一類外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易濉嵝菘说鞍准易濉Ｆ渌恍┩饷隗w中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體并作為癥狀早期診斷技術(shù)，應(yīng)用于與癥狀進展相關(guān)的研究。黑龍江CD81外泌體慢病毒

流式細胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射，操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質(zhì)的定量檢測，目前該儀器已商品化。黑龍江CD81外泌體慢病毒外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標志物。

外泌體攜帶的與疾病進展緊密關(guān)聯(lián)的分子標志物可用于疾病進展的監(jiān)視、檢測和診斷,是一種潛在的非侵入性生物標志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡,且有較長的循環(huán)半衰期,可用于免疫學相關(guān)研究,同時,源自ai細胞的外泌體可以被工程化,發(fā)揮免疫刺激作用,可作為中流疫苗應(yīng)用于ai癥的免疫zhiliao。此外,外泌體穩(wěn)定而廣fan地分布在qi官和組織中,具有低免疫原性、高耐受性等特點,且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障,因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統(tǒng),兼有高輸送效率和低副作用。因此,外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質(zhì),運送至靶位點后實現(xiàn)靶向zhiliao。

多項研究表明中流細胞來源的外泌體能夠抑制免疫相關(guān)的信號通路、阻礙機體對中流的免疫響應(yīng)。Chen等研究發(fā)現(xiàn)黑色素瘤細胞、乳腺ai和肺ai細胞會產(chǎn)生攜帶程序性死亡分子1的配體(programmedcelldeath1ligand1，PD-L1)的外泌體，此類外泌體在血液中循環(huán)，通過表面PD-L1與T細胞結(jié)合，導(dǎo)致T細胞在到達中流細胞之前即受到抑制，達到遠程干擾免疫細胞活性的效果。中流來源的外泌體能夠抑制骨髓來源的抑制性細胞(該細胞是樹突狀細胞(dendriticcells，DCs)、巨噬細胞和(或)粒細胞的前體，具有抑制免疫細胞應(yīng)答的能力)對中流的免疫監(jiān)督。中流細胞來源的外泌體與巨噬細胞共孵育后，其內(nèi)的miRNA-301a通過下調(diào)抑ai基因PTEN)，激huoPI3Kγ(phosphoinositide3-kinaseγ)信號分子，使巨噬細胞被“馴化”成為能參與抗yan反應(yīng)、血管生成以及促進中流生長轉(zhuǎn)移的M2型巨噬細胞。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區(qū)分。

外泌體是細胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過三種方式介導(dǎo)細胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細胞相互作用,通過受體–配體作用黏附到靶細胞表面,隨后被內(nèi)吞入靶細胞,或直接將內(nèi)容物釋放到靶細胞內(nèi),從而激huo靶細胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產(chǎn)生的片段可以與靶細胞的細胞表面受體結(jié)合,從而激huo靶細胞;(3)外泌體還可以與靶細胞直接接觸發(fā)生膜融合,導(dǎo)致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉(zhuǎn)移到目標細胞,從而引起靶細胞的響應(yīng)。通過介導(dǎo)細胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過程,比如消除胞內(nèi)陳舊分子、呈遞抗原、分化調(diào)節(jié)性T淋巴細胞或髓樣細胞以抑制免疫反應(yīng),而且還可以參與疾病形成的病理過程,如通過與受體細胞的相互作用傳播病原物質(zhì)、促進中流轉(zhuǎn)移過程中的血管生長和中流細胞遷移。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能。黑龍江CD81外泌體慢病毒

外泌體提純方法中，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)。黑龍江CD81外泌體慢病毒

中流細胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定qi官，建立有利于ai細胞生長的微環(huán)境，包括促進受體細胞上皮細胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、引發(fā)炎癥、促進血管生成，為ai細胞的擴散形成有利條件。進一步研究發(fā)現(xiàn)中流細胞外泌體能夠引導(dǎo)ai癥轉(zhuǎn)移至特定qi官，在膜表面特異性整合素的作用下，中流細胞外泌體首先在特定的qi官累積，引起受體qi官產(chǎn)生炎癥、生成血管，形成有利于中流轉(zhuǎn)移的微環(huán)境，使得中流細胞更容易轉(zhuǎn)移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進血管生成，為中流轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利的微環(huán)境。黑龍江CD81外泌體慢病毒