磁珠法質粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米顆粒固相核酸富集技術來純化質粒DNA的產品。它通常包括高性能納米磁珠和獨特的緩沖體系組合,通過裂解菌體后釋放的DNA,能夠有效地結合于磁珠表面,漂洗除雜后獲得高質量的目的質粒。以下是磁珠法質粒小量抽提試劑盒的一些主要特點和應用:1.**快速簡便**:操作步驟簡單,無需多次離心,整個抽提過程通常只需20-25分鐘。2.**高得率和純度**:可以從1-5ml新鮮大腸桿菌菌液中分離純化2-20μg高質量的質粒DNA。純化得到的DNA質量高,完整性好,OD260/280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/230比值大于2.0。3.**適用性廣**:適用于1-5mL小體積高通量菌液質粒抽提,且抽提所得的質粒DNA可直接用于酶切、測序、文庫篩選、連接和轉化等各種下游分子生物學實驗。4.**自動化兼容**:可整合移液法自動化儀器和磁棒法自動化儀器進行高通量提取實驗。5.**安全性高**:操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環保和安全。6.**成本效益**:相比傳統的離心柱法,磁珠法可以減少離心次數,獲得完整性更好的質粒,且操作更為簡便快捷。7.**操作靈活**:磁珠的使用量可靈活調節,適合不同體積和濃度的樣品處理。Tn5 轉座酶可用于多種生物體,包括許多革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌以及酵母等。Recombinant Human PAH (D415N) Protein,His Tag
Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在PCR產物的克隆中主要應用在以下幾個方面:1.**單鏈DNA的生成**:-Lambda核酸外切酶可以用于從雙鏈DNA中生成單鏈DNA。由于該酶沿5'→3'方向逐步切去5'單核苷酸,底物是5'磷酸化的雙鏈DNA,因此可以用來消化PCR產物中的一條鏈,從而生成單鏈DNA,這對于某些克隆技術來說是必要的步驟。2.**PCR產物的克隆**:-在克隆過程中,有時需要將PCR產物的5'端磷酸化,以便與載體連接。Lambda核酸外切酶可以消化非磷酸化的DNA,從而在一定程度上幫助準備適合克隆的PCR產物。3.**減少自身環化和非特異性連接**:-在連接反應中,為了減少質粒載體的自身環化,可以使用堿性磷酸酶處理質粒DNA以去除5'磷酸基團。而Lambda核酸外切酶可以消化5'端磷酸化的DNA,因此在某些情況下,它可以輔助減少PCR產物的自身環化,尤其是在PCR產物和質粒載體的連接反應中。4.**提高克隆效率**:-通過消化PCR產物中的一條鏈,Lambda核酸外切酶可以幫助減少PCR產物的非特異性連接,從而提高克隆的效率和準確性。綜上所述,Lambda核酸外切酶在PCR產物的克隆中主要通過生成單鏈DNA、準備適合克隆的PCR產物、減少自身環化和非特異性連接以及提高克隆效率等方面發揮作用。Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi TagHifair? Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit :適用于從總RNA或mRNA模板合成鏈cDNA,具有高熱穩定性。
磁珠法在基因克隆中的應用主要體現在以下幾個方面:1.**質粒DNA的提取**:磁珠法可以用于從細菌細胞中提取質粒DNA,這對于質粒的克隆和表達至關重要。通過磁珠法提取的質粒DNA純度高,適合用于后續的酶切、連接、轉化等分子克隆步驟。2.**基因組DNA的提取**:磁珠法可以用于從各種生物樣本中提取基因組DNA,這對于基因組的克隆和分析非常重要。提取的基因組DNA可以用于PCR擴增、基因表達分析、基因突變檢測等。3.**mRNA的提取和純化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和純化mRNA,這對于cDNA的合成和基因表達分析非常關鍵。磁珠法提取的mRNA純度高,可以用于后續的cDNA合成和RT-PCR等實驗。4.**PCR產物的純化**:磁珠法可以用于純化PCR產物,去除反應中的酶、dNTPs和其他雜質,為克隆PCR產物提供高純度的DNA模板。5.**DNA片段的篩選和回收**:在基因克隆過程中,可能需要從多個DNA片段中篩選出特定大小或序列的片段。磁珠法可以用于DNA片段的篩選和回收,提高克隆效率。6.**自動化和高通量操作**:磁珠法易于與自動化設備結合,適合高通量樣本處理,這對于大規模基因克隆項目尤為重要。自動化操作減少了人為操作誤差,提高了實驗的重復性和可靠性。
