陽光直射的地方。 細胞培養使用CellASICOONIX2微流體系統進行細胞培養1.從孔中吸出溶液以用于灌注（孔1-5）。向這些孔中添加350μL培養基。確保未使用溶液入口孔中充滿了緩沖液。2.清空6號和8號孔，以確保在更換過程中正確交換溶液灌注。3.按照以下說明將微流體板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流體系統用戶指南。4打開CellASICOONIX2軟件，選擇“新建”之一實驗選項，然后在下拉列表中找到B04A板。單擊協議編輯器選項卡，然后輸入所需的步驟，然后情況。對于1-5井，建議的壓力為6.9-13.8kPa（1-2psi）可提供足夠的營養，并且營養含量極低壓力。有關創建協議的信息，請參閱CellASICB《ONIX2微流體系統用戶指南》。5.為了監測細胞生長，將上海益啟生物的樣本制備儀詢價公司電話。浦東新區MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器咨詢問價

15分鐘。圖4.擴展孵化（過夜）：SNAP i.d.8 2.0系統與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）轉移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5％NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒，標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，對于HRP偶聯的二抗山羊抗兔（AP132P），將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后，將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化（1小時）：，SNAP i.d.o 2.0系統1小時協議與SNAP i.d.9 2.0系統標準協議與標準免松江區Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器銷售益啟生物公司帶您了解Merck儀器。

測 注意：所有抗體均使用0.5％NFDM作為封閉劑和Luminata?Forte Western HRP進行測試作為化學發光試劑的底物。 印跡阻止 ?SNAPi.d.?2.0系統與比較常用的封閉劑兼容，包括脫脂/低脂干燥牛奶，牛血清白蛋白（BSA）和酪蛋白。許多其他市售阻滯劑也兼容（請參閱表5）。?為了確保比較佳的墨量通過吸墨架，必須完全封閉封閉液溶解且不含所有顆粒物質。在某些情況下，可能有必要降低封閉劑以達到所需的流量。?不建議使用濃度高于0.5％的脫脂/低脂干奶。?封閉劑應在含有0.1％Tween?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑，以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確保抗體在孵育步驟中均勻分布，請在封閉液中稀釋抗體，包含Tween?20表面活性劑。 如何使

盤，請在步驟5之后插入托盤。有關詳細信息，請參閱“抗體恢復”部分。 6.在整個表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數量（對于MultiBlot為2.5毫升，對于迷你吸墨紙為5毫升，或10 mL用于Midi印跡）。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點固定器中，表面可能會變干。重要提示：請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在連續運行真空的情況下，添加30 mL洗滌緩沖液（MultiBlot為15毫升）。重復洗滌步驟3次以上（總共4次洗滌）。當框架完全為空時，將TURN真空關閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗（對于多印跡，為2.5 mL，5毫升用于迷你印跡，或10毫升用于Midi印跡）。在室溫下孵育10分鐘，然后上海益啟，采購電阻儀的放心之選。

密封的平板/m歧管組件放在倒置顯微鏡。6.在擴展的灌注實驗中，定期將7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系統中。在CellASICOONX2軟件的“運行”選項卡上，單擊“暫停”按鈕。按下儀器上或“工具”下拉菜單中的“密封”按鈕在下拉菜單中，單擊開封板。從板，并抽吸良好。7.將歧管重新密封到板上，然后在在“運行”選項卡上，單擊“恢復”以重新啟動每個融合協議。解決方案切換1.從選定的進水口（1-5）吸出溶液。加至350μL所需的解決方案。如果少于四個單位（A-D）使用時，用緩沖液填充未使用的進口井，以防只托水。2.根據以下說明將微流體板密封到ONIX2歧管上：CellASIC@ONIX2微流體系統用戶指南。3.打開CelIASICOONIX2軟件，在下拉列表，然后單擊ProtocolEditor選益啟生物公司帶您了解細胞分析儀詳情。松江區Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器銷售

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Westem HRP基材。高背景分鎖不足更改為不同的阻止解決方案。吸筆架不夠濕組裝前，先將吸墨紙架弄濕。阻塞解決方案可能有始終準備新鮮的0.5％脫脂/低脂干奶。降級的抗體濃度過高降低抗體的濃度。吸筆架朝上放置將印跡架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗滌不足進行至少4次每次30 mL的洗滌。添加清洗劑時，確保真空連續運行緩沖。整個系統電平不一致的信號確保系統在平坦的水平表面上。污點抗體不均勻補充封閉液和抗體稀釋劑遍及整個表面0.1％Tween 20表面活性劑。吸墨紙架使用小量移液器（例如5毫升），慢慢散布整個印跡中的抗體。應用至少2.5 mL（用于MultBlot），5 mL（用于Mini blot）或10 mL（用于Midi印跡）抗體。抗體體積低沒有抗體回收盤確保抗體中的孔，回收托盤algn浦東新區MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器咨詢問價