培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%還是10%CO2,或者根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10% CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。NaHCO3的作用:培養(yǎng)基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統(tǒng),并采用開放培養(yǎng),使細胞代謝產(chǎn)生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶,再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%) ,與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài),從而調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值。NEAA:非必須氨基酸,NEAA(非必需氨基酸) 是含幾種非必需氨基酸的合劑,添加到的原培養(yǎng)基不同,NEAA 也有不同的種類,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。自制培養(yǎng)基需要小心配比,防止成分誤差或者污染。7%無菌脫纖維綿羊全血
血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)。7%無菌脫纖維綿羊全血培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術(shù),避免細菌交叉污染。
bFGF是一個肝素結(jié)合的多膚類絲裂源,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,可刺激多種細胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)它對滋養(yǎng)細胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用,刺激與增殖有關(guān)的基因表達。Thomson 等認為,像其他體外培養(yǎng)的人體細胞一樣,hES 細胞要求 bFGF 的存在以促進增殖。同理EGF(上皮生長因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),由53個氨基組成的活細胞,藉由刺激表皮細胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化,達到修補增生肌膚表層細胞,據(jù)說對受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,其較大特點是能夠促進細胞的增殖分化。所以加入它們都是促進細胞增殖的。
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等)等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。培養(yǎng)基是一種供養(yǎng)分離的微生物和生物樣品的營養(yǎng)物質(zhì)基質(zhì)。
細胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存、運輸活組織及細胞的液體,實質(zhì)為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,使細胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。由于其成分數(shù)量明確并可通過調(diào)節(jié)某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學改變,被廣泛應(yīng)用于細胞生物學科的研究。細胞培養(yǎng)液的組成成分主要有水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子、生長因子等,這些成分必須通過嚴格挑選,嚴格測試后方可使用,所用的水必須達到2級試驗用水(CB/T 6682-1992),所用的器皿必須清潔無污并進行高壓滅菌或干烤去熱源處理。常用的培養(yǎng)基中添加的基本營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、磷酸鹽、有機物、無機鹽和微量元素。7%無菌脫纖維綿羊全血
細胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類。7%無菌脫纖維綿羊全血
近年來,國內(nèi)外利用某些細菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,研制出某些細菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當細菌含有相應(yīng)酶時,使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前,顯色培養(yǎng)基已用于多種細菌的分離鑒別培養(yǎng),如沙門菌、大腸埃希菌、李斯特菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌、白色念珠菌等顯色培養(yǎng)基。7%無菌脫纖維綿羊全血
上海瑞楚生物科技有限公司是以提供培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶為主的有限責任公司(自然),瑞楚生物是我國化工技術(shù)的研究和標準制定的重要參與者和貢獻者。瑞楚生物以培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶為主業(yè),服務(wù)于化工等領(lǐng)域,為全國客戶提供先進培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶。多年來,已經(jīng)為我國化工行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟等的發(fā)展做出了重要貢獻。