15分鐘。圖4.擴(kuò)展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細(xì)胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標(biāo)準(zhǔn)印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標(biāo)準(zhǔn)印跡孵育1小時。 圖5.擴(kuò)展孵化(1小時):,SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議與標(biāo)準(zhǔn)免益啟生物公司帶您了解細(xì)胞分析儀詳情。上海MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器商家
它提供相同的膜柔韌性和能力監(jiān)控波動趨勢您將愛上了新功能:●人體工程學(xué)的好處:您將輕松地打開,關(guān)閉和組裝新的Amicon卡車!●快速連接管道的接頭,可輕松,安全地進(jìn)行設(shè)置。●具有螺紋和迭代功能的完美安全特性泄壓閥,無需外部外殼這意味著更容易組裝和拆卸,而且非常清晰確認(rèn)迪伊已經(jīng)妥善擺弄。總體上較高的象素●膜片的選擇范圍更廣。●經(jīng)過比較周全修訂的用戶指南,提供了更清晰的操作說明和如何與您的氣源連接●更好的備件和配件支持●更安全的攪拌棒消除了損壞膜的風(fēng)險。 SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的零件和功能SNAP i.d.0 2.0系統(tǒng)包含以下組成部分:部分功能SNAP i.d.o 2.0基本套件(包括以下組件)SNAP2BASE基本單位(1)接受框架并進(jìn)行免疫檢測油管組裝套件(1)將系統(tǒng)連接到真空源墨輥上海MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器商家上海益啟,采購電阻儀的放心之選。
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關(guān)閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運(yùn)行連續(xù)添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復(fù)洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關(guān)閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點(diǎn)固定器中取出污點(diǎn),并與適當(dāng)?shù)臋z測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴(kuò)展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座上海益啟生物WB實(shí)驗加速器訂購方便。
x @ -FAgo過濾器(或等效過濾器)建議在保溫瓶和真空源之間使用,例如o保護(hù)真空源免受污染。●將真空瓶連接到真空源的真空管●前肢●封閉劑,例如脫脂/低脂干奶(0.5%以下),酪蛋白,牛血清白蛋白(BSA)或其他市售的封閉劑,例如blok * -CH緩沖液(請參閱表5)抗體(單克隆和/或多克隆),檢測試劑●洗滌緩沖液:Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,pH 7.4,補(bǔ)充了Tween @ 20表面活性劑(TBST)或PBST)●轉(zhuǎn)移蛋白的印跡吸筆座尺寸比較大印跡尺寸(厘米)多印跡4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般準(zhǔn)則●如果蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到已經(jīng)干燥的PVDF膜上,請用100%重新潤濕印跡甲醇,然后在組裝前用蒸餾水沖洗。如果蛋白質(zhì)已轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜干燥后,用蒸餾水重新細(xì)胞跨膜電阻儀零售多少錢呢?靜安區(qū)MerckWB實(shí)驗加速器Merck儀器批發(fā)
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測 注意:所有抗體均使用0.5%NFDM作為封閉劑和Luminata?Forte Western HRP進(jìn)行測試作為化學(xué)發(fā)光試劑的底物。 印跡阻止 ?SNAPi.d.?2.0系統(tǒng)與比較常用的封閉劑兼容,包括脫脂/低脂干燥牛奶,牛血清白蛋白(BSA)和酪蛋白。許多其他市售阻滯劑也兼容(請參閱表5)。?為了確保比較佳的墨量通過吸墨架,必須完全封閉封閉液溶解且不含所有顆粒物質(zhì)。在某些情況下,可能有必要降低封閉劑以達(dá)到所需的流量。?不建議使用濃度高于0.5%的脫脂/低脂干奶。?封閉劑應(yīng)在含有0.1%Tween?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑,以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確保抗體在孵育步驟中均勻分布,請在封閉液中稀釋抗體,包含Tween?20表面活性劑。 如何使上海MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器商家
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