PreScissionProtease（PSP）是一種在蛋白質(zhì)純化和分析中使用的酶，具有以下特點：1.**特異性識別**：PSP能在低溫（4°C）下特異性識別八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro，并在Gln和Gly之間進行酶切。2.**應用**：PSP常用于去除融合蛋白中的GlutathioneS-transferase(GST)、His等標簽，有助于純化目的蛋白。3.**純度高**：PSP的純度達到95%以上，確保了實驗的準確性和重復性。4.**穩(wěn)定性好**：PSP在含有50%甘油的儲存緩沖液中，-80℃長期儲存，有效期2年；小量分裝-20℃保存，有效期6個月。5.**酶活定義**：在5℃條件下反應16小時，能夠切割100μg的GST標簽蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。6.**兼容性強**：PSP的酶切體系中可以兼容1%TritonX-100、Tween-20或NP-40，10mMEDTA和500mMNaCl。7.**注意事項**：某些化合物如100mMZnCl2、4mMAEBSF和100μMChymostatin會抑制PSP的酶活性50%以上。8.**優(yōu)化酶切效率**：建議進行預實驗摸索實驗濃度，實際操作中，建議酶用量1:25-1:100U/μg融合蛋白。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實時熒光定量PCR的試劑盒，它結(jié)合了反轉(zhuǎn)錄和PCR擴增步驟。Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag

重組人血清白蛋白（rHSA）在藥物載體應用中提高藥物穩(wěn)定性和靶向性的機制主要包括以下幾點：1.**延長半衰期**：通過與rHSA融合，可以延長藥物分子在體內(nèi)的循環(huán)時間。例如，阿必魯肽（Tanzeum）是GLP-1與HSA的融合蛋白，其半衰期可延長至5天，每周給藥一次即可。2.**提高穩(wěn)定性**：rHSA作為載體，可以保護藥物分子不受體內(nèi)酶解和其他降解因素的破壞，從而提高藥物的穩(wěn)定性。例如，F(xiàn)GF21與HSA融合后，其體外穩(wěn)定性提升，抗胰蛋白酶降解能力和高溫條件下的穩(wěn)定性增加。3.**改善藥代動力學**：rHSA融合蛋白能夠改善藥物的藥代動力學特性，如改變藥物的分布和代謝，減少腎臟的損失，從而提高藥物在體內(nèi)的濃度和療效。4.**增強靶向性**：rHSA可以通過其天然的生物學特性，如與特定受體的結(jié)合，增強藥物對特定組織或細胞的靶向性。例如，rHSA可以通過其與FcRn受體的結(jié)合，實現(xiàn)對瘤組織的靶向性。5.**降低免疫原性**：rHSA作為一種內(nèi)源性蛋白質(zhì)，具有較低的免疫原性，可以減少藥物引起的免疫反應，提高藥物的安全性和耐受性。Recombinant Mouse VSTM5 Protein,hFc Tag研究表明，優(yōu)化后的Cas12a系統(tǒng)在多種細胞類型中表現(xiàn)出良好的編輯效率。

PreScissionProtease（PSP）在去除融合蛋白標簽時，對目的蛋白的純度和活性的影響通常是積極的，具體表現(xiàn)在以下幾個方面：1.**小化污染**：由于PSP具有高度的特異性，它在特定的肽鍵處切割，從而減少了非特異性切割可能導致的蛋白質(zhì)片段，這有助于保持目的蛋白的純度。2.**減少蛋白質(zhì)修飾**：PSP的特異性切割有助于避免在切割過程中對目的蛋白引入額外的修飾，如磷酸化或糖基化，這些修飾可能會影響蛋白質(zhì)的活性和穩(wěn)定性。3.**保持活性**：如果融合蛋白標簽的設計和切割位點選擇得當，PSP切割后的目的蛋白通常能夠保持其原有的生物活性。切割位點通常位于標簽和目的蛋白之間，這樣切割后不會在目的蛋白上留下額外的氨基酸，從而減少了對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的影響。4.**提高純度**：PSP切割后，可以通過親和層析等方法將標簽、PSP以及未切割的融合蛋白分離，從而獲得高純度的目的蛋白。5.**便于后續(xù)分析**：去除標簽后的目的蛋白更易于進行后續(xù)的質(zhì)譜分析、晶體學研究或其他生物化學分析，因為去除了可能干擾分析的標簽部分。6.**穩(wěn)定性**：在某些情況下，融合蛋白的標簽可能有助于穩(wěn)定目的蛋白的構(gòu)象，因此在去除標簽后，需要適當處理以維持目的蛋白的穩(wěn)定性。

