dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的穩定性是進行PCR和其他DNA合成實驗時的重要因素。以下是一些關于dNTPMix穩定性的關鍵點:1.**儲存條件**:dNTPMix應儲存在-20°C的條件下,以保持其穩定性和活性。2.**避免反復凍融**:dNTPMix應避免多次凍融,因為這可能會影響其穩定性。3.**使用頻率**:如果使用頻率較高,使用后應以-20°C儲存。4.**長期儲存**:對于長期儲存或使用頻率較低的情況,建議將dNTPMix儲存在-70°C以保持好的狀態。5.**質量控制**:dNTPMix應不含DNase和RNase,以避免DNA或RNA的降解。6.**純度**:dNTPMix的純度通常≥99%(HPLC檢測),確保了其在實驗中的可靠性。7.**pH調節**:dNTPMix通常用超純水配制,并通過高純度NaOH溶液調節pH值至約7.0,以保持其穩定性。8.**有效期**:在適當的儲存條件下,dNTPMix的有效期通常為2年或更長時間。9.**使用注意事項**:使用dNTPMix時,應穿戴適當的實驗室防護裝備,如實驗服和一次性手套,以確保操作安全。通過測序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和測序)來驗證gRNA的編輯效率,篩選出效率高的gRNA序列 。Recombinant Human BCAM Protein,His Tag
在5'DNA腺苷酰化試劑盒中,"5'"表示DNA分子的5'端,即DNA鏈的起始端。DNA和RNA分子由核苷酸單元組成,每個核苷酸由一個糖分子、一個磷酸基團和一個含氮堿基組成。在DNA中,糖分子是脫氧核糖。這些核苷酸通過磷酸二酯鍵連接在一起形成多核苷酸鏈。DNA鏈有兩個端點,分別是5'端和3'端,這兩個端點是根據糖分子上碳原子的編號來命名的:-**5'端**(5'-phosphategroup):這個端點的磷酸基團連接在脫氧核糖的第五個碳原子上。-**3'端**(3'-hydroxylgroup):這個端點的脫氧核糖上第三碳原子上有一個自由的羥基(-OH)。5'DNA腺苷酰化試劑盒的目的是將腺苷酸(AMP)加到DNA分子的5'端,形成5'-磷酸腺苷鍵。這種修飾對于某些分子生物學應用非常重要,例如在RNA干擾(RNAi)、高通量測序、連接反應或PCR檢測中制備特定的接頭或適配體。在5'DNA腺苷酰化試劑盒中,通常包含一種酶(如腺苷酸化酶或某些RNA連接酶),它可以催化將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端磷酸基團上,從而完成腺苷酰化過程。RNA純化磁珠由于Pfu DNA Polymerase 對引物的質量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯誤導致的非目標突變。
Benzonase核酸酶是一種來自粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)的非特異性核酸內切酶,它能夠高效降解所有形式的DNA和RNA,包括單鏈、雙鏈、線性和環狀核酸,將其消化成2至5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸。這種酶在生物技術領域有著廣泛的應用,包括:1.**降低粘度**:在蛋白樣品制備過程中,Benzonase核酸酶可以降低由于核酸引起的高粘度,從而便于樣品處理和提高蛋白產量。2.**去除核酸污染**:在蛋白提取、疫苗生產、生物制藥等領域,Benzonase核酸酶用于去除樣品中的核酸污染,確保產品質量。3.**提高蛋白質分離效果**:在雙向SDS-PAGE蛋白樣品制備中,Benzonase核酸酶可以去除帶負電荷的核酸,改善蛋白質的分離效果,增強2-DE分辨率。4.**促進蛋白質復性**:在高質量包涵體制備中,Benzonase核酸酶有助于降解核酸,從而促進不可溶性蛋白的復性。5.**穩定性和兼容性**:Benzonase核酸酶在多種條件下穩定,包括高濃度的尿素,且與蛋白酶抑制劑兼容,但需注意EDTA對其活性的抑制作用。此外,Benzonase核酸酶的活性單位定義為在30分鐘內使△A260值降低1.0的酶量,相當于完全消化37μgDNA。
