關閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當的檢測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標準免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座上海益啟生物的細胞計數器詢價公司電話。金山區Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器銷售
中移出并在恒定的溫度下孵育顫抖。如果需要過度保溫,建議冷藏。雖然表面上的污點支架可能看起來部分干燥,印跡不會變干,因為溶液包含在框架中。注意:如果長時間處理多個印跡,則可以堆疊印跡固定框架減少工作空間??蛇x:如果要回收一抗,請先將抗體回收盤放入底座,然后再繼續執行步驟4。4.延長孵育時間后,將框架放回底座上,卸下蓋子,然后按照步驟8進行操作。通用議定書第12條。注意:SNAP i.d不需要延長二抗的孵育時間。 2.0系統。建議使用5倍濃度的二抗,持續10分鐘。抗體回收1.執行《通用議定書》的步驟1至5,但將真空時間增加到2分鐘,以確保所有的封閉溶液都已從框架的凹槽和通道中移除。2.從底座上取下印跡固定框架,并用一根刷子擦拭框架底部的所有殘留液體。紙巾。3.將抗體收集盤放入底座,確??贵w上的定嘉定區MerckWB實驗加速器Merck儀器哪家好上海益啟生物的電阻儀詢價公司電話。
白的免疫檢測:SNAP i.d.“ 2.0系統與SNAP 1.d.系統(首先代)與標準免疫檢測一種。 SNAPi.d。 2.0蛋白質檢測b。快照蛋白質檢測。標準系統Midi印跡系統首先代,單孔免疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液(10-0.63 ug)被轉移到Immobilon9-P膜上。印跡被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的鹽水中制備含0. 1%Tweene 20表面活性劑(TBST),并用主要抗B-Tubulin探測(MAB3408)和次級HRP偶聯的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。圖2. erbB2的免疫檢測:SNAP i.d.9 2.0系統與SNAP i.d.系統(首先代)與標準免疫檢測s。 S
養室培養室的面積為20x1.2毫米,陷阱高度為0.7,09.1.1。13.23和45um。帶正蛋白標記的支持帖保持統一的高度入口功能和下表列出了每個培養單位的比較小/比較大狼數量。圖1.平板配置BD04A板具有4個單獨分別的單元[A-DI。每個都有5個進水口(1-5升細胞入口(8升細胞(6)。大出口井(7)。流動)每個通道的孔(A-D)的阻力都匹配處理相應的培養室。板已發貨用PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)溶液預涂,可以在實驗之前,請先將其替換為所選擇的緩沖液。盤子是給的只能使用一次。 細胞誘捕機制局限性該板與乙酸和有機溶劑(例如餅酮,乙醇和甲醇的命運應進行相容性測試在使用前與其他酸或有機溶劑一起使用。印版操作如果需要溫度控制,請使用CellASICONIX2集成塊XT(CAx2-MXT20]。請參閱Cel采購細胞跨膜電阻儀哪家靠譜?
陽光直射的地方。 細胞培養使用CellASICOONIX2微流體系統進行細胞培養1.從孔中吸出溶液以用于灌注(孔1-5)。向這些孔中添加350μL培養基。確保未使用溶液入口孔中充滿了緩沖液。2.清空6號和8號孔,以確保在更換過程中正確交換溶液灌注。3.按照以下說明將微流體板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流體系統用戶指南。4打開CellASICOONIX2軟件,選擇“新建”之一實驗選項,然后在下拉列表中找到B04A板。單擊協議編輯器選項卡,然后輸入所需的步驟,然后情況。對于1-5井,建議的壓力為6.9-13.8kPa(1-2psi)可提供足夠的營養,并且營養含量極低壓力。有關創建協議的信息,請參閱CellASICB《ONIX2微流體系統用戶指南》。5.為了監測細胞生長,將一個合格的超濾杯具備怎么樣的特點?寶山區Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器聯系人
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項卡(圖8)創建和啟動自定義協議。要手動控制流量,使用“手動模式”標簽選擇所需的井,壓力,和溫度(如果使用加熱歧管)。有關自動化協議或每次融合的手冊,請參閱CellASICO《ONIX2微流體系統用戶指南》。注意:對于需要快速交換溶液的實驗,請執行以下操作可以應用以下技術:高壓(55.2kPa[8psi)下的流量對于初始過渡,然后將流量減小到標準壓力長期暴露于6.9-13.8kPa(1-2psi)。 軟件操作下圖顯示了使用ellAsICEONX2軟件進行實驗的兩種模式,請參閱CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用戶有關軟件功能的詳細信息的指南。圖7.手動模式降低了ONIX2系統的迭代操作??梢允謩釉O置操作參數,此模式a5o提供了選項運行簡短的自動印版設置序列,這些序列金山區Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器銷售
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