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2216E瓊脂培養(yǎng)皿

來源: 發(fā)布時間:2024年09月16日

伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點(diǎn)介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個月。

在臨床實(shí)驗(yàn)室中,BHI Agar常用于從患者樣本(如血液、尿液、腦脊液等)中分離和培養(yǎng)病原微生物。2216E瓊脂培養(yǎng)皿

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月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗(yàn)原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細(xì)菌生長需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細(xì)菌的生長。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗(yàn)方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時,大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細(xì)菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細(xì)菌無氣泡。5.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時,觀察結(jié)果。NAC平板通過進(jìn)一步的生化測試,如氧化/發(fā)酵葡萄糖測試、花青素鑒定等,來進(jìn)一步確認(rèn)分離的菌株是否為目標(biāo)腸道菌。

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RV沙氏增菌肉湯(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉湯)是一種用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。它的主要特點(diǎn)如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉湯包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、孔雀石綠、氯化鎂、煌綠等成分,這些成分有助于抑制其他非沙門氏菌的生長,同時促進(jìn)沙門氏菌的生長。2.**用途**:主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別是在食品、水和牛奶等樣品中檢測沙門氏菌時。3.**配制方法**:通常需要稱取一定量的干粉培養(yǎng)基,加入指定量的蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。4.**培養(yǎng)條件**:RV沙氏增菌肉湯通常在35-37°C的溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉湯中,沙門氏菌能夠良好生長,而其他一些細(xì)菌則受到抑制。6.**質(zhì)量控制**:使用時需要進(jìn)行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的制備和使用符合標(biāo)準(zhǔn)操作程序。7.**儲存**:RV沙氏增菌肉湯的干粉形式應(yīng)在干燥、避光的條件下儲存,通常在4-10度的環(huán)境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,RV沙氏增菌肉湯的有效期通常為三年。

含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液是一種特殊的緩沖溶液,它在普通的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液的基礎(chǔ)上添加了聚山梨酯80(Polysorbate80),這是一種非離子型表面活性劑。以下是這種緩沖液的一些特點(diǎn):1.**表面活性劑**:添加了0.05%的聚山梨酯80,這是一種常用于醫(yī)藥和食品工業(yè)的乳化劑和穩(wěn)定劑。2.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.0,為微生物提供適宜的酸堿環(huán)境。3.**成分**:除了普通的氯化鈉、蛋白胨、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)外,還特別添加了聚山梨酯80。4.**用途**:這種緩沖液可能用于需要表面活性劑的特定微生物培養(yǎng),例如某些需要乳化劑才能生長的微生物。5.**增加溶解性**:聚山梨酯80可以增加某些難溶物質(zhì)在緩沖液中的溶解性。6.**配制方法**:配制時除了按照標(biāo)準(zhǔn)方法添加氯化鈉、蛋白胨和磷酸鹽外,還需精確加入0.05%的聚山梨酯80。7.**質(zhì)量控制**:需要對添加聚山梨酯80后的緩沖液進(jìn)行額外的質(zhì)量控制,確保其穩(wěn)定性和微生物培養(yǎng)效果。8.**儲存條件**:應(yīng)儲存在2~25℃,避光條件下,以保持聚山梨酯80和其他成分的穩(wěn)定性。VRBA也被用于監(jiān)測食品和水的衛(wèi)生質(zhì)量,以及在臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行一些腸道細(xì)菌的鑒定工作。

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麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkeyAgar,簡稱MAC)是一種具有中等選擇性的培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定革蘭氏陰性桿菌,尤其是腸道致病菌。以下是它的一些特點(diǎn)和用途:1.**成分**:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、胨、豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)、氯化鈉、瓊脂、乳糖、結(jié)晶紫和中性紅。這些成分共同作用,為細(xì)菌提供生長所需的營養(yǎng),同時具有選擇性和鑒別性。2.**選擇性**:膽鹽和結(jié)晶紫的添加可以抑制革蘭氏陽性菌的生長,而促進(jìn)某些革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌和沙門氏菌)的生長。3.**鑒別性**:乳糖作為可發(fā)酵的糖類,與中性紅結(jié)合,可以區(qū)分發(fā)酵乳糖和不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌。發(fā)酵乳糖的細(xì)菌會產(chǎn)生酸性環(huán)境,使中性紅從無色變?yōu)榧t色,從而形成特征性的菌落顏色。4.**菌落特征**:在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上,大腸桿菌通常形成紅色或粉紅色的菌落,而沙門氏菌和志賀氏菌則形成無色或淡色的菌落。5.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于糞便、分泌物中腸道致病菌及腸球菌的分離培養(yǎng),也用于檢測或驗(yàn)證水、乳品和其他材料中的大腸菌群滴度。VRBA中的溴青紫紅是一種指示劑,具有抑菌和變色作用。TSAP培養(yǎng)皿

EMB是Eosin Methylene Blue的縮寫,這是一種含有兩種染料的培養(yǎng)基。2216E瓊脂培養(yǎng)皿

MFC瓊脂(也稱為4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂,MUG瓊脂)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的濾膜法檢測,符合中國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)。其配方包含多價蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三號膽鹽、氯化鈉、苯胺藍(lán)、瓊脂、玫紅酸等成分,pH值調(diào)節(jié)至7.4±0.2。這種培養(yǎng)基通過膽鹽的選擇性作用抑制革蘭氏陽性菌,同時利用乳糖作為可發(fā)酵的糖類,結(jié)合指示劑來檢測細(xì)菌的代謝活動。MFC瓊脂的檢驗(yàn)原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵糖類;3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;玫紅酸和苯胺藍(lán)為pH指示劑。當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵乳糖時,會產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。在實(shí)際應(yīng)用中,MFC瓊脂可以用于水質(zhì)檢測,特別是飲用水和水源中糞大腸菌群的測定。使用時,將培養(yǎng)基加熱溶解,分裝到試管或平皿中,高壓滅菌后備用。接種樣品后,在適宜的溫度下培養(yǎng),通過觀察培養(yǎng)基上菌落的生長情況和顏色變化來判斷是否存在大腸菌群。MFC瓊脂的制備和使用應(yīng)遵循相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。2216E瓊脂培養(yǎng)皿

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