胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發現母牛懷孕,就應立即將生殖系統從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進行臍帶打結處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導管被抽入無菌的血液收集袋內。在沒有真空泵時,也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個月,否則會因心臟太小而不便于操作。一個3月齡的胎兒可產生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產生350mL和550mL血清。胎牛血清含有多種對細胞生長必需的營養因子及大分子物質。泰州無外泌體胎牛血清哪里有賣
胎牛血清在細胞培養中的作用:1.提供對維持細胞指數生長的Hormone,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結合或調節它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。7.參與細胞凍存。在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養基的成分來確定較佳濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優良品質。泰州無外泌體胎牛血清哪里有賣胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,通過一系列工藝處理獲得。
胎牛血清:胎牛血清參與細胞培養,是細胞生長天然的培養基,它為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養。透析胎牛血清主要用于可能需要關注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領域:蛋白質組學、同位素標記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養基中培養細胞,來標記細胞內新合成的蛋白質,一般培養5-6代,細胞中的蛋白質將都被同位素標記。然后質譜分析,即可比較經過不同處理的細胞,其內部蛋白質豐度的變化。
胎牛血清融化:胎牛血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時的亮線,這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級冰淇淋和大棒冰的區別,你懂得!)試想,如果采用4℃過夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產生沉淀的重要原因之一。胎牛血清是細胞培養中常用的天然培養基。
如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實驗的成功的前提是所有實驗人做細胞培養的共識,如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個方面著手。1.外觀,好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發現血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性;若棕紅色,說明,血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛;數值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標準為不高于,20mg/dl,顏色越紅,數值越高;反之,數值越低。4、pH國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關。FBS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。泰州無外泌體胎牛血清哪里有賣
我們常會看到胎牛血清的標注上有對產品滅活也有沒有滅活的。泰州無外泌體胎牛血清哪里有賣
胎牛血清對細胞貼壁中的作用:在細胞培養時,大部分來自實體組織感官的細胞會貼壁。它們在機體內時,也是與其他細胞或者細胞外基質結合的,貼壁對維持細胞的良好形態和促進細胞的增殖有益處。有人培養許旺細胞,發現貼壁良好的細胞,其增殖率也較高。人的造血干細胞培養,更是需要有貼壁細胞構成“造血微環境”。有人發現這些貼壁細胞包括成纖維細胞,巨噬細胞,上皮樣細胞,脂肪細胞,它們交錯連接,構成網狀支架結構。培養基中加入牛血清,對于粘附細胞的貼壁也很有幫助。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對細胞粘附都有促進作用。需注意,熱滅活小牛血清會降低血清對細胞粘附的促進作用,尤其在細胞旋轉培養時更為明顯。泰州無外泌體胎牛血清哪里有賣
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