pA-Tn5轉座酶的產品組分通常包括以下幾個部分:1.**pA-Tn5轉座酶蛋白**:一種高活性的Tn5轉座酶突變體與ProteinA的融合蛋白,它是產品的主要組分,用于實現DNA片段化和接頭連接的功能。2.**儲存溶液**:碧云天的BeyoNGS?pA-Tn5轉座酶產品含有特定的儲存溶液,其組成為50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,這種溶液有助于保持酶的穩定性和活性。3.**測序接頭(Adapters)**:用于與pA-Tn5轉座酶組裝形成pA-Tn5轉座體(pA-Tn5Transposome),這是進行CUT&Tag實驗的必需組分。4.**反應緩沖液**:部分產品包含用于轉座酶反應的緩沖液,例如5×TagmentBuffer,這種緩沖液含有Mg2+,對轉座酶的活性至關重要。5.**附件**:某些產品可能還包括附件,如說明書,提供產品使用和保存的詳細信息。6.**其他組分**:根據產品的不同,可能還包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他輔助組分,這些組分有助于轉座酶與DNA的結合和反應的進行。7.**包裝規格**:pA-Tn5轉座酶的包裝規格可能有所不同,例如碧云天提供的BeyoNGS?pA-Tn5轉座酶有800pmol和4000pmol兩種包裝規格。可以利用現有的計算工具,如CRISPR design tools,預測gRNA的活性和特異性,以輔助實驗設計 。Recombinant Cynomolgus AFP Protein,His Tag
pA-Tn5轉座酶的高活性是其重要特性之一,這種高活性主要來源于以下幾個方面:1.**轉座酶突變體**:pA-Tn5轉座酶是由Tn5轉座酶的高活性突變體構成的。這種突變體相比野生型Tn5轉座酶,在體外的轉座效率顯著提高,通常提升1000倍以上。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉座酶將ProteinA與高活性Tn5轉座酶融合,這種融合不僅保留了Tn5轉座酶的高效DNA切割能力,還通過ProteinA的抗體結合特性,提高了對特定DNA序列的靶向能力。3.**轉座隨機性**:pA-Tn5轉座酶能夠在整個基因組上實現隨機的DNA切割,這為高通量測序提供了廣的覆蓋度。4.**穩定性**:高活性的pA-Tn5轉座酶在各種實驗條件下都能保持穩定,包括在不同的溫度和pH值條件下。5.**插入位點易測序**:pA-Tn5轉座酶產生的DNA片段具有明確的插入位點,這些位點容易被高通量測序技術識別和分析。6.**高效片段化**:在CUT&Tag等實驗中,pA-Tn5轉座酶能夠高效地實現目標蛋白結合DNA的片段化,為后續的測序和分析打下基礎。7.**低細胞投入量**:由于其高活性,pA-Tn5轉座酶允許從極少量的細胞中進行實驗,如單細胞水平的研究。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一種用于合成互補DNA(cDNA)的試劑盒,它通過逆轉錄過程從信使RNA(mRNA)或總RNA模板合成cDNA的鏈。這類試劑盒通常包含逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的組分,以確保高效和準確的cDNA合成。RNaseH-表示該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性,這意味著在合成cDNA鏈的過程中不會發生RNA的降解,從而可以產生更高產量的全長cDNA,特別是從較長的模板(可達13kb)。該試劑盒通常包括以下組分:-逆轉錄酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTranscriptase,它通過點突變完全消除了RNaseH活性。-RiboLockRNaseInhibitor,這是一種重組蛋白,可有效保護RNA在高達55°C的溫度下不受RNases的降解。-緩沖液、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)和其他輔助成分,以支持cDNA合成反應。-有時還包括用于去除RNA樣品中污染的基因組DNA的DNaseI。合成的cDNA可以作為PCR或實時PCR的模板直接使用,也適用于第二鏈cDNA合成或線性RNA放大。此外,可以在cDNA合成過程中加入放射性或非放射性標記的核苷酸,以便在包括微陣列在內的雜交實驗中作為探針使用。
