蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(TSSB)是一種用于分離和培養(yǎng)蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化鈉、苯酚紅和瓊脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作為可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持滲透壓,苯酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黃乳液使用,每100ml蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黃乳液。5.**用法**:稱取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時,每瓶加入10ml50%的無菌卵黃乳液和多粘菌素B10000IU混勻,傾入無菌平皿,備用。6.**菌落特征**:蠟樣芽孢桿菌在TSSB上生長時,菌落通常為微粉紅色,周圍有淡粉紅色沉淀環(huán),這有助于識別蠟樣芽孢桿菌。7.**質量控制**:進行微生物靈敏度試驗時,按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時。通常將卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。改良馬丁瓊脂預裝培養(yǎng)皿
牛津瓊脂(OXA)基礎是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長,特別是非李斯特氏菌。2.**應用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標準。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌平皿備用。4.**結果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長時,會形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎因其高選擇性和特異性,是檢測食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。甘露醇發(fā)酵平板培養(yǎng)基預裝培養(yǎng)皿克氏雙糖鐵試驗時間通常控制在18-24小時,以確保細菌發(fā)酵充分且不過度,避免影響判斷結果。
牛津瓊脂(OXA)基礎的pH值對李斯特氏菌的生長有影響。李斯特氏菌的適生長pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎的pH值相匹配。在這個pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長并表現(xiàn)出其特有的生物學特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對微生物生長至關重要,因為它可以影響:1.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內活性高。2.**細胞膜功能**:pH值的變化可能會干擾細胞膜的完整性和功能,影響營養(yǎng)物質的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會抑制李斯特氏菌的生長,或者導致其他非目標微生物過度生長,影響結果的準確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎能夠準確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實驗室人員需要仔細控制和監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養(yǎng)弧菌科細菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環(huán)境,高濃度抑制其他細菌生長。-蔗糖作為可發(fā)酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應,檢測細菌產(chǎn)硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細菌利用蔗糖產(chǎn)酸會使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養(yǎng)基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
彎曲桿菌瓊脂基礎是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特點:1.**選擇性培養(yǎng)**:彎曲桿菌瓊脂基礎通常與特定的選擇性添加劑一起使用,如改良Karmali選擇性添加劑或彎曲桿菌選擇性添加劑,這些添加劑含有抗生物質,如萬古霉素和兩性霉素B,以抑制其他非目標微生物的生長,提高目標彎曲桿菌的分離率。2.**無血培養(yǎng)基**:某些類型的彎曲桿菌瓊脂基礎是無血的,這使得它在某些應用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟。無血培養(yǎng)基通常使用活性炭、硫酸亞鐵和酸鈉替代血液。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,生長環(huán)境是含氧氣5%、二氧化碳10%、氮氣85%。因此,彎曲桿菌瓊脂基礎通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在適宜的條件下,空腸彎曲桿菌在彎曲桿菌瓊脂基礎中生長,形成灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.配方:彎曲桿菌瓊脂基礎的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等,提供碳、氮源、維生素和生長因子。
木糖明膠培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明膠、木糖、磷酸氫二鈉和酚紅等。改良馬丁瓊脂預裝培養(yǎng)皿
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點和用途:1.**成分**:該培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),也可用于MPN值測定和消毒劑消毒效果的測試。4.**添加劑**:在使用時,需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長,促進目標微生物蠟樣芽孢桿菌的生長。多粘菌素B的添加量根據(jù)產(chǎn)品說明進行,例如每100ml培養(yǎng)基基礎添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養(yǎng)基添加1支多粘菌素B(2.25萬單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養(yǎng)48小時,應觀察到良好的生長和溶液混濁,以驗證培養(yǎng)基的有效性。