培養液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養液中添加HEPES時需按以下方法調節鈉離子濃度。緩沖系統大多數細胞所需pH在-。但是，細胞培養適pH值隨培養的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數培養液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應與培養液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養箱空氣中CO2濃度設定在5％，培養液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養液中NaHCO3的加入量為。細胞培養瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養條件下，細胞培養瓶的蓋子應擰緊，以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養液呈橙黃色，堿性培養液呈深紅色。MEM α 培養基不含核苷和脫氧核苷的MEM α培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。廣東醫用細胞培養基批發

    MEMα是一種改良的MEM培養基，與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富，在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分，廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級細胞培養添加劑，可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養素，但其在溶液中不穩定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定，不會自發的降解。細胞利用其機制是：在細胞培養時，細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似，連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成多余的氨，更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無需適應。 湖南正規細胞培養基供應商家RPMI-1640培養基初是為淋巴細胞培養專門設計的，現在已應用于各種正常細胞ai細胞的培養。

    隨意調節葡萄糖的濃度，方便快捷。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產，例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑，對細胞無毒性作用，添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續監測培養液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養液呈黃色，而較高的PH值時使培養液呈紫色，PH值～，適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點，使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合，抑制細菌蛋白質的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。

    其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹。MEM（MinimalEssentialMedium）培養基MEM（MinimalEssentialMedium）培養基有含Earle's平衡鹽的類型，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓滅菌型的，也有過濾除菌型的；還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細胞培養基。DMEM細胞培養基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好，常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。IMDM細胞培養基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎上改良，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等。可用于雜交瘤細胞培養，以及無血清培養的基礎細胞培養基。RPMI-1640細胞培養基專門針對淋巴細胞培養設計，含有BSS、21種氨基酸、維生素等，適于多種正常細胞和腫瘤細胞的培養，也用做懸浮細胞培養。HamF12細胞培養基含微量元素。MEM培養基（Minimum Essential Medium）也稱比較低必需培養基、小基本培養基或低限量Eagle培養基。

    可在血清含量低時用，適用于克隆化培養。F12適用于CHO細胞，也是無血清細胞培養基中常用的基礎細胞培養基。DMEM/F12細胞培養基將DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后營養成份豐富，血清使用量也減少。常作為開發無血清細胞培養基時的基礎細胞培養基。與天然培養基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代，因此，細胞培養中使用合成培養基時必須加入一定量的天然培養基成分，以克服合成培養基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清，這樣才能維持細胞活力，促進細胞增殖。針對不同的動物細胞，現已開發了多種商業化、個性化的低血清細胞培養基配方，營養成份更加豐富，血清使用量可降低至1～3%，由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養基（serumfreemedium，SFM）經歷了天然培養基、合成培養基后，無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。無血清培養基，一般是在合成培養基的基礎上，加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份，達到既能滿足動物細胞培養的要求，又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。MCDB是為特定細胞設計的低蛋白和無血清培養的培養基。北京華晨陽細胞培養基供應商家

MCDB131是MCDB培養基的一種，是由Knedler和Ham設計開發出來的，初用于培養人微血管內皮細胞（HMVEC）。廣東醫用細胞培養基批發

    含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成（采用平衡鹽溶液溶解）與合成培養基（如MEM細胞培養基）以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外，血清含一些對細胞產生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。目前，血清多作為一種添加成分與合成培養基混合使用，使用濃度一般為5~20%，常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復雜，批間差異大及存在病毒等外源污染風險，對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響，在生物制藥行業的使用也越來越少。因此，基于對血漿成份的分析，合成細胞培養基應運而生。合成培養基是根據天然培養基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。開發的基礎培養基（minimalessentialmedium,MEM）。廣東醫用細胞培養基批發

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