EndoS糖苷內切酶S在抗體藥物偶聯物(ADCs)研究中的應用主要體現在糖鏈定點偶聯技術上。通過上海藥物所的研究,開發了一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略,利用EndoS2這種糖苷內切酶,可以將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,實現了糖鏈定點ADC化合物的制備。定點偶聯技術相比傳統的隨機偶聯具有更好的方法指數,能夠提高ADC的均一性和穩定性,是當前ADC領域的研究熱點之一。在抗體的Fc結構域N297位,這是一個保守的糖基化位點,通過在該位點引入細胞物質,可以形成具有優勢的糖鏈定點ADC化合物(glycosite-specificADCs,gsADCs)。此外,EndoS2對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,能夠高效獲得功能修飾的糖工程抗體,并且可以用于抗體的內吞成像研究及糖鏈延伸等功能化研究。研究人員通過這種“一步”制備策略得到的糖鏈定點ADC化合物,在結構均一性、親水性、體外穩定性以及體外活性方面表現良好,并且在體內瘤抑制活性方面,相比陽性對照ADC化合物,在低載藥量的情況下具有更強的抑制效果。EndoS酶的這些應用,不僅展示了其在簡化ADC制備流程中的潛力,還有助于推動定點ADC藥物的深入發展,為未來的生物藥物開發提供了新的思路和方法。E1通常被認為是泛素化過程中的限速步驟,因為它涉及到泛素的激起和ATP的水解。Recombinant Human XPNPEP2 Protein,His Tag
EndoS糖苷內切酶在抗體藥物偶聯物(ADCs)的制備中發揮著至關重要的作用。EndoS是一種特異性的內切糖苷酶,它能夠從IgG重鏈的N-糖基中切割N-連接的糖鏈。這種特異性使得EndoS在改造抗體的糖鏈結構時非常有用,尤其是在開發定點ADCs時。在ADCs的制備過程中,EndoS的作用主要體現在以下幾個方面:1.**糖鏈切割**:EndoS能夠特異性地水解抗體Fc片段上的N-糖鏈,為后續的糖鏈改造和藥物偶聯提供條件。2.**糖鏈改造**:EndoS可以用于去除抗體上的原有糖鏈,然后通過酶的催化作用,將特定的糖鏈結構重新連接到抗體上,實現糖鏈的定點修飾。3.**定點偶聯**:通過EndoS的催化作用,可以將小分子細胞毒藥物通過特定的糖鏈結構“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,簡化了ADCs的制備流程。4.**提高ADCs的均一性和穩定性**:EndoS介導的定點偶聯技術有助于獲得結構均一性更好、穩定性更高的ADCs,這對于提高藥物療效和減少副作用至關重要。5.**增強療效**:利用EndoS進行的定點偶聯可以提高ADCs的體內瘤抑制活性,即使在低載藥量的情況下也能保持高效的抗瘤效果。
重組人血清白蛋白(rHSA),特別是通過植物表達系統生產的細胞培養級產品,以其高純度和質量一致性而受到科研和工業界的重視。以下是高純度rHSA的一些關鍵特點和意義:1.**純度標準**:高純度的rHSA通常意味著蛋白質含量達到99%以上,這通常通過高效液相色譜(HPLC)、SDS-PAGE電泳等方法進行驗證。2.**內素水平**:內素水平是衡量蛋白質純度的一個重要指標。高純度rHSA的內素水平通常非常低(例如,≤0.5EU/ml),這有助于減少細胞培養中潛在的內素污染。3.**宿主細胞蛋白(HCP)殘留**:高純度rHSA的宿主細胞蛋白殘留量非常低,這有助于減少細胞培養中外來蛋白的干擾。4.**無動物源成分**:由于rHSA是通過植物表達系統生產的,因此不含有動物源性成分,這降低了動物源性疾病傳播的風險。5.**批次一致性**:高純度rHSA的生產過程通常在嚴格控制的條件下進行,確保不同批次之間的質量一致性,這對于科學研究和商業生產至關重要。6.**應用廣**:高純度rHSA在細胞培養、生物制藥、藥物載體、疫苗開發等領域有著廣的應用。7.**安全性**:高純度rHSA的生產過程不涉及動物源材料,因此可以降低血源性疾病的風險,提高產品的安全性。
重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白(SpCas9)是一種用于基因組編輯的核酸酶。它是CRISPR-Cas系統的一部分,該系統是一種細菌和古菌的適應性免疫防御機制,能夠識別并切割入侵的外源核酸。Cas9蛋白在CRISPR系統中起到關鍵作用,它能夠識別特定的原間隔子相鄰基序(PAM),在引導RNA(gRNA)的引導下與目標DNA結合并進行切割。SpCas9蛋白由1053個氨基酸組成,相對較小的體積使其便于在體內遞送,因此它在多種生物中都能進行有效的基因組編輯。為了提高SpCas9的表達量和溶解度,研究人員采用了多種策略,例如使用GB1促溶標簽和多重啟動子策略,這些策略可以顯著提高蛋白的產量和活性,同時保持其功能活性不受影響。在基因編輯過程中,SpCas9與gRNA形成穩定的核糖核的蛋白(RNP)復合物,通過gRNA與基因組DNA的序列匹配來識別目標位點,并在距離NGGPAM序列3個堿基以內的位置切割DNA。為了增強SpCas9的基因組編輯效率,研究人員還開發了嵌合融合蛋白,例如與5’至3’核酸外切酶重組J(RecJ)或GFP融合的SpyCas9蛋白,這些嵌合蛋白可以顯著提高靶向基因編輯效率,同時保持較低的脫靶效應。
