Thioredoxin-NP-27是一種腸激酶的底物,用于檢測腸激酶的活性。它是由硫氧還蛋白和NP-27融合而成,中間通過腸激酶的酶切位點(DDDDK)連接。這種底物在經過腸激酶酶切后,可以通過SDS-PAGE電泳觀察到分子量分別為18kDa和27kDa的兩條帶。腸激酶是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶,它在Lys的C端水解多肽。腸激酶可以將胰蛋白酶原轉變為胰酶,也可以將帶有這個識別序列的融合蛋白切開。在37℃,16小時內將0.5mg的反應底物Thioredoxin-NP-27切割為NP-27達95%所需的酶量定義為一個單位。腸激酶的活性單位定義為在37℃,16小時內將0.5毫克的Thioredoxin-NP-2795%降解為NP-27所需要的酶量。這種酶在基因工程產品開發中具有廣泛的應用,特別是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質的特異性斷裂。Thioredoxin-NP-27產品的優勢在于它符合GB/T41907-2022標準,適用于腸激酶活性檢測的底物。產品保存條件為-30~-15℃,運輸條件為≤0℃,以確保其穩定性和活性。使用時,應按照產品說明進行操作,并注意安全防護措施。TBE緩沖液因其穩定的pH值和良好的導電性,能夠為DNA電泳提供理想的條件。天津酵母表達高通量篩選技術服務
DNA Marker I:分子生物學實驗中的精細“標尺”在分子生物學實驗中,DNA Marker I是一種廣使用的DNA分子量標準,主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由多條不同長度的線狀雙鏈DNA片段組成,通常包含100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp等片段。其中,400 bp或500 bp的條帶通常亮度較高,便于在電泳過程中快速定位。DNA Marker I是一種即用型產品,已預混1×Loading Buffer,可直接取5-10 μL用于電泳,無需額外處理。其條帶清晰、亮度均勻,即使在低濃度的瓊脂糖凝膠中也能保持良好的分離效果。此外,該產品適用于1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠濃度,推薦使用TAE或TBE緩沖液進行電泳。DNA Marker I的主要用途是為DNA片段的大小估算提供參考。通過與樣品條帶的對比,研究人員可以快速判斷目標DNA片段的大小。它不僅適用于常規的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于基因克隆、PCR產物分析和質粒提取等實驗。在保存方面,DNA Marker I可在室溫下穩定保存3個月,長期保存建議置于-20℃。其穩定性和便捷性使其成為實驗室中理想的常備試劑。河北大腸桿菌表達VLP技術服務技術服務聚合酶鏈式反應(PCR)技術已成為不可或缺的工具,用于基因擴增、基因克隆以及基因表達分析等多個領域。
通過基因組編輯技術提高粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)的生物技術應用,可以從以下幾個方面進行:1.基因組測序與分析:對粘質沙雷氏菌進行全基因組測序,分析其基因組特征,識別與特定生物技術應用相關的基因和基因簇。例如,通過全基因組測序和分析,可以發現與植物生長促進相關的基因,如在菌株PLR中鑒定出的增強擬南芥側根形成的基因。2.基因編輯與功能研究:利用CRISPR-Cas9等基因編輯技術對目標基因進行敲除或敲入,研究其功能,并通過這些功能基因的調控提高菌株的性能。例如,通過敲除或敲入特定基因,可以增強粘質沙雷氏菌產生特定代謝產物的能力。3.基因組修飾:通過紅色同源重組技術對粘質沙雷氏菌進行基因組修飾,這種方法無需事先修改宿主,可以輕松刪除大至20kb的片段,或者在特定基因中插入反選擇基因,實現基因組的定向編輯。4.質粒工程:粘質沙雷氏菌的質粒在基因組多樣化中發揮重要作用。通過分析不同菌株的質粒,可以識別與特定表型相關的質粒,并進一步通過質粒工程來提高菌株的生物技術應用潛力。
