lon@CrescendoWesternHRP基材WBLUR0500500毫升Immobilon@ClassicoWesternHRP底材WBLUC0500500毫升Immobilon@WesternHRP基材WBKLS05零零5零零毫升Immobilon@ECLUltraWestemHRP基材WBULS05零零5零零毫升TMB,不溶61毫升用于免疫檢測的Immobilon@信號增強劑WBSH05S05零零5零零毫升免疫印跡封閉劑20-20020克Re-BlotTMPlus強力抗體剝離解決方案,10倍25毫升Immobilon@Block-CH緩沖液WBAVDCH01S05零零毫升Immobilon@Block-FL緩沖液WBAVDFL01500毫升Immobilon@Block上海益啟生物的樣本制備儀詢價公司電話。虹口區Merck電阻儀Merck儀器銷售
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NAP i.d. @ 2.0蛋白b。 SNAP i.d.e蛋白檢測.. 標準檢測系統迷你印跡系統首先代,單井免疫檢測用A431 EGF刺激的細胞裂解液(20至0.08 ug)轉移到Immobilong-P膜上。印跡是用TBST中制備的0.5%NFDM封閉,并進行探測具有主要抗erbB2(04-291)和次要HRP-共軛山羊抗小鼠(AP124P)在以下條件下如上所示。印跡暴露于X射線膠片5分鐘。 圖3. Tau-1蛋白的免疫檢測:SNAP i.d.2.0系統(MultiBlot,Midi和Mini)與標準免疫檢測b。 SNAPi.d.o 2.0C。 SNAP i.d.8 2.01.標準一種。 SNAP id.o 2.0 MutiBlot迷你印跡Midi污點免疫檢測Azheimers bran
Westem HRP基材。高背景分鎖不足更改為不同的阻止解決方案。吸筆架不夠濕組裝前,先將吸墨紙架弄濕。阻塞解決方案可能有始終準備新鮮的0.5%脫脂/低脂干奶。降級的抗體濃度過高降低抗體的濃度。吸筆架朝上放置將印跡架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗滌不足進行至少4次每次30 mL的洗滌。添加清洗劑時,確保真空連續運行緩沖。整個系統電平不一致的信號確保系統在平坦的水平表面上。污點抗體不均勻補充封閉液和抗體稀釋劑遍及整個表面0.1%Tween 20表面活性劑。吸墨紙架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整個印跡中的抗體。應用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印跡)抗體。抗體體積低沒有抗體回收盤確保抗體中的孔,回收托盤algn益啟生物公司帶您了解WB實驗加速器詳情。
關閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當的檢測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標準免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座上海益啟生物的超濾杯詢價公司電話。虹口區Merck電阻儀Merck儀器聯系人
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15分鐘。圖4.擴展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對于HRP偶聯的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化(1小時):,SNAP i.d.o 2.0系統1小時協議與SNAP i.d.9 2.0系統標準協議與標準免虹口區Merck電阻儀Merck儀器銷售
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