國內科研人員購買胎牛血清的現狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國內血清市場這幾年是愈發的混亂了,很多商家都盯上了這塊“蛋糕”,現在國內市場能見到的各種來源的血清品牌大于50種,使用者在不了解國家政策和相關知識的前提下很難去辨別和選擇安全、穩定、合規的胎牛血清。另一方面是客戶很難找到血清相關的真實信息,即便想去分辨也無從下手,只能聽商家的了。現在允許進口的血清產地很少,只有南美(烏拉圭)、澳大利亞、新西蘭。對血清行業有些了解的人看到這些,就會知道能夠進口到國內的胎牛血清注定是很少的。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化。無錫OriCell胎牛血清
血清為何要熱滅活,有必要對所有血清都滅活嗎?如何正確的進行滅活?加熱可以滅活補體系統。啟動的補體系統參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中,培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅清。實驗顯示,熱滅清對大多數的細胞而言是不需要的,對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長速率降低,沉淀物還會明顯增多,不利于細胞觀察。因此,若非必須,不需要對血清進行滅活處理。將需要進行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對照(同體積水)使用溫度計測溫,以測得溫度為56℃時為計時起始點,加熱中可不時輕度旋轉混勻血清。無錫OriCell胎牛血清大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。
那么如何保障胎牛血清的品質呢:內有毒的,內有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優級胎牛血清;內有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;應選取內有毒的含量低的胎牛血清,使培養的細胞更健康。如果選取內有毒的較高的血清,細胞一直泡在“毒液”里,短期內細胞看不出太明顯的變化,但長期的話細胞會衰老得較快,從而對實驗結果造成嚴重影響。微生物:微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴格的生產工藝可以對細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過病毒的檢測,可以嚴格控制牛腹瀉、牛細小、藍舌病等病毒。通過非瘋牛病疫區生產還可避免朊病毒。
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿較為大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。
國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會產生沉淀,同時能縮短血清融化時間。關于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎培養基中,混合后配成完全培養基。曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體很好濃度需要用戶根據自己的實驗來確定,以既保證培養的效果,又避免血清的浪費。胎牛血清支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)大增殖濃度≥2.5×106 個/ml。無錫OriCell胎牛血清
胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內有毒的 ≤5(EU/ml)。無錫OriCell胎牛血清
因為制作工藝成熟和產量大的原因,實驗室常備血清一般都為牛血清。而牛血清種類也因適合培養不同種類的細胞分很多種了,同屬于牛血清為什么它們價格卻有天壤之別。我們就拿市面上應用較為廣的胎牛血清和新生牛血清為例。除了生產成本和供應來源不一樣外,兩種血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進行心臟穿刺取血。穿刺取血可較為大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內的新生牛靜脈。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產量低,成本高。二者的成分也很不一樣。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,還含有豐富的胚胎生長促進因子以及各種還未完全鑒定的成分,可滿足所培養細胞的特殊的代謝需求。無錫OriCell胎牛血清
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