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Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024年08月17日

Blood Direct PCR Master Mix (2×)的組分通常包括以下幾類(lèi):高保真DNA聚合酶:例如,NEB的Q5 Blood Direct 2X Master Mix中包含的Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase,這是一種熱穩(wěn)定性DNA聚合酶,具有3'→5'核酸外切酶活性,并與Sso7d結(jié)構(gòu)域融合以增強(qiáng)過(guò)程性3940。dNTPs:提供DNA合成所需的四種脫氧核苷三磷酸。優(yōu)化的緩沖體系:包含適合于血液樣本PCR擴(kuò)增的pH和離子強(qiáng)度,以及能夠抵抗血液樣本中抑制劑的特殊成分。穩(wěn)定劑:保證預(yù)混合溶液在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中的穩(wěn)定性。抗抑制劑成分:一些Blood Direct PCR Master Mix含有能夠抵抗血液樣本中可能存在的PCR抑制劑的成分。可選的染料:某些產(chǎn)品可能含有用于電泳的染料,允許PCR產(chǎn)物直接上樣進(jìn)行電泳分析,無(wú)需額外的上樣緩沖液。其他可選組分:根據(jù)需要,可能包括MgCl2、EDTA、DMSO等,用于優(yōu)化特定樣本或反應(yīng)條件42。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I是一種來(lái)源于牛痘病毒的酶,有多種作用于DNA分子的能力。Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein,His Tag

Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

磁珠本身并不直接參與電泳過(guò)程,但它們可以用于電泳后的樣品處理,特別是在核酸(DNA或RNA)的提取和純化過(guò)程中。以下是使用磁珠進(jìn)行電泳后樣品處理的一般步驟:1.**凝膠電泳**:-首先,將DNA或RNA樣品通過(guò)凝膠電泳進(jìn)行分離。凝膠通常是瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠,根據(jù)樣品的大小和類(lèi)型選擇合適的凝膠濃度和緩沖體系。2.**觀察和切割**:-電泳完成后,使用紫外線照射凝膠并使用適當(dāng)?shù)娜玖希ㄈ鏓B或SYBRGreen)對(duì)DNA或RNA進(jìn)行染色,以在紫外光下觀察到DNA或RNA的條帶。3.**樣品提取**:-確定目標(biāo)DNA或RNA條帶后,使用干凈的工具(如切割器或移液槍?zhuān)哪z中切割出含有目標(biāo)分子的凝膠片段。4.**磁珠準(zhǔn)備**:-根據(jù)磁珠試劑盒的說(shuō)明書(shū),準(zhǔn)備磁珠。通常包括磁珠的重懸和可能的表面修飾,以確保它們能夠特異性地結(jié)合目標(biāo)核酸。5.**樣品與磁珠混合**:-將切割出的凝膠片段轉(zhuǎn)移到含有磁珠的溶液中,溫和地混合以促進(jìn)磁珠與核酸的結(jié)合。6.**磁分離**:-將含有磁珠和核酸的混合物置于磁分離架上,利用磁場(chǎng)使磁珠快速聚集在管底,從而實(shí)現(xiàn)與溶液的分離。7.**洗滌**:-移除未結(jié)合的溶液,向磁珠上加入洗滌液,再次進(jìn)行磁分離以去除雜質(zhì)。Recombinant Human Her4/ErbB4 Protein,His-Avi TagHis-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預(yù)測(cè)為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結(jié)果上遷移至55-60 kDa。

Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RecombinasePolymeraseAmplification,簡(jiǎn)稱(chēng)RPA)是一種核酸擴(kuò)增技術(shù),能夠在等溫條件下快速檢測(cè)特定DNA序列。這項(xiàng)技術(shù)以其快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、對(duì)設(shè)備要求低等優(yōu)點(diǎn),在臨床快速診斷、食品檢測(cè)、防控、工業(yè)應(yīng)用、現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用潛力。**技術(shù)原理**:RPA技術(shù)主要依賴(lài)于幾種關(guān)鍵的酶和蛋白質(zhì):-**重組酶**:能夠識(shí)別并結(jié)合到單鏈核酸(寡核苷酸引物)上。-**單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)**:與被置換的單鏈DNA結(jié)合,防止其重新結(jié)合形成雙鏈。-**鏈置換DNA聚合酶**:在引物定位同源序列后,進(jìn)行鏈延伸,實(shí)現(xiàn)DNA的指數(shù)增長(zhǎng)。RPA的工作原理是,重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非常快,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。**技術(shù)優(yōu)勢(shì)**:-**快速性**:RPA可以在37-42°C的等溫條件下快速完成核酸的擴(kuò)增,通常在10到30分鐘內(nèi)即可完成。-**靈敏度和特異性**:RPA能夠檢測(cè)低至單拷貝的核酸模板,并具有高特異性。

dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的"特異性"一詞在不同的上下文中可能有不同的含義。在分子生物學(xué)領(lǐng)域,特異性通常指的是分子識(shí)別和相互作用的精確性。對(duì)于dNTPMix,特異性可以指以下幾個(gè)方面:1.**堿基特異性**:dNTPMix包含四種dNTPs(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),每種對(duì)應(yīng)DNA中的一個(gè)特定堿基。在DNA合成過(guò)程中,DNA聚合酶確保只有正確的互補(bǔ)dNTP與模板鏈上的堿基配對(duì),這體現(xiàn)了堿基配對(duì)的特異性。2.**酶特異性**:某些DNA聚合酶具有校正(proofreading)功能,它們可以識(shí)別并修正配對(duì)錯(cuò)誤,提高DNA合成的特異性。3.**應(yīng)用特異性**:dNTPMix可以為特定的DNA合成應(yīng)用提供所需的所有四種核苷酸,例如PCR、cDNA合成、DNA測(cè)序等。不同的應(yīng)用可能需要特定的dNTP濃度或配方。4.**質(zhì)量控制特異性**:dNTPMix在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保沒(méi)有雜質(zhì)、DNase和RNase污染,保證產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)中的特異性表現(xiàn)。5.**穩(wěn)定性和純度特異性**:dNTPMix的穩(wěn)定性和純度(通常≥99%)對(duì)于實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要,高純度的dNTPMix可以減少非特異性反應(yīng)的發(fā)生。6.**反應(yīng)條件特異性**:使用dNTPMix時(shí),需要考慮反應(yīng)條件的特異性,如Mg2+濃度、pH值、溫度等,這些條件都會(huì)影響DNA合成的特異性。在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase可以用于精確地引入特定位點(diǎn)的突變,或在基因組中插入特定的DNA序列。

Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

    Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease)高度特異性地作用于5'端磷酸化的雙鏈DNA主要通過(guò)以下幾個(gè)方面實(shí)現(xiàn):1.**結(jié)構(gòu)特異性識(shí)別**:Lambda核酸外切酶具有識(shí)別特定DNA結(jié)構(gòu)的能力,特別是5'端磷酸化的雙鏈DNA。這種識(shí)別能力通常由酶的活性位點(diǎn)結(jié)構(gòu)決定,能夠與5'-磷酸基團(tuán)形成特定的相互作用。2.**酶活性位點(diǎn)**:酶的活性位點(diǎn)含有氨基酸殘基,這些殘基能夠與5'-磷酸基團(tuán)形成氫鍵或其他非共價(jià)相互作用,從而穩(wěn)定酶與DNA的結(jié)合。3.**切割機(jī)制**:Lambda核酸外切酶通過(guò)水解5'-磷酸二酯鍵來(lái)降解DNA鏈。它從5'端開(kāi)始,逐個(gè)移除核苷酸,直到遇到非5'-磷酸化的末端或遇到結(jié)構(gòu)上的障礙。4.**低活性對(duì)非特異性底物**:對(duì)于5'-羥基(OH)末端的DNA或單鏈DNA,Lambda核酸外切酶的活性降低,因?yàn)檫@些底物缺乏與酶活性位點(diǎn)結(jié)合所需的特異性相互作用。5.**酶動(dòng)力學(xué)**:Lambda核酸外切酶對(duì)5'-磷酸化雙鏈DNA的酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)(如Km和Vmax)與對(duì)非特異性底物的參數(shù)有差異,這反映了其對(duì)特異性底物的高親和力和高催化效率。6.**過(guò)程性(Processivity)**:一旦Lambda核酸外切酶結(jié)合到特異性底物上,它可以連續(xù)移除多個(gè)核苷酸,而不需要頻繁地與底物解離和重新結(jié)合,這增加了酶的效率。SpCas9-NLS的應(yīng)用范圍廣泛,可用于細(xì)胞內(nèi)的CRISPR/Cas9系統(tǒng)介導(dǎo)的基因編輯。Recombinant Human DKK-1,His

FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標(biāo)都能激發(fā)其反式剪切活性,即在形成三元復(fù)合物后,針對(duì)非特異序列ssDNA的剪切。Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein,His Tag

dCTPSolution(脫氧胞苷三磷酸溶液)是一種分子生物學(xué)試劑,它是進(jìn)行DNA合成反應(yīng)的關(guān)鍵成分之一。dCTP與dATP、dGTP和dTTP一起,構(gòu)成DNA聚合過(guò)程中所需的四種脫氧核苷三磷酸(dNTPs)。每種dNTP對(duì)應(yīng)DNA中的一個(gè)堿基:腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鳥(niǎo)嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。dCTP的化學(xué)名稱(chēng)是2'-脫氧胞苷-5'-三磷酸,它在DNA合成中起到以下作用:-**DNA合成**:在聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和其他DNA合成過(guò)程中,dCTP作為底物,由DNA聚合酶催化,與DNA模板鏈上的鳥(niǎo)嘌呤(G)配對(duì),形成新的DNA鏈。-**DNA測(cè)序**:在某些DNA測(cè)序方法中,dCTP可能用于標(biāo)記或合成測(cè)序產(chǎn)物。-**分子克隆和其他技術(shù)**:dCTP在分子克隆、基因表達(dá)分析和其他涉及DNA合成的實(shí)驗(yàn)中也有應(yīng)用。dCTPSolution通常以高濃度(如100mM)的溶液形式提供,以便于在實(shí)驗(yàn)中使用時(shí)進(jìn)行稀釋。這種溶液需要在低溫(通常是-20°C)條件下儲(chǔ)存,以保持其穩(wěn)定性和避免分解。在購(gòu)買(mǎi)和使用dCTPSolution時(shí),用戶(hù)應(yīng)確保產(chǎn)品具有高純度、無(wú)PCR抑制劑、無(wú)核酸酶污染等特性,以保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。此外,dCTPSolution應(yīng)用于研究用途,不應(yīng)用于臨床診斷過(guò)程。Recombinant Human EMAP-II/AIMP1 Protein,His Tag

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