T5核酸外切酶在基因編輯中確實有應用,并且具有一些優勢:1.**提高編輯效率**:根據一篇研究文章,T5核酸外切酶可以與CRISPR/Cas系統共表達或融合,以提高基因編輯的效率。這種共表達或融合可以增加indel(插入和缺失)頻率,盡管增加的幅度可能不大。2.**增強基因編輯效果**:在另一項研究中,通過使用螺旋-螺旋二聚體肽(coiled-coilpeptides)將T5核酸外切酶招募到Cas9或Cas12a蛋白上,可以提高基因編輯的效率,這種方法被稱為CCExo(CRISPR-Coiled-coil-Exonuclease)。這種招募方式優于共表達和直接融合,其中強的親和力CC對顯示出高的突變頻率和刪除長度。3.**應用于多種細胞類型**:CCExo系統在多種細胞系和原代細胞中都能有效地提高基因失活效率,并且在慢性髓性白血病(CML)患者的原代細胞以及異種移植動物模型中展示了其應用潛力,這表明CCExo方法可能成為CML和其他遺傳性疾病的潛在選擇。T5核酸外切酶與CRISPR核酸酶蛋白進行融合,并引入了核定位信號(NLS)序列以構建表達載體,用于基因編輯。綜上所述,T5核酸外切酶在基因編輯中的應用可以增強編輯效率和效果,尤其是在與CRISPR/Cas系統結合使用時。在gRNA的引導下,Cas9 NLS可以對特定DNA序列進行剪切,適用于研究基因功能或進行基因編輯 。
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關鍵信息:來源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫擴增反應,如LAMP和CPA等。應用:主要應用于等溫DNA擴增,包括環介導等溫擴增(LAMP)和其他等溫擴增技術。規格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產品形式:提供的產品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號14402ES,以及凍干粉形式的產品,貨號14405ES,不含甘油。靈敏度和穩定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測,且在飛克(fg)級別的模板量下也能快速達到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對穩定的效應長達5天,并且在-20℃下可以穩定保存2年。儲存條件:建議在-25℃至-15℃下儲存,以保持產品活性,并避免反復凍融。通過SDS-PAGE、Western blot、質譜等方法驗證蛋白的純度和分子量。通過活性測試評估蛋白的生物活性。Recombinant Cynomolgus TNF alpha Protein,His Tag
通過測序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和測序)來驗證gRNA的編輯效率,篩選出效率高的gRNA序列 。Recombinant Human PAH (D415N) Protein,His Tag
耐高鹽全能核酸酶與一般核酸酶的主要區別體現在以下幾個方面:1.**鹽耐受性**:-**耐高鹽全能核酸酶**:具有較高鹽濃度耐受性,在150-900mM鹽濃度范圍內有效,尤其在600-700mM鹽濃度下活性比較好。-**一般核酸酶**:大多數全能核酸酶在高鹽環境下會失活,酶切效果降低。2.**活性條件**:-**耐高鹽全能核酸酶**:在0.5MNaCl條件下具有比較好活性,這使得它在高鹽環境下也能保持高效。-**一般核酸酶**:可能在低鹽或無鹽條件下活性更高,但在高鹽條件下活性受限。3.**應用領域**:-**耐高鹽全能核酸酶**:廣泛應用于生產工藝流程中高鹽環境下核酸污染去除,如病毒純化、疫苗生產、蛋白和多糖類制藥工業等。-**一般核酸酶**:可能更多用于一般的分子生物學實驗,如DNA或RNA的降解,但不特別針對高鹽環境。4.**酶切效果**:-**耐高鹽全能核酸酶**:能夠有效去除核酸殘留,將所有類型的DNA和RNA降解為3~5個堿基片段。-**一般核酸酶**:酶切效果可能受到高鹽環境的影響,導致效率降低。5.**pH范圍**:-**耐高鹽全能核酸酶**:具有寬泛的pH范圍(7.0-11.0),在這一范圍內保持活性。-**一般核酸酶**:可能具有更窄的pH活性范圍。Recombinant Human PAH (D415N) Protein,His Tag
Recombinant Human SPARC(BM-40)
Recombinant Human SLPI Protein
C-telopeptide
Recombinant Biotinylated Human MADCAM1 Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse LIX/CXCL5
Recombinant Human VEGFR1/FLT-1 Protein
NY-BR-1 p904 (A2)
Recombinant Mouse CDH3/Cadherin 3 Protein
Recombinant Human CHRDL1 Protein