重組人血清白蛋白(rHSA)是一種重要的蛋白質,廣泛應用于生物醫學領域。植物表達的細胞培養級重組人血清白蛋白(rHSA)具有多項特點和科研應用價值:1.**高純度和安全性**:植物源重組人血清白蛋白(rHSA)通過基因工程技術在植物如水稻中表達,避免了動物源成分和血源性的病毒污染的風險,提供了一種更安全、更純凈的蛋白質來源。2.**批次穩定性**:與來源于動物的血清白蛋白相比,植物表達的rHSA提供了更高的批次間一致性和穩定性,這對于科研和工業應用中的重復性和可靠性至關重要。3.**多功能性**:rHSA在細胞培養中可以作為重要的添加成分,有助于細胞生長和維持培養環境的穩定性。它還可以作為藥物載體,疫苗保護劑、細胞凍存保護劑和醫療器械包埋劑等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化學性質與天然HSA非常接近,它在生物醫藥生產中具有很高的生物相容性,可以用于多種藥物的配方和醫療設備。5.**科研應用**:rHSA在科研中可用于細胞培養、藥物載體研究、疫苗開發、組織工程和再生醫學等領域。6.**生產規模**:植物表達系統具有大規模生產重組蛋白的潛力,這對于滿足全球對rHSA日益增長的需求至關重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG) 是一種在DNA修復過程中起作用的酶,其主要功能是識別并去除DNA中的尿嘧啶堿基。Recombinant Mouse APRIL/TNFSF13 Protein,His-Flag Tag
His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。Recombinant Human XPNPEP2 Protein,His Tag
PreScissionProtease(PSP)是一種在蛋白質純化和分析中使用的酶,具有以下特點:1.**特異性識別**:PSP能在低溫(4°C)下特異性識別八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly之間進行酶切。2.**應用**:PSP常用于去除融合蛋白中的GlutathioneS-transferase(GST)、His等標簽,有助于純化目的蛋白。3.**純度高**:PSP的純度達到95%以上,確保了實驗的準確性和重復性。4.**穩定性好**:PSP在含有50%甘油的儲存緩沖液中,-80℃長期儲存,有效期2年;小量分裝-20℃保存,有效期6個月。5.**酶活定義**:在5℃條件下反應16小時,能夠切割100μg的GST標簽蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。6.**兼容性強**:PSP的酶切體系中可以兼容1%TritonX-100、Tween-20或NP-40,10mMEDTA和500mMNaCl。7.**注意事項**:某些化合物如100mMZnCl2、4mMAEBSF和100μMChymostatin會抑制PSP的酶活性50%以上。8.**優化酶切效率**:建議進行預實驗摸索實驗濃度,實際操作中,建議酶用量1:25-1:100U/μg融合蛋白。Recombinant Human XPNPEP2 Protein,His Tag
PAR-1 agonist peptide
Recombinant Mouse MXRA8 Protein
Recombinant Human PKC iota Protein
Recombinant Mouse CD21 Protein
Recombinant Mouse G-CSF
Recombinant Human NKG2C/CD159c Protein
Recombinant Cynomolgus Siglec-3/CD33 Protein
Recombinant Human GM-CSF R alpha Protein
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
Recombinant Cynomolgus TPBG/5T4 Protein