熒光光譜分析是一種強大的技術,可以用來優化重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的熒光特性。以下是通過熒光光譜分析來優化EGFP熒光特性的步驟:1.**確定激發和發射波長**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發和發射光譜,以確定其比較大激發波長和比較大發射波長。-這些波長是EGFP熒光特性的關鍵參數,可以用于后續的成像和檢測實驗。2.**優化激發和發射濾光片**:-根據EGFP的激發和發射光譜,選擇合適的濾光片以比較大化熒光信號并減少背景噪聲。3.**評估熒光量子產率**:-熒光量子產率是衡量熒光效率的一個重要參數,它表示激發態分子產生熒光的概率。-通過比較EGFP與其他標準熒光物質的熒光強度,可以評估其量子產率。4.**熒光緩沖液的優化**:-某些緩沖液成分可能會影響EGFP的熒光特性,如pH值、離子強度和抗氧化劑的存在。-通過改變緩沖液條件,可以優化EGFP的熒光強度和穩定性。5.**溫度和氧濃度的影響**:-溫度和氧濃度會影響EGFP的熒光特性,包括熒光強度和光穩定性。-在熒光光譜分析中,可以通過改變溫度和氧濃度來評估這些因素對EGFP熒光特性的影響。Cas9 NLS與CRISPR/Cas9系統中的gRNA兼容,可以進行位點特異性的DNA切割 。Recombinant Human FSTL3 Protein,His Tag
pA-Tn5轉座酶是一種經過特殊改造的融合蛋白,由ProteinA和高活性的Tn5轉座酶組成,具有以下主要應用:1.**高通量測序建庫**:pA-Tn5轉座酶可以用于快速構建用于高通量測序的DNA文庫,通過其轉座酶活性實現DNA片段化,同時加上測序接頭,簡化了傳統DNA測序建庫的多步過程。2.**CUT&Tag技術**:這是一種新興的蛋白質與DNA相互作用研究方法,pA-Tn5轉座酶利用ProteinA與特定抗體結合,將轉座酶帶到目標蛋白附近進行DNA切割和標簽添加,實現對蛋白質結合位點的高通量測序分析。CUT&Tag技術具有高特異性、低背景噪音、高靈敏度、良好重復性等優點,適用于表觀遺傳學、干細胞等領域的研究。3.**ATAC-seq**:pA-Tn5轉座酶也可用于ATAC-seq實驗,這是一種研究染色質可及性的方法,通過轉座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質DNA,然后在切割位點加上測序接頭,進行后續的測序分析。4.**轉錄組測序快速建庫**:有研究開發了基于Tn5轉座酶的轉錄組測序快速建庫方法,例如SHERRY方法,它利用Tn5轉座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈,簡化了建庫過程,適用于單細胞轉錄組測序,提高了樣本的利用率和測序速度。
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的應用確實非常廣,主要體現在以下幾個方面:1.**生物制藥**:在生物制藥行業中,確保產品中無核酸酶殘留是非常重要的,以避免潛在的免疫反應或影響藥物的穩定性和效果。2.**重組蛋白純化**:在蛋白質的純化過程中,去除樣品中的核酸酶殘留對于提高純度和防止后續反應的干擾至關重要。3.**疫苗生產**:疫苗制備過程中,去除DNA污染是滿足監管要求和保障疫苗安全性的關鍵步驟。4.**細胞培養**:在細胞培養過程中,去除培養基中的核酸酶殘留有助于防止細胞受到不必要的酶活性影響。5.**分子生物學研究**:在分子生物學實驗中,如PCR、克隆、基因表達分析等,去除樣品中的核酸酶殘留可以避免實驗結果的偏差。6.**食品工業**:在某些食品加工過程中,使用Benzonase核酸酶來降低粘度或去除DNA/RNA,以改善產品特性或滿足特定的質量標準。7.**環境監測**:在環境樣本中檢測核酸酶殘留,以評估環境污染程度或監測特定生物活動。8.**法醫學和醫學診斷**:在法醫學檢測或某些醫學診斷過程中,準確檢測核酸酶殘留對于案件調查或疾病診斷具有重要意義。
