酵母重組表達的PNGaseF(N-糖苷酶F)是一種用于蛋白質去糖基化實驗的酰胺水解酶,具有以下特點以確保實驗中的活性和穩定性:1.**高效性**:具有高比活性,例如750000U/mL,這有助于快速高效地進行去糖基化反應。2.**穩定性**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,比較好的活性和穩定性可維持長達24個月。3.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**儲存條件**:建議在-15~-25℃保存,有效期1年。5.**酶活定義**:1個酶活力單位指在10μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作簡便**:提供了使用說明,包括變性和非變性條件下的蛋白質去糖基化步驟。7.**His標簽**:產品帶有His標簽,便于在實驗中進行純化和檢測。8.**純度**:純度達到95%以上,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進行確定。9.**快速反應**:有些產品如FastPNGaseF,可以在數分鐘內完成徹底且無偏好性地去糖基化。10.**注意事項**:產品供科研使用,操作時應穿戴適當的實驗室防護裝備。遵循這些指導原則和產品說明,可以確保PNGaseF在實驗中的活性和穩定性,從而獲得可靠的去糖基化結果。E1在ATP的存在下激發泛素分子,通過一個硫酯鍵將泛素的C末端甘氨酸殘基與E1酶的活性連接起來。Recombinant Human CLEC12A/MICL/CLL-1 (His Tag)
11A型肺炎多糖鼠單抗在疫苗研發中主要扮演的角色是作為特異性的識別分子,它可以識別并結合到肺炎鏈球菌11A型的多糖抗原上。這種單抗的引入,有助于提高疫苗的免疫效果,具體體現在以下幾個方面:1.**免疫應答**:通過將肺炎多糖與蛋白載體(如乙肝表面蛋白)偶聯,可以提高疫苗的免疫原性,使得接種疫苗的個體能夠產生更高水平的抗體和免疫記憶。2.**改善疫苗效力**:11A型肺炎多糖鼠單抗的制備,可以用于定量檢測33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,這對于疫苗的質量控制和效力評估至關重要。3.**促進多糖蛋白結合疫苗的開發**:利用單克隆抗體技術,可以開發出新型的肺炎多糖結合蛋白載體疫苗,這種疫苗能夠激發更好的免疫反應,尤其是提高對抵抗力低下人群(如老人、化療患者及2歲以下嬰兒)的保護效果。4.**提高疫苗的特異性和親和力**:11A型肺炎多糖鼠單抗由于其高度的特異性,可以更精確地靶向肺炎鏈球菌的11A型多糖,從而提高疫苗的預防效果。5.**疫苗質量控制**:單克隆抗體可用于疫苗生產過程中的抗原含量測定,確保疫苗的質量和效力,這對于疫苗研發和生產過程中的質量控制至關重要。SEB Domain (144-153)FnCas12a在切割DNA時產生黏性末端,有助于提高同源定向修復(HDR)的效率。
使用PreScissionProtease進行蛋白質切割時,為保證高純度和高活性,需要考慮以下關鍵因素:1.**特異性切割位點**:確保融合蛋白中包含PreScissionProtease特異性識別的序列,以實現精確切割。2.**酶與底物的比例**:適當比例的酶量對于高效切割至關重要,過多或過少的酶都可能影響切割效率和純度。3.**反應條件**:包括溫度、pH和反應時間等,這些條件需要優化以確保酶的活性和選擇性。通常,PreScissionProtease在4°C下進行酶切。4.**緩沖液兼容性**:使用與PreScissionProtease兼容的緩沖液,避免使用可能抑制酶活性的離子或化學物質。5.**蛋白濃度**:確保融合蛋白有足夠的濃度,以提高切割效率和減少樣品損失。6.**酶切后的分離**:切割后,需要有效分離目的蛋白和切割下來的標簽,通常利用親和層析等方法。7.**避免蛋白降解**:在實驗過程中添加蛋白酶抑制劑,以防止蛋白降解酶對目的蛋白的降解。8.**避免蛋白質聚集**:在切割過程中,應避免條件導致蛋白質聚集或沉淀,這可能會影響純度和活性。9.**避免氧化**:在蛋白質處理過程中,添加抗氧化劑如DTT或TCEP,以防止半胱氨酸殘基的氧化。10.**清潔的實驗環境**:確保實驗器材和環境的清潔,避免微生物污染和核酸污染。
NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白,它在N端和C端都添加了核定位信號(NLS),這使得它能夠更有效地進入細胞核并進行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統的引導RNA(gRNA)形成穩定的核糖核的蛋白(RNP)復合物,可以在進入細胞后立即定位到細胞核,從而誘導特定的DNA雙鏈斷裂,實現基因編輯。與傳統的mRNA或質粒系統相比,使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉錄和翻譯過程,因此可以避免將外源DNA插入基因組的風險,這對于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點包括:1.無DNA:系統不添加外部DNA,降低了插入外源DNA的風險。2.高切割效率:雙NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核。3.低脫靶效應:Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性。4.節省時間:無需轉錄和翻譯過程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA,以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結合時的體內基因編輯。產品的保存條件通常是在-25~-15℃,有效期為一年。使用時,可以根據推薦的反應體系進行體外DNA裂解實驗,并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測消化效率。具體產品的詳細信息和應用指南,可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。Cpf1是一種新發現的類2/型V CRISPR-Cas DNA內切酶,在不同系統中顯示出一系列的活性。
EndoS糖苷內切酶在抗體藥物偶聯物(ADCs)的制備中發揮著至關重要的作用。EndoS是一種特異性的內切糖苷酶,它能夠從IgG重鏈的N-糖基中切割N-連接的糖鏈。這種特異性使得EndoS在改造抗體的糖鏈結構時非常有用,尤其是在開發定點ADCs時。在ADCs的制備過程中,EndoS的作用主要體現在以下幾個方面:1.**糖鏈切割**:EndoS能夠特異性地水解抗體Fc片段上的N-糖鏈,為后續的糖鏈改造和藥物偶聯提供條件。2.**糖鏈改造**:EndoS可以用于去除抗體上的原有糖鏈,然后通過酶的催化作用,將特定的糖鏈結構重新連接到抗體上,實現糖鏈的定點修飾。3.**定點偶聯**:通過EndoS的催化作用,可以將小分子細胞毒藥物通過特定的糖鏈結構“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,簡化了ADCs的制備流程。4.**提高ADCs的均一性和穩定性**:EndoS介導的定點偶聯技術有助于獲得結構均一性更好、穩定性更高的ADCs,這對于提高藥物療效和減少副作用至關重要。5.**增強療效**:利用EndoS進行的定點偶聯可以提高ADCs的體內瘤抑制活性,即使在低載藥量的情況下也能保持高效的抗瘤效果。
E2酶接收來自E1的激起泛素,并在E3酶的協助下將泛素分子轉移到靶蛋白上。Recombinant Human CLEC12A/MICL/CLL-1 (His Tag)
重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白,Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分離出來的39個氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并與相同的膜受體相互作用。重組Exendin-4在體內增強依賴葡萄糖的胰島素分泌,抑制不適當的高胰高的血糖素分泌,并減慢胃排空。它還在體外和動物模型中促進β細胞增殖和新生。重組Exendin-4是通過大腸桿菌表達的合成DNA序列編碼的39個氨基酸的Exendin-4。重組Exendin-4的特點包括:-分子量約為4.2kDa,是一個非糖基化的單一多肽鏈,包含39個氨基酸。-具有調節血糖水平、減少胰島素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血紅蛋白(HbA1c)和刺激β細胞生長以促進胰島素產生等多種生物活性。-通常以凍干粉的形式提供,需要在無菌條件下用無菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水溶液復溶。-純度高于96%,通過SDS-PAGE和HPLC分析確定。-內毒的素含量低于10EU/mg,通過LAL方法測定。在實驗中,可以通過以下方法來優化重組Exendin-4的熒光特性:1.選擇合適的激發和發射波長。2.優化激發和發射濾光片。3.評估熒光量子產率。4.調整緩沖液條件,包括pH值和離子強度。5.控制溫度和氧濃度。Recombinant Human CLEC12A/MICL/CLL-1 (His Tag)