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Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024年11月07日

在比較BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶對(duì)于復(fù)雜DNA片段擴(kuò)增的適用性時(shí),以下是一些關(guān)鍵點(diǎn):1.**TaqDNA聚合酶**:-TaqDNA聚合酶因其高熱穩(wěn)定性和擴(kuò)增效率而被應(yīng)用于常規(guī)PCR。它擴(kuò)增速度為30-60秒/kb,缺乏3'→5'核酸外切酶活性,無(wú)校正功能,易產(chǎn)生錯(cuò)配堿基。-對(duì)于結(jié)構(gòu)復(fù)雜的模板,如GC含量高、有二級(jí)結(jié)構(gòu)等,TaqPlus可以用于擴(kuò)增,能有效地?cái)U(kuò)增10kb以下的片段。-有產(chǎn)品如TitaniumTaqDNA聚合酶,它是通過(guò)基因工程改造的Taq酶,缺失了5'-3'外切酶活性,具備更強(qiáng)大的擴(kuò)增性能,適合擴(kuò)增高度復(fù)雜的DNA混合物。2.**BstDNA聚合酶**:-BstDNA聚合酶具有高適溫度,能夠適應(yīng)更加苛刻的擴(kuò)增條件,同時(shí)消除DNA二級(jí)結(jié)構(gòu),因而能夠準(zhǔn)確并且均勻地?cái)U(kuò)增全基因組序列。-BstDNA聚合酶大片段能夠優(yōu)先擴(kuò)增短片段的DNA,并且能夠確保擴(kuò)增得到的DNA覆蓋了整個(gè)基因組,連貫并且無(wú)偏地?cái)U(kuò)增所有的遺傳位點(diǎn)。-翌圣生物HieffCanace®PlusHigh-FidelityDNAPolymerase基于PfuDNA聚合酶改造而成,其保真性是Taq酶的83倍,Pfu酶的9倍,擴(kuò)增速度高達(dá)10秒/kb,擴(kuò)增目的片段長(zhǎng)達(dá)13kb,具有極強(qiáng)的擴(kuò)增效率的模板適應(yīng)性,非常適合復(fù)雜模板的高保真擴(kuò)增。

在這個(gè)過(guò)程中,E1使用ATP的能量,在自身的活性位點(diǎn)的半胱氨酸殘基與泛素C末端的甘氨酸殘基形成硫酯鍵。Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag

Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白,它在N端和C端都添加了核定位信號(hào)(NLS),這使得它能夠更有效地進(jìn)入細(xì)胞核并進(jìn)行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導(dǎo)RNA(gRNA)形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物,可以在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核,從而誘導(dǎo)特定的DNA雙鏈斷裂,實(shí)現(xiàn)基因編輯。與傳統(tǒng)的mRNA或質(zhì)粒系統(tǒng)相比,使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程,因此可以避免將外源DNA插入基因組的風(fēng)險(xiǎn),這對(duì)于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點(diǎn)包括:1.無(wú)DNA:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了插入外源DNA的風(fēng)險(xiǎn)。2.高切割效率:雙NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核。3.低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性。4.節(jié)省時(shí)間:無(wú)需轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA,以及通過(guò)電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。產(chǎn)品的保存條件通常是在-25~-15℃,有效期為一年。使用時(shí),可以根據(jù)推薦的反應(yīng)體系進(jìn)行體外DNA裂解實(shí)驗(yàn),并通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)消化效率。具體產(chǎn)品的詳細(xì)信息和應(yīng)用指南,可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。Recombinant Biotinylated Mouse PLAU/uPA Protein,His-Avi TagProbe qPCR Mix (2×) 支持多重qPCR,即在單個(gè)反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)基因 。

Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

BsuDNAPolymerase(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶)與其他DNA聚合酶相比,具有一些獨(dú)特的特性和優(yōu)勢(shì):1.**鏈置換活性**:BsuDNAPolymerase保留了BacillussubtilisDNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性,但缺乏5'→3'核酸外切酶結(jié)構(gòu)域,這使得它具有鏈置換DNA合成的能力。這種能力對(duì)于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)如重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)非常重要,因?yàn)樗梢苑蛛x雙鏈DNA,允許新的DNA鏈的合成。2.**溫度穩(wěn)定性**:BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性,這使得它適用于需要在較高溫度下進(jìn)行的擴(kuò)增反應(yīng),如RPA技術(shù)中的65°C反應(yīng)條件。3.**無(wú)核酸外切酶活性**:BsuDNAPolymerase缺乏3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性,這意味著它不會(huì)像某些其他聚合酶那樣在合成過(guò)程中具有校對(duì)功能。這可以減少非特異性擴(kuò)增,提高擴(kuò)增的特異性。4.**高靈敏度和特異性**:BsuDNAPolymerase在等溫?cái)U(kuò)增中展現(xiàn)出高靈敏度,能夠?qū)⑽⒘亢怂崮0鍞U(kuò)增到可檢測(cè)水平,同時(shí)保持高特異性。5.**簡(jiǎn)化的操作流程**:與其他需要復(fù)雜操作和多個(gè)步驟的DNA聚合酶相比,BsuDNAPolymerase在等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)中的應(yīng)用簡(jiǎn)化了操作流程,因?yàn)樗恍枰獰嵫h(huán)儀,這使得它適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)和診斷。

