T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環節,確保了酶的穩定性和活性。以下是根據搜索結果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質粒載體中。-然后將這個質粒轉化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產品供科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。泛素化是一種蛋白質翻譯后修飾過程,涉及將泛素分子共價結合到靶蛋白上。這個過程由一系列酶促反應組成。Recombinant Cynomolgus LILRA4/CD85g Protein,His Tag
磁珠本身并不直接參與電泳過程,但它們可以用于電泳后的樣品處理,特別是在核酸(DNA或RNA)的提取和純化過程中。以下是使用磁珠進行電泳后樣品處理的一般步驟:1.**凝膠電泳**:-首先,將DNA或RNA樣品通過凝膠電泳進行分離。凝膠通常是瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠,根據樣品的大小和類型選擇合適的凝膠濃度和緩沖體系。2.**觀察和切割**:-電泳完成后,使用紫外線照射凝膠并使用適當的染料(如EB或SYBRGreen)對DNA或RNA進行染色,以在紫外光下觀察到DNA或RNA的條帶。3.**樣品提取**:-確定目標DNA或RNA條帶后,使用干凈的工具(如切割器或移液槍)從凝膠中切割出含有目標分子的凝膠片段。4.**磁珠準備**:-根據磁珠試劑盒的說明書,準備磁珠。通常包括磁珠的重懸和可能的表面修飾,以確保它們能夠特異性地結合目標核酸。5.**樣品與磁珠混合**:-將切割出的凝膠片段轉移到含有磁珠的溶液中,溫和地混合以促進磁珠與核酸的結合。6.**磁分離**:-將含有磁珠和核酸的混合物置于磁分離架上,利用磁場使磁珠快速聚集在管底,從而實現與溶液的分離。7.**洗滌**:-移除未結合的溶液,向磁珠上加入洗滌液,再次進行磁分離以去除雜質。Recombinant Cynomolgus AGER Protein,His Tag這類蛋白質在細胞的信號傳遞、物質轉運、細胞間識別等多種細胞功能中扮演著重要的角色。
5'DNA腺苷酰化試劑盒是一種用于將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷酰化修飾的實驗工具,其主要應用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測序建庫或PCR檢測等時,在3'端添加的接頭的制備。以下是5'DNA腺苷酰化試劑盒的一些關鍵特點和使用方法:1.**高效轉化**:該試劑盒能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉化成腺苷酰化DNA(AppDNA),從而提高產量并避免膠回收提純步驟。2.**操作簡便**:單步反應即可完成腺苷酰化,無需復雜的操作或額外的純化步驟。3.**高溫反應**:在65℃的高溫下進行反應,這有助于避免DNA或RNA的二級結構對腺苷酰化反應的干擾。4.**適用性廣**:適用于pmol級別至μmol級別的底物量,可以方便地根據實驗需要放大反應體系。5.**組成成分**:試劑盒通常包含腺苷酰化酶(Adenylase)、ATP和所需的緩沖液,以及用于啟動反應的5'-磷酸化的單鏈DNA。6.**保存條件**:一般建議在-20℃保存,有效期至少一年,長期儲存建議在-70℃。7.**注意事項**:底物單鏈DNA或RNA的5'端磷酸化是必須的,而3'端可以進行氨基化等封閉,也可以不封閉。反應完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活Adenylase,防止去腺苷酰化現象。
