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潤濕印跡。，對于大多數應用和大多數抗體而言，0.5％的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意：請勿使用濃度高于0. 5％的干奶，因為它可能會導致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液，請參閱表5了解兼容性和推薦濃度。●在洗滌，封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1％Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力，并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統中的免疫檢測時間很短，因此建議在開始操作之前應準備一抗和二抗稀釋液。●MultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL，Mini blot固定器為5 mL，10 mL用于Midi印跡固定器。，每次需要洗30次（MultiBlot為15毫升），以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。徐匯區Merck超濾杯Merck儀器上海益啟生物細胞計數器的銷售電話。

15分鐘。圖4.擴展孵化（過夜）：SNAP i.d.8 2.0系統與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）轉移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5％NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒，標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，對于HRP偶聯的二抗山羊抗兔（AP132P），將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后，將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化（1小時）：，SNAP i.d.o 2.0系統1小時協議與SNAP i.d.9 2.0系統標準協議與標準免

用SNAP i.d.o 2.0系統 系統設置 1.將SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作臺上。2.通過推動管道末端的聯接插件，將真空管道連接至系統背面。插入系統基座背面的快速斷開接頭，直至其滑動。注意：要斷開管路連接，請用食指將管路連接器下方的卡舌向上推，然后將其拉出。管出來。3.將管道的另一端連接到真空源。使用一升的真空燒瓶作為疏水閥和一個Millex-FA。過濾器（目錄號SLFA05010）可保護真空源不受污染，如下所示。注意：任何可以產生410毫巴（12 inHg）和34 L / min的真空源就足夠了。如果是真空如果源的工作溫度高于410毫巴，則SNAP i.d.2.0系統將自動調節真空度壓力。如果真空源不足，則流經系統的流量可能會不一致，從而導致更長的時間。處理時間和/或抗益啟生物公司帶您了解樣本制備儀詳情。

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