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潤(rùn)濕印跡。,對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用和大多數(shù)抗體而言,0.5%的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意:請(qǐng)勿使用濃度高于0. 5%的干奶,因?yàn)樗赡軙?huì)導(dǎo)致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液,請(qǐng)參閱表5了解兼容性和推薦濃度。●在洗滌,封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1%Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力,并確保孵育過(guò)程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中的免疫檢測(cè)時(shí)間很短,因此建議在開始操作之前應(yīng)準(zhǔn)備一抗和二抗稀釋液。●MultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL,Mini blot固定器為5 mL,10 mL用于Midi印跡固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot為15毫升),以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。青浦區(qū)Merck手持細(xì)胞計(jì)數(shù)器Merck儀器代理商關(guān)于WB實(shí)驗(yàn)加速器哪家專業(yè)?

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盤,請(qǐng)?jiān)诓襟E5之后插入托盤。有關(guān)詳細(xì)信息,請(qǐng)參閱“抗體恢復(fù)”部分。 6.在整個(gè)表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數(shù)量(對(duì)于MultiBlot為2.5毫升,對(duì)于迷你吸墨紙為5毫升,或10 mL用于Midi印跡)。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點(diǎn)固定器中,表面可能會(huì)變干。重要提示:請(qǐng)勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒,直到框架完全是空的。9.在連續(xù)運(yùn)行真空的情況下,添加30 mL洗滌緩沖液(MultiBlot為15毫升)。重復(fù)洗滌步驟3次以上(總共4次洗滌)。當(dāng)框架完全為空時(shí),將TURN真空關(guān)閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗(對(duì)于多印跡,為2.5 mL,5毫升用于迷你印跡,或10毫升用于Midi印跡)。在室溫下孵育10分鐘,然后上海益啟生物的微流控細(xì)胞芯片分析儀公司電話。

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P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個(gè)4x 30 mL每個(gè)4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補(bǔ)充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計(jì)算免疫檢測(cè)所需的抗體量時(shí),三個(gè)要素對(duì)于成功檢測(cè)出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號(hào)):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級(jí)和二級(jí)抗體濃度●檢測(cè)試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑進(jìn)行了測(cè)試。對(duì)于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)中一抗稀釋的實(shí)例 SNAPi.d.?2.0免疫檢青浦區(qū)Merck手持細(xì)胞計(jì)數(shù)器Merck儀器代理商

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