潤濕印跡。，對于大多數應用和大多數抗體而言，0.5％的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意：請勿使用濃度高于0. 5％的干奶，因為它可能會導致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液，請參閱表5了解兼容性和推薦濃度?！裨谙礈?，封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1％Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力，并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統中的免疫檢測時間很短，因此建議在開始操作之前應準備一抗和二抗稀釋液。●MultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL，Mini blot固定器為5 mL，10 mL用于Midi印跡固定器。，每次需要洗30次（MultiBlot為15毫升），以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。上海益啟生物WB實驗加速器訂購方便。奉賢區MerckWB實驗加速器Merck儀器

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A板。在“手動模式”選項卡上（圖7），單擊“運行液體灌注”序列按鈕。或者，在“協議編輯器”選項卡上（圖8）輸入所需的步驟和條件。建議的壓力1-5組井的流動時間為34.5kPa（5psi）和5分鐘，分別。注意：對于傾向于黏附或聚集的細胞，請充分灌注第8組以及第1-5井組將使細胞在細胞中附著于通道的發生率裝貨有關創建協議的更多信息，請參考CelIASICD圖5.CellASICONIX2微流體系統的生產線《ONIX2MicrofluidicSystem用戶指南》。使用空氣壓力實現流量控制，使每一個中的液體都充滿單元加載出色地。板上的多個孔被組合在一起，并通過使用CelASICDONIX2微流體系統的壓力驅動方法通過油路的單個氣動管線每套油井被稱為“油井”。groupA真空管線用于將板密封到萬用板

測 注意：所有抗體均使用0.5％NFDM作為封閉劑和Luminata?Forte Western HRP進行測試作為化學發光試劑的底物。 印跡阻止 ?SNAPi.d.?2.0系統與比較常用的封閉劑兼容，包括脫脂/低脂干燥牛奶，牛血清白蛋白（BSA）和酪蛋白。許多其他市售阻滯劑也兼容（請參閱表5）。?為了確保比較佳的墨量通過吸墨架，必須完全封閉封閉液溶解且不含所有顆粒物質。在某些情況下，可能有必要降低封閉劑以達到所需的流量。?不建議使用濃度高于0.5％的脫脂/低脂干奶。?封閉劑應在含有0.1％Tween?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑，以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確?？贵w在孵育步驟中均勻分布，請在封閉液中稀釋抗體，包含Tween?20表面活性劑。 如何使上海益啟生物細胞分析儀訂購方便。

Westem HRP基材。高背景分鎖不足更改為不同的阻止解決方案。吸筆架不夠濕組裝前，先將吸墨紙架弄濕。阻塞解決方案可能有始終準備新鮮的0.5％脫脂/低脂干奶。降級的抗體濃度過高降低抗體的濃度。吸筆架朝上放置將印跡架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗滌不足進行至少4次每次30 mL的洗滌。添加清洗劑時，確保真空連續運行緩沖。整個系統電平不一致的信號確保系統在平坦的水平表面上。污點抗體不均勻補充封閉液和抗體稀釋劑遍及整個表面0.1％Tween 20表面活性劑。吸墨紙架使用小量移液器（例如5毫升），慢慢散布整個印跡中的抗體。應用至少2.5 mL（用于MultBlot），5 mL（用于Mini blot）或10 mL（用于Midi印跡）抗體?？贵w體積低沒有抗體回收盤確保抗體中的孔，回收托盤algn益啟生物公司帶您了解細胞跨膜電阻儀詳情。虹口區MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器商家

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15分鐘。圖4.擴展孵化（過夜）：SNAP i.d.8 2.0系統與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）轉移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5％NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒，標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，對于HRP偶聯的二抗山羊抗兔（AP132P），將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后，將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化（1小時）：，SNAP i.d.o 2.0系統1小時協議與SNAP i.d.9 2.0系統標準協議與標準免奉賢區MerckWB實驗加速器Merck儀器

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