Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE):高效、穩(wěn)定的DNA電泳緩沖液在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DN片段大小和純度的重要技術(shù)之一。Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE)作為一種高效、穩(wěn)定的緩沖液,因其廣的適用性和經(jīng)濟(jì)性,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。兼容性強(qiáng):TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:10×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過(guò)程中更加穩(wěn)定,只需按照說(shuō)明稀釋即可使用,無(wú)需額外配制。在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段大小。吉林大腸桿菌表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)開發(fā)
DNA Marker VII:精細(xì)助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)在分子生物學(xué)研究中,DNA Marker VII是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由6條帶狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋300 bp到2500 bp的分子量范圍,具體條帶大小分別為300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。DNA Marker VII具有明顯的實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢(shì)。其中,1500 bp的條帶濃度為100 ng/5 μL,顯示為加亮帶,便于快速定位和半定量分析,而其他條帶濃度約為50 ng/5 μL。此外,該產(chǎn)品已預(yù)混1×loading buffer,可直接取2-5 μL進(jìn)行電泳,操作簡(jiǎn)便,電泳圖像清晰。在實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker VII適用于多種瓊脂糖凝膠濃度,建議電泳條件為1.0%的凝膠濃度、5-7 cm的凝膠長(zhǎng)度、4-10 V/cm的電壓,電泳時(shí)間約為20-25分鐘。通過(guò)EB染色或Goldview等染料進(jìn)行染色后,可在紫外燈下清晰觀察條帶。DNA Marker VII的保存條件為-20℃,有效期可達(dá)一年,短期頻繁使用可置于4℃保存。它不僅適用于DNA片段大小的確定,還可用于DNA含量的粗略定量,但不適用于精確定量。總之,DNA Marker VII憑借其清晰的條帶、便捷的操作和穩(wěn)定的性能,已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,為科研人員提供了可靠的分子量參考。安徽大腸桿菌表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)研發(fā)Phusion DNA Polymerase具有極高的保真性,其錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍以上,比Pfu DNA聚合酶低6倍。
Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE):分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的經(jīng)典選擇在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關(guān)鍵技術(shù),而Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE)作為經(jīng)典的緩沖液之一,因其高效、穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于DNA電泳實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、乙酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TAE緩沖液具有較低的離子強(qiáng)度,適合分離大分子量的DNA片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA片段的清晰分離。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:50×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本。兼容性強(qiáng):TAE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。穩(wěn)定性高:液體形式的TAE緩沖液在保存和使用過(guò)程中更加穩(wěn)定,只需按照說(shuō)明稀釋即可使用,無(wú)需額外配制。使用方法使用Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE)時(shí),需按照以下步驟操作:稀釋緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量的50×TAE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液。
Fc融合蛋白技術(shù)通過(guò)將Fc片段(免疫球蛋白G的恒定區(qū))融合到目標(biāo)蛋白上,可以帶來(lái)以下提高蛋白穩(wěn)定性的優(yōu)勢(shì):1.提高溶解度:Fc片段通常具有較高的溶解性,能夠減少目標(biāo)蛋白的聚集,從而提高其在細(xì)胞內(nèi)的溶解度。2.延長(zhǎng)半衰期:Fc片段具有較長(zhǎng)的體內(nèi)半衰期,這一特性可以傳遞給融合蛋白,延長(zhǎng)其在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間。3.增強(qiáng)穩(wěn)定性:Fc片段的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性有助于維持融合蛋白的構(gòu)象,減少變性和降解。4.免疫效應(yīng):Fc片段可以與體內(nèi)多種免疫相關(guān)細(xì)胞和因子相互作用,如通過(guò)Fcγ受體介導(dǎo)的效應(yīng),增強(qiáng)蛋白的免疫原性或免疫調(diào)節(jié)功能。5.易于純化:Fc片段可以利用蛋白A或蛋白G親和層析高效地從培養(yǎng)液中純化融合蛋白。6.改善藥代動(dòng)力學(xué)特性:Fc片段的融合可以改善蛋白的藥代動(dòng)力學(xué)特性,例如改變其在體內(nèi)的分布和清理速率。7.減少免疫原性:Fc片段有時(shí)可以掩蓋目標(biāo)蛋白的免疫原性表位,減少其在體內(nèi)的免疫反應(yīng)。8.促進(jìn)ADCC效應(yīng):Fc片段可以介導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)效應(yīng),增強(qiáng)對(duì)特定細(xì)胞的靶向作用。DL10000 DNA Marker適用于1%-2%的瓊脂糖凝膠濃度,能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)條件下的需求。
DNA Marker IV:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker IV 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小和進(jìn)行粗略定量。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠?yàn)镈NA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DNA Marker IV 由6-7條線狀雙鏈DNA片段組成,具體片段大小包括200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、4500 bp和7000 bp。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,使用時(shí)無(wú)需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存六個(gè)月,長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-1.5%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5-1×TBE緩沖液,電壓4-10 V/cm,電泳時(shí)間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用質(zhì)量好的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當(dāng)增加Marker的上樣量。Pfu DNA Polymerase在多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色,尤其適用于高保真PCR、基因克隆、定點(diǎn)突變和DNA測(cè)序等。河北畢赤酵母表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
DL2000 DNA Marker不僅在實(shí)驗(yàn)室中表現(xiàn)出色,還因其高性價(jià)比而受到廣歡迎。吉林大腸桿菌表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)開發(fā)
除了畢赤酵母,還有幾種常用的表達(dá)系統(tǒng)可以用來(lái)提高重組蛋白的表達(dá)量和純度:1.大腸桿菌(Escherichiacoli)表達(dá)系統(tǒng):大腸桿菌是常用的原核表達(dá)系統(tǒng),具有遺傳背景清晰、培養(yǎng)簡(jiǎn)單、成本低廉等優(yōu)點(diǎn),適合快速表達(dá)和生產(chǎn)目的蛋白。但是,它不能進(jìn)行復(fù)雜的翻譯后修飾。2.釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)表達(dá)系統(tǒng):釀酒酵母是一種真核表達(dá)系統(tǒng),具有蛋白質(zhì)翻譯后加工能力,適合于表達(dá)真核的蛋白,且培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化操作簡(jiǎn)便,適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。3.昆蟲/桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng):這種系統(tǒng)可以對(duì)真核的蛋白進(jìn)行翻譯后加工,適合于表達(dá)復(fù)雜糖蛋白,且具有較高的表達(dá)量和純度。4.哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):如HEK293細(xì)胞,能夠進(jìn)行與人類相似的翻譯后修飾,適合表達(dá)需要復(fù)雜糖基化等修飾的蛋白,但成本相對(duì)較高。5.枯草桿菌(Bacillussubtilis)表達(dá)系統(tǒng):枯草桿菌具有蛋白分泌能力強(qiáng)、培養(yǎng)簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),適合于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)。6.粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe):其生理特性接近高等生物,適合表達(dá)真核膜蛋白。每種表達(dá)系統(tǒng)都有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和局限性,選擇時(shí)需要考慮目標(biāo)蛋白的特性、所需的翻譯后修飾、成本、產(chǎn)量以及純化路線等因素。吉林大腸桿菌表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)開發(fā)
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