膜和脂質(zhì)體;減少冷凍過(guò)程中冰...
唾液中包含來(lái)自于唾液腺上皮體外細(xì)胞的外泌體,Michael等從唾液中提取外泌體,并對(duì)唾液外泌體中的miRNA進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)此類(lèi)miRNA有望作為成為唾液腺疾病的生物標(biāo)志物。Wu等成功從汗液中提取得到外泌體,并進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,在汗液外泌體中鑒定到1062種蛋白質(zhì),其中包含多種抗jun肽和免疫因子,表明汗液外泌體參與皮膚免疫。Liu等從患有阿爾茲海默癥患小鼠的腦脊髓液中提取得到外泌體,并與野生型小鼠進(jìn)行對(duì)比,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組miR-193b明顯下調(diào)。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過(guò)程。杭州體液外泌體外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于...
外泌體開(kāi)始被認(rèn)為是細(xì)胞排出代謝廢物的一種方式,能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統(tǒng)的細(xì)胞排出不必要的蛋白質(zhì)和RNA。近年來(lái),隨著人們對(duì)外泌體的深入了解,外泌體的多種生物功能先后被發(fā)現(xiàn)。如今外泌體作為一種細(xì)胞間交流、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視。外泌體與受體細(xì)胞的信息交流可能通過(guò)以下4種途徑實(shí)現(xiàn):(1)外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細(xì)胞表面的受體識(shí)別,從而激huo靶細(xì)胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細(xì)胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細(xì)胞膜融合,將蛋白質(zhì)和RNA等內(nèi)容物釋放進(jìn)去,此類(lèi)膜融合可能改變靶細(xì)胞的一些膜特性,例如脂質(zhì)和膜蛋白質(zhì)的密度及種...
研究采用蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀,極大地降低了外泌體的提取成本,且獲得的外泌體不僅表達(dá)外泌體公認(rèn)的標(biāo)志蛋白分子,同時(shí)也表達(dá)胎盤(pán)特異性蛋白分子,證明通過(guò)這種方法獲得的外泌體是胎盤(pán)來(lái)源外泌體。通過(guò)蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經(jīng)蛋白質(zhì)SDS-PAGE膠電泳,銀染后可見(jiàn)各蛋白分子條帶清晰可見(jiàn),動(dòng)態(tài)光散射分析粒徑,結(jié)果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間,與文獻(xiàn)報(bào)道外泌體顆粒大小相一致。胎盤(pán)外泌體經(jīng)過(guò)PKH67熒光染料染色后,與細(xì)胞共孵育,熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進(jìn)入細(xì)胞的活性,進(jìn)一步驗(yàn)證了我們應(yīng)用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤(pán)來(lái)源的外泌體。本研究通過(guò)蔗糖...
一類(lèi)外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱(chēng)RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易濉嵝菘说鞍准易濉F渌恍┩饷隗w中的蛋白包括多種的代謝類(lèi)的酶、核糖體蛋白(RPS3)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子(黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類(lèi)...
為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問(wèn)題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細(xì)胞通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),暴露在外泌體膜外側(cè)3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過(guò)巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過(guò)細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4)。基于上述知識(shí),我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清...
外泌體中包含的mRNAs和miRNAs在進(jìn)入受體細(xì)胞后仍具有翻譯蛋白質(zhì)、促進(jìn)病毒感ran等功能。據(jù)估計(jì),單個(gè)外泌體含有約≤100拷貝數(shù)的蛋白質(zhì)和≤10000拷貝數(shù)的核苷酸。不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體中既包含與細(xì)胞形成、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的共有成分,也包含與來(lái)源細(xì)胞的生物功能相關(guān)的特異分子。如B淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有大量的主要組織相容性復(fù)合體蛋白質(zhì)MHCclassⅡ和MHCclassⅠ,血小板和T細(xì)胞來(lái)源的外泌體則包含諸如血管性血友病因子、穿孔素和顆粒酶等特殊蛋白質(zhì),而ai細(xì)胞來(lái)源的外泌體表面可能含有中流特異的蛋白質(zhì)分子。這類(lèi)特異分子在外泌體介導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、參與生...