胎牛血清的意義:胎牛血清是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血,豐富的生長發(fā)育因子,胎牛血清非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,胎牛血清起到為細(xì)胞提供營養(yǎng)、支持、保護(hù)的作用。好的的胎牛血清是讓細(xì)胞“快樂成長”的必備營養(yǎng)物,但劣質(zhì)的胎牛血清,也可能會成為導(dǎo)致細(xì)胞死亡的“定時炸雷”。因此,挑選需要擦亮們的雙眼。蛋白含量,總蛋白含量:胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,可能說明牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻入水或者其他溶劑。血紅蛋白含量:標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的數(shù)值能側(cè)面反映出時的牛齡情況,新生牛血清中容易檢出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中。深圳優(yōu)級胎牛血清價格
胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。所有胎牛血清均在當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協(xié)會要求。胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng),是細(xì)胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細(xì)胞提供生長因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來促進(jìn)體外細(xì)胞培養(yǎng)。深圳優(yōu)級胎牛血清價格胎牛血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
胎牛血清的處理方法有:熱滅活,F(xiàn)BS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補(bǔ)體系統(tǒng)的任何成分,以及其他潛在的未知細(xì)胞生長抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染,這不再是一個問題,因為現(xiàn)在所有的血清產(chǎn)品都通過小到足以去除支原體的孔徑進(jìn)行過濾。必須注意的是,熱滅活也可能產(chǎn)生不良影響,例如降低培養(yǎng)細(xì)胞附著在表面上的能力。熱滅活過程必須小心進(jìn)行,因為溫度過高或長時間加熱會使生長因子失活,并產(chǎn)生沉淀物。
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標(biāo)記研究細(xì)胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選,避免外源小分子對細(xì)胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進(jìn)行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經(jīng)過0.1微米膜三重過濾,要進(jìn)行一系列的檢測,包括理化性質(zhì)檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內(nèi)的毒性和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細(xì)菌、病毒和支原體)以及促進(jìn)細(xì)胞增殖的檢查等。透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。
用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質(zhì)量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進(jìn)行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內(nèi)充分滋潤容器內(nèi)壁;將胎牛血液置入上述滋潤過的取血容器內(nèi),搖動使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態(tài),然后將采的血試管在離心機(jī)中以3000-14000r/min轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人或獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。深圳優(yōu)級胎牛血清價格
胎牛血清含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。深圳優(yōu)級胎牛血清價格
胎牛血清制備:離心,將準(zhǔn)備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后,對稱放入離心機(jī),按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機(jī)抽氣口上。打開壓縮機(jī),用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內(nèi)的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。深圳優(yōu)級胎牛血清價格
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