Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個(gè)步驟：1.**識(shí)別與結(jié)合**：-Cre重組酶首先識(shí)別并分別結(jié)合兩個(gè)LoxP序列的兩個(gè)反向重復(fù)序列，形成一個(gè)二聚體。2.**四聚體形成**：-兩個(gè)二聚體互相靠近，形成由四個(gè)Cre分子與兩個(gè)LoxP位點(diǎn)結(jié)合形成的四聚體復(fù)合物。3.**DNA切割與交換**：-Cre重組酶在每個(gè)LoxP位點(diǎn)的間隔序列中引導(dǎo)單鏈切割，產(chǎn)生帶有3’端羥基的斷裂。每個(gè)LoxP位點(diǎn)的兩個(gè)單鏈分別被切割。切割產(chǎn)生的自由3’端與對側(cè)的3’端進(jìn)行交換和重連，形成Holliday交叉結(jié)構(gòu)。4.**分子重組與解旋**：-Holliday交叉結(jié)構(gòu)通過Cre酶的作用被解旋并重組，形成新的重組產(chǎn)物。這個(gè)過程導(dǎo)致兩個(gè)LoxP位點(diǎn)之間的DNA序列被刪除、反轉(zhuǎn)或易位，具體效果取決于LoxP序列的排列方式（方向和位置）。5.**條件性基因編輯**：-通過建立特異性Cre小鼠，該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)，可在特定細(xì)胞或組織或全身表達(dá)Cre重組酶。與帶有Lox位點(diǎn)的Flox小鼠雜交，子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠，實(shí)現(xiàn)條件性基因打靶（表達(dá)或敲除靶基因）。來源于Francisella tularensis：FnCas12a是一種來源于Francisella tularensis菌株的核酸內(nèi)切酶。Recombinant Mouse SF-20/IL-25

SYBR Green I核酸染料10000×：性能助力科研突破SYBR Green I是一種廣泛應(yīng)用于核酸分析的熒光染料，以其性能和安全性在科研領(lǐng)域備受青睞。其10000×高濃度配方為實(shí)驗(yàn)提供了更高的靈活性和便利性。高靈敏度與特異性SYBR Green I是一種高靈敏度的dsDNA熒光染料，能夠與雙鏈DNA的小溝結(jié)合，熒光信號(hào)增強(qiáng)800-1000倍。在qPCR等實(shí)驗(yàn)中，其檢測靈敏度可達(dá)20 pg DNA，比傳統(tǒng)溴化乙錠（EB）染色高出25-100倍。這種高靈敏度使其在低拷貝數(shù)的核酸檢測中表現(xiàn)出色，尤其適用于珍貴樣本的分析。安全與環(huán)保與傳統(tǒng)的EB染料相比，SYBR Green I屬于花青類染料，無致病性，使用更加安全環(huán)保。這一特性使其成為實(shí)驗(yàn)室中理想的替代品，尤其適合頻繁接觸染料的研究人員。廣泛的應(yīng)用場景SYBR Green I適用于多種科研應(yīng)用，包括凝膠電泳、qPCR、等溫?cái)U(kuò)增、流式細(xì)胞術(shù)以及精子膜完整性評估等。在凝膠電泳中，它支持預(yù)染和后染兩種方法，操作簡便，無需脫色或沖洗。此外，其在qPCR中的表現(xiàn)也十分出色，能夠提供準(zhǔn)確的定量結(jié)果。Recombinant Human LILRB1/CD85j/ILT2 Protein,mFc TagPhusion DNA Polymerase是一種高性能的熱穩(wěn)定DNA聚合酶，以其高保真度快速擴(kuò)增和穩(wěn)健反應(yīng)而聞名于科研領(lǐng)域。

高靈敏度與特異性該試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系和新一代TaqDNA聚合酶，結(jié)合高效的逆轉(zhuǎn)錄酶，能夠在低濃度RNA樣本中實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測。其特異性高，即使在復(fù)雜的樣本中，也能通過熔解曲線分析呈現(xiàn)單一峰，避免非特異性擴(kuò)增。防污染設(shè)計(jì)OneStepRT-qPCRSYBRGreenKit(UDGPlus)內(nèi)置dUTP/UDG防污染系統(tǒng)，能夠有效降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，防止實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。這一特性在病毒檢測和低豐度基因表達(dá)分析中尤為重要。操作簡便該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)整合在同一管中完成，避免了多次開蓋操作，減少了人為誤差和污染風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)，預(yù)混液的設(shè)計(jì)使得實(shí)驗(yàn)操作更加便捷，用戶只需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng)。示蹤染料輔助試劑盒中的反應(yīng)緩沖液含有惰性示蹤染料，通過顏色變化（如藍(lán)色與黃色混合后變?yōu)榫G色）直觀判斷樣本是否加入，提高了實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和可靠性。兼容性該試劑盒適用于多種qPCR儀器，并提供不同濃度的ROX校正染料，以滿足不同儀器的需求。

Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌（Thermophilic Geobacillus sp）DNA聚合酶I衍生的酶，缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關(guān)于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關(guān)鍵信息：來源和特性：Bst Plus DNA Polymerase 具有更強(qiáng)的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性，適合用于抗污染的等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，如LAMP和CPA等。應(yīng)用：主要應(yīng)用于等溫DNA擴(kuò)增，包括環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）和其他等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。規(guī)格：活性定義：1 U指的是在65°C下30分鐘內(nèi)將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質(zhì)中的酶的量。溶液成分：包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油，pH 7.5 @ 25℃。產(chǎn)品形式：提供的產(chǎn)品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)，貨號(hào)14402ES，以及凍干粉形式的產(chǎn)品，貨號(hào)14405ES，不含甘油。靈敏度和穩(wěn)定性：Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度，低至5copies目的基因可測，且在飛克（fg）級別的模板量下也能快速達(dá)到閾值。在37°C下，該酶可以保持相對穩(wěn)定的效應(yīng)長達(dá)5天，并且在-20℃下可以穩(wěn)定保存2年。儲(chǔ)存條件：建議在-25℃至-15℃下儲(chǔ)存，以保持產(chǎn)品活性，并避免反復(fù)凍融。Pfu酶的熱穩(wěn)定性優(yōu)于Taq酶，即使在98℃的高溫下也能保持活性，特別適合高GC含量模板的擴(kuò)增。

DNA片段大小對磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的回收率有影響。根據(jù)搜索結(jié)果，我們可以得出以下結(jié)論：1.**小片段DNA（小于200bp）**：對于小于200bp的DNA片段，回收率會(huì)下降。這是因?yàn)樾∑蔚腄NA與固相基質(zhì)的結(jié)合力相對較弱，因此相對損失較大，導(dǎo)致回收率降低。在某些情況下，小于100bp的DNA片段的回收率可能只有30-60%。2.**中等大小片段DNA（200bp-4kb）**：在這個(gè)范圍內(nèi)的DNA片段，通?；厥章瘦^高，可以達(dá)到80-95%。這是因?yàn)檫@些片段大小適中，既不會(huì)因太小而損失，也不會(huì)因太大而難以洗脫。3.**大片段DNA（大于4kb）**：對于大于4kb的DNA片段，回收率也會(huì)下降，通常在30-50%之間。這是因?yàn)榇笃蔚腄NA與固相基質(zhì)的結(jié)合力更強(qiáng)，因此更難洗脫。4.**片段大小與回收率的關(guān)系**：DNA片段越大，和固相基質(zhì)的結(jié)合力越強(qiáng)，就越難洗脫，回收率就越低。相反，DNA的量越少，相對損失越大，回收率也越低。5.**操作技巧**：為了提高回收率，可以采取一些操作技巧，比如減少切膠體積、確保溶膠徹底、使用合適的洗脫液體積和pH值等。

在對亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化后的DNA進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，Hot-Start Taq DNA Polymerase能夠提供高特異性和高靈敏度的擴(kuò)增效果。Recombinant Mouse SF-20/IL-25

核酸內(nèi)切酶VIII（EndonucleaseVIII）是一種來自大腸桿菌的DNA損傷修復(fù)酶，具有以下特點(diǎn)：1.**雙功能活性**：核酸內(nèi)切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**釋放受損嘧啶堿基**：N-糖基化酶活性可以釋放雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，生成一個(gè)脫嘌呤(apurinic,AP)位點(diǎn)。3.**切割A(yù)P位點(diǎn)**：AP裂解酶活性可以切割A(yù)P位點(diǎn)的3'和5'端，產(chǎn)生一個(gè)具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。4.**識(shí)別并切除受損堿基**：核酸內(nèi)切酶VIII可以識(shí)別并切除多種受損堿基，包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內(nèi)酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲。5.**與EndonucleaseIII的區(qū)別**：雖然核酸內(nèi)切酶VIII與核酸內(nèi)切酶III相似，但核酸內(nèi)切酶VIII具有β和δ裂解酶活性，而核酸內(nèi)切酶III具有β裂解酶活性。6.**應(yīng)用領(lǐng)域**：核酸內(nèi)切酶VIII可以應(yīng)用于單細(xì)胞凝膠電泳、NGS建庫中DNA損傷修復(fù)、酶法合成DNA中釋放DNA鏈、堿洗脫，搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)進(jìn)行含U片段的克隆等。