T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環節,確保了酶的穩定性和活性。以下是根據搜索結果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質粒載體中。-然后將這個質粒轉化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產品供科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。由于其在細胞信號傳遞中的重要性,A2aR成為了藥物開發的重要靶點之一。
1st Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H-)的逆轉錄過程是將RNA模板轉換成cDNA的過程。這個過程通常包括以下幾個步驟:模板RNA的準備:確保RNA模板的質量和純度,可能需要使用DNase I來去除RNA樣品中的DNA污染。逆轉錄反應體系的配制:根據試劑盒的說明,將RNA模板、引物(如Oligo(dT)、隨機六聚體或基因特異性引物)、dNTPs、逆轉錄酶和緩沖液等組分混合在一起。逆轉錄酶的啟用:如果需要,可能要將反應體系預熱到一定溫度以達到逆轉錄酶。逆轉錄反應:在適宜的條件下,逆轉錄酶會根據RNA模板合成一條互補的DNA鏈。這個過程通常在一定的溫度范圍內進行,以保證酶的活性和反應的效率。反應的終止:逆轉錄反應完成后,通常通過加熱到較高溫度來終止反應,以防止cDNA的進一步合成。產物的純化:合成的cDNA可能需要通過某些方法(如柱層析或沉淀)進行純化,以去除未反應的dNTPs、RNA模板和酶等。cDNA的檢測和應用:合成的cDNA可以用于后續的PCR、qPCR、克隆、測序等實驗。通過使用PNGase F去除糖蛋白上的糖鏈,可以確定蛋白質是否發生糖基化,以及糖基化位點。Recombinant Mouse ADAM8 Protein,His Tag
與其他Cas12蛋白相比,FnCas12a蛋白的分子量較小,大約在400-700個氨基酸之間。Recombinant Cynomolgus AFP Protein,His Tag
DNA瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的分子生物學技術,用于分離、鑒定和定量DNA片段。以下是關于DNA瓊脂糖凝膠電泳的一些關鍵點:1.**原理**:-利用瓊脂糖凝膠作為介質,DNA片段在電場作用下根據其大小和電荷差異進行分離。較小的DNA片段遷移速度快,而較大的片段遷移速度慢。2.**瓊脂糖**:-一種由瓊脂糖粉末和緩沖液(如TAE或TBE)混合制成的凝膠。瓊脂糖濃度通常在0.7%到2%之間,濃度越高,分辨率越高,但凝膠孔隙越小,遷移速度越慢。3.**樣品準備**:-DNA樣品通常需要在加載前進行適當的處理,如純化、稀釋,有時還需添加樣品緩沖液以保證樣品在電泳過程中的穩定性。4.**加載樣品**:-使用微量移液管將樣品和加載緩沖液(通常含有追蹤染料,如溴酚藍)混合后,小心地加載到凝膠孔中。5.**電泳**:-將凝膠置于電泳槽中,連接電源,施加恒定電壓進行電泳。電壓和時間根據凝膠濃度和所需分辨率進行調整。6.**染色**:-電泳完成后,為了可視化DNA條帶,通常使用熒光染料如EB(溴化乙錠)或SYBRGreen進行染色。染色后的凝膠在紫外光下觀察,DNA條帶會發出熒光。7.**分析**:-通過比較DNA條帶的位置和已知大小的DNA標準品(DNAladder),可以估計DNA片段的大小。
Recombinant Human Complement factor I Protein
Recombinant Human MFAP4 Protein
N-Boc-Phe-Leu-Phe-Leu-Phe
Recombinant Human CTGF/CCN2 Protein
Rat Eotaxin/CCL11
PAR-1 agonist peptide
Recombinant Mouse MXRA8 Protein
Recombinant Human PKC iota Protein
Recombinant Mouse CD21 Protein
Recombinant Mouse G-CSF