Blood Direct PCR Master Mix (2×)的組分通常包括以下幾類:高保真DNA聚合酶:例如,NEB的Q5 Blood Direct 2X Master Mix中包含的Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase,這是一種熱穩定性DNA聚合酶,具有3'→5'核酸外切酶活性,并與Sso7d結構域融合以增強過程性3940。dNTPs:提供DNA合成所需的四種脫氧核苷三磷酸。優化的緩沖體系:包含適合于血液樣本PCR擴增的pH和離子強度,以及能夠抵抗血液樣本中抑制劑的特殊成分。穩定劑:保證預混合溶液在儲存和使用過程中的穩定性。抗抑制劑成分:一些Blood Direct PCR Master Mix含有能夠抵抗血液樣本中可能存在的PCR抑制劑的成分。可選的染料:某些產品可能含有用于電泳的染料,允許PCR產物直接上樣進行電泳分析,無需額外的上樣緩沖液。其他可選組分:根據需要,可能包括MgCl2、EDTA、DMSO等,用于優化特定樣本或反應條件42。可以利用現有的計算工具,如CRISPR design tools,預測gRNA的活性和特異性,以輔助實驗設計 。
PCR產物直接進行電泳分析通常涉及以下步驟:PCR擴增:首先使用PCR Master Mix和特定的引物對目標DNA片段進行擴增。PCR產物的準備:如果使用的是含有預混凝膠加載染料的PCR Master Mix(如某些Blood Direct PCR Master Mix),則PCR產物在擴增后已經含有了適合電泳的染料。如果沒有使用含染料的Master Mix,則需要在PCR反應完成后向產物中添加適量的凝膠加載染料。電泳槽的準備:清潔電泳槽,確保沒有灰塵或殘留物。安裝電泳板和梳子,注意密封以防緩沖液泄漏。灌注緩沖液:向電泳槽中灌注適量的電泳緩沖液,常用的緩沖液有1X TAE或1X TBE。PCR產物的加載:將PCR產物輕輕混合均勻,避免氣泡的產生。使用移液槍或微量移液管將PCR產物加入到凝膠孔中。如果PCR Master Mix中已含有染料,通常不需要額外添加。電泳條件的設置:根據PCR產物的大小和凝膠的濃度選擇合適的電壓和時間進行電泳。例如,較小的DNA片段可能需要較高的電壓,而較大的片段則可能需要較低的電壓和更長的時間。GPCR家族是一類存在于生物體中的跨膜蛋白,它們可以識別并與外界分子相互作用,引發各種細胞內信號。Recombinant Human GAL1 Protein,hFc Tag
跨膜蛋白的跨膜區域的相互作用是連接膜外環境與細胞內環境的重要渠道。Recombinant Cynomolgus LILRA4/CD85g Protein,His Tag
EB分子生物學通常指的是溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)在分子生物學中的應用。溴化乙錠是一種常用的熒光染料,主要用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA或RNA。它通過插入核酸的堿基對之間,在紫外光照射下發出橙紅色的熒光,從而實現對核酸的可視化。溴化乙錠與DNA的結合幾乎沒有堿基序列特異性,并且在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.5個堿基插入一個EB分子。然而,值得注意的是,溴化乙錠具有一定的毒性,它是一種強誘變劑,具有高致病性。在實驗結束后,需要對含EB的溶液進行凈化處理,以避免對環境和人體健康造成危害。處理方法包括稀釋EB溶液至低于0.5mg/ml的濃度,然后加入化學物質進行中和,廢棄。除了作為染色劑外,溴化乙錠還可用于凝膠阻滯分析中檢測蛋白與DNA復合物,以及在凝膠電泳過程中觀察單個DNA分子。盡管EB具有這些應用,但由于其潛在的毒性和誘變性,使用時必須格外謹慎,并采取適當的安全措施。在實驗操作中,EB可以加入到凝膠中進行染色,也可以在電泳完成后加入進行染色。先加EB可以節省時間,但可能會導致背景稍微高且信號強度下降,不宜用于核酸分子大小的確定和定量。后加EB可以減少污染,圖譜更清晰,但相對耗時。Recombinant Cynomolgus LILRA4/CD85g Protein,His Tag
Recombinant Human IL-17 Protein
Recombinant Cynomolgus NKG2D/CD314 Protein
Recombinant Human CD37 Protein
Recombinant Human TPO Protein
Recombinant Mouse LYPD3 Protein
Recombinant Human LILRB1/CD85j/ILT2 Protein
Recombinant Rat GFRAL/GFR alpha-like Protein
Recombinant Human ULBP-2 Protein
Recombinant Mouse LTBR Protein
Recombinant Canine CD46 Protein