每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值,直到達到平臺,提示細胞已經形成致密單層;或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率,以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞,可以繼續培養而比熒光黃法更為普遍地被采用。細胞單層匯合后,用DPBS清洗一次細胞,加入含有不同濃度藥物(一般10-200μM)的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運輸效果,則上層小室中加藥物,下層培養板孔里只加緩沖液;反之則相反。將培養板在37℃條件下培養(60rpm震蕩或者不震蕩)1-2h,到達時間之后,分別從細胞小室和培養孔里取出一定 體積緩沖液(一般50μL )轉移至新的轉運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物,分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液,通過多孔閃爍讀板儀讀值。哪家血清是有正規授權的?奉賢區細胞培養代理價格
取上述200μL細胞液加入小室,下室(培養板)加入900L含有10% FBS的培養基。不同規格的小室和培養板所加的體積不同,具體參考Millicell?產品說明書。37°C孵育24至72小時,依據**細胞類型而定。孵育結束,小心取出細胞小室,吸掉小室上層培養液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%結晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后進行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料,立即用棉簽擦去濾膜上層的細胞,自然靜置風干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細胞,隨機選取不同的視野計數并算平均值。結晶紫溶解濾膜下層細胞,然后用33%醋酸脫色,將結晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細胞穿透不均勻帶來的誤差。奉賢區Transwell小室細胞培養聯系方式上海益啟生物的細胞檢測試劑盒詢價公司電話。
BioporefPTFE)膜有助于提高細胞的存活力,**長超過40天;膜的透氧性及透光性也非常出色,推薦用于長期組織結構研究等有挑戰性的應用。 主要優點 ?經優化的膜確保獲得可靠的單層細胞結構 ?透明膜易于觀察和監控細胞生長 ?為各種培養和細胞水平研究制造了各種方便的產品形式 規格 Millicell?站立式細胞培養小室 Millicell? 和MultiScreen? 多孔板 膜質培養表面塑料多孔板根據其膜材質、膜孔徑及培養孔的數量分為很多產品。我們的Millicell? 培養板其頂部、底部及側面的特殊設計及墊高的 邊角都使它更適合Caco-2細胞培養。Millicell?細胞培養板對于獲得和維持單層細胞效果很好。
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