BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一種來(lái)源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillussubtilis)的DNA聚合酶。這種酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性,但缺失了5'-3'核酸外切酶結(jié)構(gòu)域,因此它具有鏈置換活性,可以用于重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)等恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些關(guān)鍵特性和應(yīng)用:1.**活性定義**:在37°C條件下,30分鐘內(nèi)將10nmol的dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。2.**熱失活條件**:75°C,20分鐘。3.**酶保存液成分**:25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**儲(chǔ)存條件**:-25~-15°C保存,有效期2年。5.**注意事項(xiàng)**:-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配對(duì)的突出末端,因而不適用于生成平齊末端。-25°C時(shí)BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性,是同溫度下Klenow片段(3'-5'exo-)的兩倍。6.**應(yīng)用**:-隨機(jī)引物法標(biāo)記。-cDNA第二條鏈的合成。-單個(gè)dA的加尾。-鏈置換的DNA合成。去泛素化酶可以去除泛素化標(biāo)記,這一步驟是泛素化過(guò)程的逆轉(zhuǎn)過(guò)程,它允許細(xì)胞對(duì)泛素化事件進(jìn)行精細(xì)調(diào)控。Recombinant Cynomolgus IL-22 Protein,His Tag
磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應(yīng)用非常廣,主要包括以下幾個(gè)方面:1.**PCR產(chǎn)物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應(yīng)液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、鹽類(lèi)等雜質(zhì),回收率高,產(chǎn)物純度好,可以直接應(yīng)用于PCR、連接、測(cè)序、NGS建庫(kù)等下游實(shí)驗(yàn)。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液、唾液、口腔拭子和動(dòng)物組織等樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA,提取的DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合高通量工作站的自動(dòng)化提取。3.**質(zhì)粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質(zhì)粒DNA,通過(guò)精心優(yōu)化的溶液將質(zhì)粒DNA從基因組DNA和蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。4.**DNA片段的分離**:有許多類(lèi)型的DNA分離試劑盒可供選擇,包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測(cè)序協(xié)議進(jìn)行分離,在這種情況下,可以用能選擇分子大小的磁珠來(lái)分離片段。5.**自動(dòng)化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動(dòng)化工作站或核酸自動(dòng)提取儀,實(shí)現(xiàn)高通量操作。6.**分子生物學(xué)研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進(jìn)化研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,為遺傳病研究、篩查等提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。Peptide C105YPfu DNA Polymerase的長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力:Pfu DNA Polymerase能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA,適合復(fù)雜基因組研究。
磁珠法病毒RNA/DNA抽提試劑盒是一種高效、便捷的工具,適用于從各種生物樣本中提取病毒核酸。以下是一些相關(guān)產(chǎn)品的信息和特點(diǎn):1.**德諾優(yōu)品病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-采用自主磁珠純化技術(shù),適合從血漿、血清等樣本中分離純化病毒的DNA或RNA。-操作簡(jiǎn)單,整個(gè)過(guò)程可在12-25分鐘內(nèi)完成,提取的核酸可直接用于下游應(yīng)用,如PCR和NGS等。-提取的核酸純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合低拷貝數(shù)的病毒檢測(cè)。2.**MolPure®磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、腦脊液等樣本中提取病毒核酸。-無(wú)需使用有毒的酚氯仿,安全快捷,提取過(guò)程可在40分鐘內(nèi)完成。-提取的產(chǎn)物可直接用于PCR、qPCR等實(shí)驗(yàn)。3.**FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適合從全血、唾液、拭子等樣本中純化高質(zhì)量病毒核酸,提取過(guò)程只需13分鐘。-無(wú)需使用有毒的化學(xué)試劑,操作安全便捷。4.**MagMAX病毒RNA/DNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、口腔液等樣本中提取病毒核酸。-該試劑盒支持高通量提取,適合自動(dòng)化操作,提取效率高,適合直接用于PCR和RT-PCR。