DNaseI是一種使用的酶,它能夠水解單鏈或雙鏈DNA,產生5'端為磷酸基團的二核苷酸、三核苷酸或更短的寡核苷酸片段。這種酶的活性依賴于鈣離子,并且可以被鎂離子或二價錳離子啟動。在鎂離子存在的情況下,DNaseI可以隨機剪切雙鏈DNA的任意位點;而在二價錳離子存在時,它可以在同一位點剪切DNA雙鏈,形成平末端或1-2個核苷酸突出的粘末端。DNaseI的一個特點是它不含RNase活性,因此可以用于處理各種RNA樣品,而不會對RNA造成降解。DNaseI的應用非常廣,包括但不限于:-制備不含DNA的RNA樣品;-在RT-PCR反應前去除RNA樣品中可能的DNA污染;-體外RNA聚合酶催化的RNA轉錄后去除DNA模板;-進行DNaseI足跡實驗研究DNA-蛋白質相互作用;-缺口平移(nicktranslation);-產生DNA隨機片段文庫;-在細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。DNaseI通常從牛胰腺中純化得到,其分子量約為32kDa(單體)。活性定義為在37℃、10分鐘內,能夠完全降解1μgpBR322質粒DNA所需的酶量。在實驗中,DNaseI的活性單位通常以Kunitz單位來表示,該單位是基于特定條件下酶降解DNA的能力來定義的。在一項研究中,比較了具有不同NLS融合的Cas9蛋白和Cas9 mRNA在斑馬魚基因組編輯中的效率。
dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學試劑,通常以100mM的濃度提供。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,如聚合酶鏈反應(PCR)、DNA測序、填入反應、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反應等。dATP的化學結構是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA復制過程中用來合成DNA鏈的原料之一。在Sanger測序中,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一種衍生物,缺少3'-OH基團,用于鏈終止反應。dATP溶液應儲存在-20°C的條件下以保持其穩定性和活性,有效期通常為兩年。在生產過程中,dATP通常按照ISO9001標準進行,并在D級清潔室中進行以確保高質量和純度。HPLC確認的純度通常大于99%。dATP溶液不含qPCR、PCR、逆轉錄抑制劑,也不含DNase、RNase以及人類和大腸桿菌DNA,以避免實驗過程中的污染。His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。Recombinant Human Aggrecan Protein,His Tag
將MAGE-A3基因序列克隆到一個表達載體中,該載體通常包含有抗生物質抗性基因、啟動子、核糖體結合位點。Recombinant Human BCAM Protein,His Tag
dGTPSolution(脫氧鳥苷三磷酸溶液)在分子克隆中扮演著重要角色,主要應用包括但不限于以下幾個方面:1.**DNA合成**:dGTP作為DNA聚合酶的底物之一,在分子克隆中用于合成新的DNA鏈,特別是在PCR擴增和cDNA合成中。2.**PCR擴增**:在常規PCR和高保真PCR中,dGTP提供必要的核苷酸,以確保目標DNA片段的準確復制。3.**cDNA合成**:在從mRNA模板合成cDNA的過程中,dGTP是合成互補DNA鏈的關鍵成分。4.**DNA測序**:dGTP也用于Sanger測序等DNA測序技術中,幫助合成測序反應中的DNA鏈。5.**質粒構建**:在質粒或其他載體的構建過程中,dGTP可能用于填補缺口或連接DNA片段。6.**引物延伸**:在引物延伸反應中,dGTP用于延伸引物,以合成完整的DNA鏈。7.**DNA標記**:dGTP可以用于DNA片段的標記,便于后續的克隆和檢測。dGTPSolution通常以100mM的濃度提供,以便于在實驗中根據需要進行稀釋。在使用時,應確保產品具有高純度、無DNase和RNase污染,以保證實驗的準確性和重復性。此外,dGTPSolution應儲存在-20°C的條件下,避免反復凍融,以保持其穩定性。Recombinant Human BCAM Protein,His Tag
Recombinant Mouse Leptin Protein
Recombinant Human ACE2/ACEH (His Tag)
Recombinant Human IL-17 Protein
Recombinant Cynomolgus NKG2D/CD314 Protein
Recombinant Human CD37 Protein
Recombinant Human TPO Protein
Recombinant Mouse LYPD3 Protein
Recombinant Human LILRB1/CD85j/ILT2 Protein
Recombinant Rat GFRAL/GFR alpha-like Protein
Recombinant Human ULBP-2 Protein