EndoS糖苷內切酶S在抗體藥物偶聯物(ADCs)研究中的應用主要體現在糖鏈定點偶聯技術上。通過上海藥物所的研究,開發了一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略,利用EndoS2這種糖苷內切酶,可以將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,實現了糖鏈定點ADC化合物的制備。定點偶聯技術相比傳統的隨機偶聯具有更好的方法指數,能夠提高ADC的均一性和穩定性,是當前ADC領域的研究熱點之一。在抗體的Fc結構域N297位,這是一個保守的糖基化位點,通過在該位點引入細胞物質,可以形成具有優勢的糖鏈定點ADC化合物(glycosite-specificADCs,gsADCs)。此外,EndoS2對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,能夠高效獲得功能修飾的糖工程抗體,并且可以用于抗體的內吞成像研究及糖鏈延伸等功能化研究。研究人員通過這種“一步”制備策略得到的糖鏈定點ADC化合物,在結構均一性、親水性、體外穩定性以及體外活性方面表現良好,并且在體內瘤抑制活性方面,相比陽性對照ADC化合物,在低載藥量的情況下具有更強的抑制效果。EndoS酶的這些應用,不僅展示了其在簡化ADC制備流程中的潛力,還有助于推動定點ADC藥物的深入發展,為未來的生物藥物開發提供了新的思路和方法。與其他Cas12蛋白相比,FnCas12a蛋白的分子量較小,大約在400-700個氨基酸之間。
EndoS糖苷內切酶在ADCs制備中的具體應用步驟,根據上海藥物研究所的研究,可以概括為以下幾個關鍵環節:1.**篩選糖底物和糖苷內切酶**:研究人員篩選了一系列糖底物和糖苷內切酶,發現Endo-S2酶能夠將二糖底物LacNAc轉移至去糖抗體N297位糖基化位點,且LacNAc半乳糖6號位唾液酸化修飾不影響Endo-S2的轉糖基化活性。2.**抗體糖基化改造**:利用Endo-S2和LacNAc的組合,直接實現野生型抗體的糖基化改造。Endo-S2對多樣化LacNAc修飾的兼容性,可以高效獲得功能修飾的糖工程抗體。3.**設計合成藥物-連接子復合物**:研究人員設計并合成了LacNAc-linker-drug復合物結構,這是實現定點ADC化合物“一步”組裝的關鍵。4.**“一步”定點偶聯**:通過Endo-S2的催化作用,將小分子細胞毒藥物通過特定的糖鏈結構直接定點連接到抗體的糖基化位點,簡化了ADCs的制備流程。5.**評價和測試**:對獲得的糖鏈定點ADC化合物進行結構均一性、親水性、體外穩定性及體外活性的測試。測試結果顯示,這些化合物具有非常好的結構均一性(DAR=2)、親水性和體外穩定性,并且在體外具有強大的瘤抑制活性。
FnCas12a不僅可用于體外dsDNA的特異剪切,也可用于靶標核酸的快速檢測,如HOLMES核酸快檢技術。Recombinant Human FSTL3 Protein,His Tag
大腸桿菌表達的重組抑肽酶(Aprotinin)是一種通過基因工程技術在大腸桿菌中生產的蛋白酶抑制劑,具有以下特性和應用:1.**來源**:重組抑肽酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統生產的,確保了無動物源性成分,減少了病毒污染的風險。2.**結構**:它是一種單體球狀蛋白,由58個氨基酸組成,具有三個交聯二硫鍵的單個多肽鏈。3.**功能**:作為一種競爭性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑,重組抑肽酶能夠抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶等的活性。4.**應用**:在生物技術過程中,重組抑肽酶可以替代動物源性抑肽酶,用于重組蛋白生產中抑制絲氨酸蛋白酶的活性,以及在細胞培養等過程中。5.**產品信息**:通常以粉末形式提供,具有明確的貨號和規格,如1mg或10mg的包裝。6.**產品性質**:包括外觀、溶解度、純度、蛋白含量、酶濃度和活性定義等詳細參數。7.**儲存條件**:凍干粉在2~8℃保存,有效期為2年。8.**使用方法**:推薦的結合pH>6.0,在pH<3.0的條件下不結合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃儲存。9.**注意事項**:產品作科研用途,操作時需穿著實驗服并佩戴一次性手套。Recombinant Human FSTL3 Protein,His Tag
Recombinant Mouse LTBR Protein
Recombinant Canine CD46 Protein
Recombinant Human ROBO4 Protein
Recombinant Biotinylated Mouse APLN Protein
Recombinant Mouse DR6/TNFRSF21 Protein
Recombinant Human E-Selectin/CD62E Protein
Recombinant Biotinylated Human SEZ6 Protein
PTD-p65-P1 Peptide
Recombinant Human Angiostatin
Recombinant Human SPARC(BM-40)