SpCas9蛋白(來(lái)自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白)在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶,能夠精確地切割目標(biāo)DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個(gè)關(guān)鍵步驟和作用:1.**識(shí)別和結(jié)合**:SpCas9蛋白與一個(gè)單導(dǎo)向RNA(sgRNA)結(jié)合,形成RNP復(fù)合物。這個(gè)復(fù)合物能夠識(shí)別并結(jié)合到基因組中與sgRNA互補(bǔ)的特定DNA序列。2.**PAM序列識(shí)別**:SpCas9需要一個(gè)稱為原間隔子相鄰基序(PAM)的特定序列作為識(shí)別目標(biāo)DNA的先決條件。對(duì)于SpCas9,這個(gè)PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**:一旦RNP復(fù)合物與目標(biāo)DNA結(jié)合,SpCas9就會(huì)在PAM序列的3個(gè)堿基對(duì)的上游位置切割DNA雙鏈,產(chǎn)生一個(gè)雙鏈斷裂(DSB)。4.**引發(fā)DNA修復(fù)**:DNA雙鏈斷裂觸發(fā)細(xì)胞的DNA修復(fù)機(jī)制,包括同源定向修復(fù)(HDR)和非同源末端連接(NHEJ)。研究人員可以利用這些修復(fù)機(jī)制來(lái)插入、刪除或替換特定的DNA序列。5.**基因修改**:通過(guò)HDR,可以在斷裂的DNA兩端引入特定的DNA模板,從而實(shí)現(xiàn)精確的基因編輯。而NHEJ通常會(huì)導(dǎo)致小的插入或缺失(indel),這可以用來(lái)產(chǎn)生基因的敲除或敲入。6.**提高編輯效率**:為了提高SpCas9的編輯效率,研究人員可能會(huì)使用優(yōu)化的sgRNA設(shè)計(jì)、蛋白質(zhì)工程或嵌合融合蛋白等策略。

在泛素化過(guò)程中,首先泛素激起酶E1(Uba1或其他)在ATP的存在下激起泛素分子,形成E1-泛素硫酯中間體。

Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應(yīng)用非常廣,主要包括以下幾個(gè)方面:1.**PCR產(chǎn)物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應(yīng)液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、鹽類等雜質(zhì),回收率高,產(chǎn)物純度好,可以直接應(yīng)用于PCR、連接、測(cè)序、NGS建庫(kù)等下游實(shí)驗(yàn)。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液、唾液、口腔拭子和動(dòng)物組織等樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA,提取的DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合高通量工作站的自動(dòng)化提取。3.**質(zhì)粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質(zhì)粒DNA,通過(guò)精心優(yōu)化的溶液將質(zhì)粒DNA從基因組DNA和蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。4.**DNA片段的分離**:有許多類型的DNA分離試劑盒可供選擇,包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測(cè)序協(xié)議進(jìn)行分離,在這種情況下,可以用能選擇分子大小的磁珠來(lái)分離片段。5.**自動(dòng)化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動(dòng)化工作站或核酸自動(dòng)提取儀,實(shí)現(xiàn)高通量操作。6.**分子生物學(xué)研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進(jìn)化研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,為遺傳病研究、篩查等提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。FnCas12a需要一個(gè)crRNA,而不需要tracrRNA,簡(jiǎn)化了RNA的設(shè)計(jì)和構(gòu)建過(guò)程。N-Cbz-Phe-Arg-AMC

FnCas12a系統(tǒng)的脫靶效應(yīng)較低,這對(duì)于減少非目標(biāo)效應(yīng)和提高物質(zhì)的安全性至關(guān)重要。Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag

重組人血清白蛋白(rHSA)是一種重要的蛋白質(zhì),廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。植物表達(dá)的細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)重組人血清白蛋白(rHSA)具有多項(xiàng)特點(diǎn)和科研應(yīng)用價(jià)值:1.**高純度和安全性**:植物源重組人血清白蛋白(rHSA)通過(guò)基因工程技術(shù)在植物如水稻中表達(dá),避免了動(dòng)物源成分和血源性的病毒污染的風(fēng)險(xiǎn),提供了一種更安全、更純凈的蛋白質(zhì)來(lái)源。2.**批次穩(wěn)定性**:與來(lái)源于動(dòng)物的血清白蛋白相比,植物表達(dá)的rHSA提供了更高的批次間一致性和穩(wěn)定性,這對(duì)于科研和工業(yè)應(yīng)用中的重復(fù)性和可靠性至關(guān)重要。3.**多功能性**:rHSA在細(xì)胞培養(yǎng)中可以作為重要的添加成分,有助于細(xì)胞生長(zhǎng)和維持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性。它還可以作為藥物載體,疫苗保護(hù)劑、細(xì)胞凍存保護(hù)劑和醫(yī)療器械包埋劑等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化學(xué)性質(zhì)與天然HSA非常接近,它在生物醫(yī)藥生產(chǎn)中具有很高的生物相容性,可以用于多種藥物的配方和醫(yī)療設(shè)備。5.**科研應(yīng)用**:rHSA在科研中可用于細(xì)胞培養(yǎng)、藥物載體研究、疫苗開(kāi)發(fā)、組織工程和再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。6.**生產(chǎn)規(guī)模**:植物表達(dá)系統(tǒng)具有大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白的潛力,這對(duì)于滿足全球?qū)HSA日益增長(zhǎng)的需求至關(guān)重要。Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag

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