TAFE凝膠電泳緩沖液(10×):高效、穩定的核酸電泳選擇TAFE凝膠電泳緩沖液(10×)是一種廣應用于核酸電泳的高效緩沖液,主要由200 mM Tris-乙酸和5 mM EDTA組成。這種緩沖液以10倍濃縮的形式提供,使用時需用蒸餾水或去離子水稀釋至1×工作液。產品特點高效分離:TAFE緩沖液在核酸電泳中表現出色,尤其適用于分離小片段核酸,能夠提供清晰的電泳條帶。穩定性高:10倍濃縮的設計使其在儲存和使用過程中更加穩定,適合長期保存。兼容性強:適用于瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。使用便捷:使用前只需稀釋至1×工作液,操作簡單。使用方法稀釋緩沖液:取適量的10×TAFE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液。例如,取10 mL的10×TAFE緩沖液,加入90 mL去離子水。制備凝膠:使用稀釋后的1×TAFE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。電泳操作:將核酸樣品加入凝膠孔中,使用1×TAFE緩沖液進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的核酸染料對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。保存與注意事項保存條件:TAFE凝膠電泳緩沖液(10×)應保存在室溫下,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:未開封的產品有效期為12個月。50×TAE是一種高濃度的緩沖液,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、醋酸鈉和EDTA(乙二胺四乙酸)。
在大腸桿菌中表達VLP(病毒樣顆粒)時,確保蛋白質的純度和活性是至關重要的。以下是一些關鍵步驟和技術:1.選擇正確的表達載體:使用能夠高效表達目標蛋白的質粒載體,并確保含有適當的啟動子和標簽(如His標簽、GST標簽等)以便于后續的純化和檢測。2.優化培養條件:調整培養條件,如溫度、pH、誘導劑濃度和培養時間,以化蛋白的可溶性表達和活性。3.細胞裂解:使用溫和的裂解方法,如超聲波或酶裂解,以保持蛋白的活性并減少非特異性的蛋白質降解。4.親和層析:利用融合標簽(如His標簽)進行一步或多步親和層析,以高效地從細胞裂解物中純化目標蛋白。5.離子交換層析:通過離子交換層析進一步去除親和層析中未去除的雜質,提高蛋白的純度。6.分子排阻層析(SEC):使用SEC來確保產品是均一的蛋白質,去除多聚體和大分子雜質。7.活性檢測:通過生物化學或生物物理方法(如ELISA、WB、酶活性測定、圓二色譜CD等)來評估蛋白的活性和構象。8.避免蛋白聚集:在表達和純化過程中,通過添加穩定劑(如甘油、蔗糖)和使用低溫操作來防止蛋白聚集。在保存方面,DNA Marker I可在室溫下穩定保存3個月,長期保存建議置于-20℃。畢赤酵母表達病毒樣顆粒
在分子生物學實驗中,DNA Marker V是一種廣使用的DNA分子量標準,主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段大小。天津酵母表達高通量篩選技術服務
10×MOPSRNA緩沖液是一種專為RNA電泳設計的緩沖液,通常用于瓊脂糖凝膠電泳中。以下是關于10×MOPSRNA緩沖液的一些詳細信息:1.主要成分:-MOPS(3-(N-嗎啉代)丙磺酸):一種緩沖劑,提供穩定的pH環境,適合RNA電泳。-EDTA:螯合金屬離子,防止RNase酶的活性。-其他成分:可能包括一些鹽類,如醋酸鈉或硼酸,以維持適當的離子強度。2.用途:-用于RNA電泳,包括總RNA、mRNA、小RNA等的分離和分析。-適用于甲醛變性的或非變性的瓊脂糖凝膠電泳。3.特點:-溫和的pH環境:MOPS緩沖液的pH值通常在7.0左右,適合RNA的穩定和遷移。-減少RNase污染:含有EDTA,有助于減少RNase酶的活性,保護RNA樣品。4.使用說明:-稀釋:在使用前,通常將10×MOPSRNA緩沖液稀釋至1×工作濃度。-制備凝膠:將瓊脂糖粉末與1×MOPSRNA緩沖液混合,加熱至瓊脂糖完全溶解,然后倒入凝膠模具中。-電泳:將RNA樣品與適當的上樣緩沖液混合后,加入凝膠孔中,接通電源進行電泳。5.保存條件:-通常建議在室溫下保存,避免長時間暴露在空氣中,防止水分蒸發或污染。-也可以在4℃下保存,延長其穩定性和使用壽命。天津酵母表達高通量篩選技術服務