TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。除了用于分離血鏈球菌外,TYC培養(yǎng)基也可以用于制備變形鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑,pH值調(diào)整至7.3±0.2(25℃)。TYC培養(yǎng)基通過其成分提供了細(xì)菌生長所需的氮源、碳源、維生素和生長因子。其中,L-胱氨酸和亞硫酸鈉有助于抑制某些非目標(biāo)細(xì)菌的生長,而促進目標(biāo)鏈球菌的生長。此外,TYC培養(yǎng)基也可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加其選擇性。在實驗室中,TYC培養(yǎng)基通常按照以下方法配制:1.稱取98.0g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。4.滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.如有需要,培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時,可選擇性添加過濾除菌的桿菌肽0.2U/ml以增加選擇性。TYC培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和臨床診斷中具有重要應(yīng)用,特別是在口腔微生物的檢測和研究中。下層培養(yǎng)基成分則包括血消化湯、瓊脂、葡萄糖和酚紅溶液。這些成分為細(xì)菌提供碳源、氮源。改良DG-18瓊脂平板
酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于鑒定細(xì)菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持滲透壓;酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌10-15分鐘。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝試管,每管3ml。5.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時,培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,表明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(SN標(biāo)準(zhǔn)),也用于檢測大腸菌群。7.**結(jié)果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,說明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲存條件**:避光,密封,陰涼干燥處保存。TSAWLP平板在冷凍保存過程中,使用保護劑如甘油、血清、糖類等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害 。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養(yǎng)弧菌科細(xì)菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環(huán)境,高濃度抑制其他細(xì)菌生長。-蔗糖作為可發(fā)酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應(yīng),檢測細(xì)菌產(chǎn)硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細(xì)菌利用蔗糖產(chǎn)酸會使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養(yǎng)基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細(xì)菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍(lán)綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時,使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動導(dǎo)致的。5.**儲存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲存。CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結(jié)晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。
溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,特別是在鑒定某些細(xì)菌對溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,這些成分為細(xì)菌的生長提供碳源、氮源、維生素和生長因子。此外,還需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一種能夠水解細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,主要用于檢測細(xì)菌對溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃),以保證細(xì)菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝于燒瓶中,每瓶99ml,高壓滅菌后冷卻至50℃左右時,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混勻后分裝無菌試管,每管2.5ml,備用。5.**用途**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗,如GB4789.14-2014標(biāo)準(zhǔn)所述。它可以用來鑒定細(xì)菌是否能夠在溶菌酶存在的情況下生長,從而幫助鑒別不同的細(xì)菌種類。6.**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶營養(yǎng)肉湯中。巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。YPD預(yù)裝培養(yǎng)基培養(yǎng)皿
克氏雙糖鐵試驗時間通常控制在18-24小時,以確保細(xì)菌發(fā)酵充分且不過度,避免影響判斷結(jié)果。改良DG-18瓊脂平板
DPD培養(yǎng)基(DPDMedium)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點是全無機鹽配方,適用于多種植物細(xì)胞的培養(yǎng)。以下是DPD培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點:1.**成分**:DPD培養(yǎng)基包含多種無機鹽和有機物,如硝酸銨、硫酸鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸二氫鉀、硫酸亞鐵、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA二鈉)、硫酸錳、鉬酸鈉、硼酸、硫酸鋅、硫酸銅、氯化鈷、碘化鉀、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、肌醇、葉酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激動素等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)整至5.8,以滿足植物細(xì)胞生長的需要。3.**用途**:DPD培養(yǎng)基主要用于植物組織的培養(yǎng),包括植物細(xì)胞、組織的生長和發(fā)育。4.**配制方法**:通常稱取一定量的DPD培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。5.**保存條件**:DPD培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為三年,應(yīng)避光、干燥保存,或根據(jù)需要保存于2-8°C。6.**注意事項**:在使用時,應(yīng)檢查培養(yǎng)基是否有顏色變化、蒸發(fā)/脫水情況或微生物生長。培養(yǎng)基融化后應(yīng)立即使用,避免重復(fù)融化和長時間放置。7.**用法**:在使用前,需要調(diào)整pH值至5.8,并進行高壓滅菌處理。DPD培養(yǎng)基因其成分穩(wěn)定和適用性廣,在植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。 改良DG-18瓊脂平板