為了確保PCR實(shí)驗(yàn)中BstDNAPolymeraseI的活性比較大化,以下是一些關(guān)鍵的優(yōu)化措施:1.**反應(yīng)緩沖液**:使用適合BstDNAPolymeraseI的反應(yīng)緩沖液,如NEB提供的IsothermalAmplificationBufferIIPack,該緩沖液包含Tris-HCl、(NH4)2SO4、KCl、MgSO4和Tween®20,pH值為8.8,專(zhuān)為等溫?cái)U(kuò)增設(shè)計(jì)。2.**反應(yīng)條件**:BstDNAPolymeraseI的比較好反應(yīng)溫度通常在65°C左右。確保PCR儀能夠精確控制并保持這一溫度,以保證酶的活性和穩(wěn)定性。3.**酶的濃度**:根據(jù)反應(yīng)體系的需要調(diào)整BstDNAPolymeraseI的用量。過(guò)多的酶可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增,而過(guò)少則可能降低擴(kuò)增效率。通常,一個(gè)單位的酶能夠在65°C下,30分鐘內(nèi)將25nmol的dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)。4.**Mg2+濃度**:Mg2+是DNA聚合酶活性的關(guān)鍵輔因子。其濃度對(duì)PCR反應(yīng)有影響,需要根據(jù)具體情況調(diào)整Mg2+濃度,以獲得比較好的擴(kuò)增效果。5.**dNTPs濃度**:dNTPs是DNA合成的基礎(chǔ)原料,其濃度約為200-300μM較為適宜。過(guò)高會(huì)增加非特異性擴(kuò)增。6.**引物設(shè)計(jì)**:設(shè)計(jì)特異性引物,通常長(zhǎng)度為18-30個(gè)堿基,Tm(熔解溫度)相近,以保證同時(shí)退火。7.**模板DNA的質(zhì)量和純度**:確保模板DNA無(wú)蛋白質(zhì)、RNA和其他雜質(zhì)的污染,這些雜質(zhì)可能會(huì)抑制酶的活性。在這個(gè)過(guò)程中,E1使用ATP的能量,在自身的活性位點(diǎn)的半胱氨酸殘基與泛素C末端的甘氨酸殘基形成硫酯鍵。
牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)是一種來(lái)源于牛痘病毒的I型真核拓?fù)洚悩?gòu)酶,具有以下功能和應(yīng)用:1.**功能**:-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I可以催化雙鏈DNA分子中單鏈DNA特定序列位置的磷酸二酯鍵的斷開(kāi)和連接。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性,能夠通過(guò)快速的酶切和連接使雙鏈共價(jià)閉合環(huán)狀的正或負(fù)超螺旋DNA發(fā)生解超螺旋,形成含有較少的正或負(fù)超螺旋的雙鏈環(huán)狀DNA分子。-能夠使雙鏈DNA形成繩結(jié)(knotting)或解開(kāi)繩結(jié)(unknotting),聯(lián)結(jié)互補(bǔ)的單鏈環(huán)狀DNA成為雙鏈環(huán)狀DNA。2.**應(yīng)用**:-作為一種DNA重組連接的新型工具酶,用于DNA載體和重組片段的連接、缺刻修復(fù)、接頭連接等。-適用于TOPO克隆載體的制備、NGS建庫(kù)中的接頭連接等。-在TOPO克隆技術(shù)中,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I同時(shí)具有限制酶和連接酶特性,其生物學(xué)功能是在復(fù)制期間切割并重新連接DNA。3.**使用方法**:-用于DNA快速酶切流程,包括配制體系反應(yīng)液、輕柔混勻、37℃孵育15分鐘等步驟。4.**儲(chǔ)存條件**:-建議在-25~-15℃保存,有效期為3年。5.**注意事項(xiàng)**:-避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作,以防止酶失活。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I因其獨(dú)特的功能,在分子生物學(xué)研究和基因工程中扮演著重要的角色。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C的環(huán)境中,這有助于保持其活性。在這種條件下,該酶可以保存長(zhǎng)達(dá)3年。Recombinant Human CD300A Protein,Avi Tag
泛素激起酶E1(Ubiquitin-activating enzyme E1)在ATP的存在下激發(fā)泛素分子,形成E1-泛素硫酯中間體。Recombinant Cynomolgus IL-22 Protein,His Tag
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關(guān)于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關(guān)鍵信息:來(lái)源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強(qiáng)的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),如LAMP和CPA等。應(yīng)用:主要應(yīng)用于等溫DNA擴(kuò)增,包括環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)和其他等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。規(guī)格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內(nèi)將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質(zhì)中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產(chǎn)品形式:提供的產(chǎn)品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號(hào)14402ES,以及凍干粉形式的產(chǎn)品,貨號(hào)14405ES,不含甘油。靈敏度和穩(wěn)定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測(cè),且在飛克(fg)級(jí)別的模板量下也能快速達(dá)到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對(duì)穩(wěn)定的效應(yīng)長(zhǎng)達(dá)5天,并且在-20℃下可以穩(wěn)定保存2年。儲(chǔ)存條件:建議在-25℃至-15℃下儲(chǔ)存,以保持產(chǎn)品活性,并避免反復(fù)凍融。Recombinant Cynomolgus IL-22 Protein,His Tag
Recombinant Human PKC iota Protein
Recombinant Mouse CD21 Protein
Recombinant Mouse G-CSF
Recombinant Human NKG2C/CD159c Protein
Recombinant Cynomolgus Siglec-3/CD33 Protein
Recombinant Human GM-CSF R alpha Protein
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
Recombinant Cynomolgus TPBG/5T4 Protein
Recombinant Mouse GPVI Protein
Recombinant Human PGLYRP1 Protein