不同的DNA聚合酶在PCR中的應用差異主要體現(xiàn)在以下幾個方面：1.**TaqDNAPolymerase**：是常用的DNA聚合酶之一，來源于Thermusaquaticus，具有較高的熱穩(wěn)定性及擴增效率。但它缺乏3'-5'核酸外切酶活性，即沒有校正功能，因此其保真性相對較低。Taq酶適合擴增較短的DNA片段（通常不超過3kb），且在PCR產(chǎn)物的3'端帶A堿基，可直接用于TA克隆。2.**PfuDNAPolymerase**：來源于Pyrococcusfuriosus，是一種高保真聚合酶，具有3'-5'外切酶活性，可以修復并糾正PCR反應中的腺嘌呤堿基誤配，有效防止誤差累積。Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。3.**VentDNAPolymerase**：來源于Thermuslitoralis，具有中等保真度，比Taq聚合酶高兩倍。它適用于GC含量高或復雜序列的PCR擴增，具有較高的熱穩(wěn)定性，半衰期可達6.7小時。4.**KODDNAPolymerase**：來源于Thermococcuskodakaraensis，具有高保真性和高熱穩(wěn)定性，保真性是Taq的約50倍，同時具有合成速度快的特點，聚合速度約為普通PfuDNAPolymerase的5倍，特別適合于高保真地擴增6kb以內(nèi)的PCR產(chǎn)物。UBE2L3作為泛素化途徑中的關鍵酶，其在蛋白質(zhì)降解、信號傳導、細胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。

SpCas9蛋白（來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白）在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶，能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用：1.**識別和結(jié)合**：SpCas9蛋白與一個單導向RNA（sgRNA）結(jié)合，形成RNP復合物。這個復合物能夠識別并結(jié)合到基因組中與sgRNA互補的特定DNA序列。2.**PAM序列識別**：SpCas9需要一個稱為原間隔子相鄰基序（PAM）的特定序列作為識別目標DNA的先決條件。對于SpCas9，這個PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**：一旦RNP復合物與目標DNA結(jié)合，SpCas9就會在PAM序列的3個堿基對的上游位置切割DNA雙鏈，產(chǎn)生一個雙鏈斷裂（DSB）。4.**引發(fā)DNA修復**：DNA雙鏈斷裂觸發(fā)細胞的DNA修復機制，包括同源定向修復（HDR）和非同源末端連接（NHEJ）。研究人員可以利用這些修復機制來插入、刪除或替換特定的DNA序列。5.**基因修改**：通過HDR，可以在斷裂的DNA兩端引入特定的DNA模板，從而實現(xiàn)精確的基因編輯。而NHEJ通常會導致小的插入或缺失（indel），這可以用來產(chǎn)生基因的敲除或敲入。6.**提高編輯效率**：為了提高SpCas9的編輯效率，研究人員可能會使用優(yōu)化的sgRNA設計、蛋白質(zhì)工程或嵌合融合蛋白等策略。

Ultra-Long Master Mix 是一種用于長片段PCR擴增的預混液，它含有經(jīng)過特殊修飾的熱穩(wěn)定Taq DNA聚合酶。Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag

EndoS，即糖苷內(nèi)切酶S（Endo-S），是一種具有高度特異性的酶，它在生物化學研究中有著重要應用，尤其是在糖蛋白和抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）的研究中。以下是EndoS的一些關鍵特點：1.**特異性**：EndoS能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈的殼二糖結(jié)構(gòu)，即在N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間的連接處進行切割。2.**應用**：在制備糖鏈定點ADC化合物中，EndoS被用于將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體糖基化位點，提供了一種重要的技術方法。3.**兼容性**：EndoS對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性，可以接受不同生物正交基團、熒光基團等衍生物作為底物，實現(xiàn)抗體糖基化修飾。4.**活性**：EndoS的活性對多肽沒有嚴格的要求，可以接受蛋白質(zhì)、肽、天門冬酰胺或游離聚糖作為底物。但是，對于具有三、四個支鏈的唾液酸化及去唾液酸化的聚糖，EndoS沒有活性。5.**產(chǎn)品形式**：EndoS通常以帶有His標簽的形式存在，便于從反應中去除，這在實驗操作中提供了便利。6.**研究進展**：EndoS在去糖基化方法研究中是一個重要的工具，特別是在研究糖蛋白的多肽部分和多糖部分的結(jié)構(gòu)和功能時。