T7EndonucleaseI(T7EI)是一種特殊的DNA內切酶,具有以下特點:1.**識別錯配DNA**:T7EI能夠識別并切割不完全配對的DNA、十字型結構DNA、Holliday結構或交叉DNA以及異源雙鏈DNA。2.**切割位點**:T7EI切割錯配位點5'端的、第二或第三個磷酸二酯鍵。3.**靈敏度**:T7EI對錯配DNA的識別非常靈敏,能夠檢測并切割單堿基和多堿基的錯配。4.**應用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術導致的基因突變的鑒定。它通過識別錯配DNA來幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標效應。5.**直接電泳檢測**:T7EI的產物可以直接通過電泳進行檢測,這使得它在實驗操作中更為方便。6.**來源**:T7EI來源于大腸桿菌菌株,是一種麥芽糖結合蛋白(MBP)和T7核酸內切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:盡管T7EI在商業上使用時成本較高,但它在大規模樣本測試中,尤其是在基因突變鑒定方面,提供了一種有效的篩選方法。8.**特殊注意事項**:T7EI能夠識別長度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導致的錯配DNA,但不能識別1bp的插入、缺失或突變。這些特點使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術的應用中。FnCas12a系統的脫靶效應較低,這對于減少非目標效應和提高物質的安全性至關重要。Recombinant Human IL-10 R alpha Protein,His-Avi Tag
CUT&RUN和ChIC是兩種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,它們有一些關鍵的區別:1.**技術原理**:-**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:ChIC技術利用抗體將感興趣的蛋白與ProteinA-MNase相結合來進行DNA切割。ChIC的優勢在于使用TF特異性抗體系住MNase,并只在結合位點裂解。-**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:CUT&RUN技術則是在核的輕微MNase處理后釋放單核小體和TF-DNA復合物,留下寡核小體。CUT&RUN通過在冰上進行簡短的消化反應,在TF結合的MNase擴散到周邊的基因組和裂解可接近的染色質之前在上清中恢復TF-DNA復合物。2.**操作步驟和簡便性**:-**ChIC**:ChIC可能需要甲醛固定操作,這可能重新引入了ChIP-seq的一些問題,如交聯導致的DNA和蛋白質的化學修飾。-**CUT&RUN**:CUT&RUN簡化了操作步驟,使用磁珠固定細胞核,適用于新鮮和冷凍組織樣本,縮短了生成DNA測序文庫的時間(1-2天)。3.**背景信號和信噪比**:-**ChIC**:ChIC產生的背景信號可能較高,因為它可能涉及到非特異性的DNA切割。
嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)是一種熱穩定的酶,它在高溫下(55-65°C)仍然保持活性,這使得它在分子生物學實驗中非常有用,尤其是在需要高溫反應的實驗中,如熱循環擴增(PCR)。BstDNAPolymeraseI具有以下特性:1.**熱穩定性**:BstDNAPolymeraseI在高溫下具有較高的穩定性,適用于高溫反應的實驗,如PCR。2.**3'到5'外切酶活性**:這種酶具有3'到5'外切酶活性,能夠切除DNA末端上的非特異性引物和雜交DNA,使其成為等溫擴增應用的理想酶。3.**耐鹽性**:BstDNAPolymeraseI在高鹽條件下仍能保持穩定活性,這在一些特殊的PCR應用中非常有用。4.**等溫擴增**:由于其3'到5'外切酶活性,BstDNAPolymeraseI用于等溫擴增反應,如LAMP技術,這種技術能夠在恒溫下進行DNA擴增,無需繁瑣的溫度循環。5.**快速PCR**:由于其高溫穩定性,BstDNAPolymeraseI也可用于快速PCR反應,縮短了實驗時間。6.**高GC含量模板擴增**:BstDNAPolymeraseI對高GC含量模板的擴增效果較好,因此在一些難擴增的模板中表現出色。
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關鍵信息:來源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫擴增反應,如LAMP和CPA等。應用:主要應用于等溫DNA擴增,包括環介導等溫擴增(LAMP)和其他等溫擴增技術。規格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產品形式:提供的產品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號14402ES,以及凍干粉形式的產品,貨號14405ES,不含甘油。靈敏度和穩定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測,且在飛克(fg)級別的模板量下也能快速達到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對穩定的效應長達5天,并且在-20℃下可以穩定保存2年。儲存條件:建議在-25℃至-15℃下儲存,以保持產品活性,并避免反復凍融。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實時熒光定量PCR的試劑盒,它結合了反轉錄和PCR擴增步驟。
BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段)是一種經過改造的酶,它來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)DNA聚合酶I,通過重組技術在大腸桿菌中表達并純化獲得。這種酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性,但不具有5'→3'的核酸外切酶活性,因此它在等溫擴增反應中非常有用,如環介導的等溫擴增(LAMP)和滾環擴增(RCA)等。以下是BstDNAPolymerase,LargeFragment的一些關鍵特點和應用:1.**等溫擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有很強的鏈置換能力,適用于多種等溫擴增反應,這些反應通常在50-68°C之間進行,比較好反應溫度為65°C。2.**快速測序**:由于其高聚合酶活性,BstDNAPolymerase,LargeFragment可以用于快速測序,特別是對于高GC含量的DNA模板或微量(納克量級)DNA模板的測序。3.**全基因組擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment也可用于全基因組擴增(WGA),這是一種在不需要熱循環儀的情況下擴增整個基因組DNA的技術。4.**高dUTP耐受性**:與BstDNAPolymerase2.0相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment在進行等溫擴增時不具有將dUTP摻入合成的DNA鏈的能力,這使得它在某些應用中更具優勢。UBE2L3作為泛素化途徑中的關鍵酶,其在蛋白質降解、信號傳導、細胞周期控制等重要內容有著作用。Recombinant Human FGFR2 beta (IIIb) Domain Protein,Avi Tag
去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)可以去除泛素化蛋白上的泛素鏈,使泛素分子得以回收和再利用。Recombinant Human IL-10 R alpha Protein,His-Avi Tag
在PCR實驗中,除了BsuDNAPolymerase,還有幾種聚合酶適合高溫擴增,包括:1.**TaqDNAPolymerase**:這是常用的PCR聚合酶,來源于Thermusaquaticus,能夠在72°C的比較好活性溫度下工作。它具有良好的熱穩定性,可以承受PCR的熱變性步驟,且中途不需要再添加酶。2.**PfuDNAPolymerase**:來源于Pyrococcusfuriosus,具有出色的熱穩定性和3'→5'外切酶活性,提供校正功能,適用于對PCR保真性要求較高的實驗,如基因篩選、克隆表達、突變檢測、定點突變等。3.**VentDNAPolymerase**:來源于Litoralis棲熱球菌,具有3'→5'外切酶活性,可以去除錯配的堿基,具有校對功能,保真度比TaqDNAPolymerase高5~15倍。4.**KODDNAPolymerase**:來自Thermococcuskodakaraensis,具有高保真性和高熱穩定性,保真性比PfuDNAPolymerase更高,優化后的PCR反應緩沖液能使得其擴增速度達到Taq酶的2倍、Pfu酶的5-6倍。5.**BstDNAPolymerase**:來源于Bacillusstearothermophilus,具有3'到5'外切割活性,適用于等溫擴增反應,如LAMP技術,可在恒溫下進行DNA擴增,無需繁瑣的溫度循環。Recombinant Human IL-10 R alpha Protein,His-Avi Tag
Recombinant Mouse Leptin Protein
Recombinant Human ACE2/ACEH (His Tag)
Recombinant Human IL-17 Protein
Recombinant Cynomolgus NKG2D/CD314 Protein
Recombinant Human CD37 Protein
Recombinant Human TPO Protein
Recombinant Mouse LYPD3 Protein
Recombinant Human LILRB1/CD85j/ILT2 Protein
Recombinant Rat GFRAL/GFR alpha-like Protein
Recombinant Human ULBP-2 Protein