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來源: 發布時間:2023年05月26日

培養細胞時應使用5%還是10%CO2,或者根本沒有影響?一般培養基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統,而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養時應使用10% CO2;當培養基中NaHCO3 為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養細胞。NaHCO3的作用:培養基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統,并采用開放培養,使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養瓶,再通過穩定調節溫箱中CO2濃度(5%) ,與培養基中的NaHCO3處于平衡狀態,從而調節培養基的PH值。NEAA:非必須氨基酸,NEAA(非必需氨基酸) 是含幾種非必需氨基酸的合劑,添加到的原培養基不同,NEAA 也有不同的種類,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。自制培養基需要小心配比,防止成分誤差或者污染。7%無菌脫纖維綿羊全血

培養基

血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。7%無菌脫纖維綿羊全血培養基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術,避免細菌交叉污染。

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bFGF是一個肝素結合的多膚類絲裂源,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細胞增殖分化調節劑,可刺激多種細胞的增殖。有研究發現它對滋養細胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細胞膜上FGF受體結合發揮作用,刺激與增殖有關的基因表達。Thomson 等認為,像其他體外培養的人體細胞一樣,hES 細胞要求 bFGF 的存在以促進增殖。同理EGF(上皮生長因子) , 是人體內的一種活性物質,由53個氨基組成的活細胞,藉由刺激表皮細胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化,達到修補增生肌膚表層細胞,據說對受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,其較大特點是能夠促進細胞的增殖分化。所以加入它們都是促進細胞增殖的。

培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等)等。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。培養基是一種供養分離的微生物和生物樣品的營養物質基質。

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細胞培養液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養、保存、運輸活組織及細胞的液體,實質為人工模擬體內生長的營養環境,使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。由于其成分數量明確并可通過調節某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學改變,被廣泛應用于細胞生物學科的研究。細胞培養液的組成成分主要有水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子、生長因子等,這些成分必須通過嚴格挑選,嚴格測試后方可使用,所用的水必須達到2級試驗用水(CB/T 6682-1992),所用的器皿必須清潔無污并進行高壓滅菌或干烤去熱源處理。常用的培養基中添加的基本營養物質包括碳源、氮源、磷酸鹽、有機物、無機鹽和微量元素。7%無菌脫纖維綿羊全血

細胞類培養基則可分為無血清培養基和含血清培養基兩類。7%無菌脫纖維綿羊全血

近年來,國內外利用某些細菌特有的酶,選擇相應的作用底物,研制出某些細菌專門用的的顯色培養基,用于細菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養基實際上也是鑒別培養基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細菌作用底物的結合物加于培養基中,當細菌含有相應酶時,使該結合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前,顯色培養基已用于多種細菌的分離鑒別培養,如沙門菌、大腸埃希菌、李斯特菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌、白色念珠菌等顯色培養基。7%無菌脫纖維綿羊全血

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