pA-Tn5轉座酶是一種經過特殊改造的融合蛋白,由ProteinA和高活性的Tn5轉座酶組成,具有以下主要應用:1.**高通量測序建庫**:pA-Tn5轉座酶可以用于快速構建用于高通量測序的DNA文庫,通過其轉座酶活性實現DNA片段化,同時加上測序接頭,簡化了傳統DNA測序建庫的多步過程。2.**CUT&Tag技術**:這是一種新興的蛋白質與DNA相互作用研究方法,pA-Tn5轉座酶利用ProteinA與特定抗體結合,將轉座酶帶到目標蛋白附近進行DNA切割和標簽添加,實現對蛋白質結合位點的高通量測序分析。CUT&Tag技術具有高特異性、低背景噪音、高靈敏度、良好重復性等優點,適用于表觀遺傳學、干細胞等領域的研究。3.**ATAC-seq**:pA-Tn5轉座酶也可用于ATAC-seq實驗,這是一種研究染色質可及性的方法,通過轉座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質DNA,然后在切割位點加上測序接頭,進行后續的測序分析。4.**轉錄組測序快速建庫**:有研究開發了基于Tn5轉座酶的轉錄組測序快速建庫方法,例如SHERRY方法,它利用Tn5轉座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈,簡化了建庫過程,適用于單細胞轉錄組測序,提高了樣本的利用率和測序速度。
RNaseH-(RNaseH缺乏)通常是指在某些逆轉錄酶中通過突變消除了RNaseH活性的酶。這種酶在合成cDNA鏈時不會降解RNA模板,因此可以用于生成更高產量的全長cDNA,尤其是在使用較長的RNA模板時。RNaseH-的應用主要包括:1.**全長cDNA合成**:由于RNaseH-不會在逆轉錄過程中降解RNA模板,因此可以合成更長的cDNA片段。2.**提高cDNA產量**:在某些情況下,使用RNaseH-可以提高cDNA的產量,特別是當RNA模板質量較高時。3.**避免RNA降解**:在逆轉錄過程中,RNaseH-有助于保護RNA模板不被降解,這對于后續的分子生物學實驗非常重要。4.**特定基因表達分析**:RNaseH-可用于合成特定基因的cDNA,進而進行基因表達分析。5.**RNA病毒研究**:在研究RNA病毒時,RNaseH-可用于合成病毒RNA的cDNA,以便進一步研究病毒的基因組。6.**基因克隆和功能研究**:合成的全長cDNA可以用于克隆和研究基因的功能。7.**提高qPCR和RT-qPCR的效率**:使用RNaseH-合成的cDNA作為模板,可以提高定量PCR的效率和準確性。8.**RNA干擾和基因沉默研究**:RNaseH-有助于合成siRNA或shRNA,進而研究基因沉默的效果。
磁珠法質粒小量抽提試劑盒中的磁珠分離通常涉及以下步驟:1.**裂解細胞**:-首先,使用裂解液(含有SDS等成分)裂解細菌細胞,釋放出質粒DNA。2.**結合磁珠**:-將磁珠加入到裂解后的混合物中,磁珠表面通常修飾有能夠特異性結合核酸的配體,使得質粒DNA吸附于磁珠表面。3.**磁分離**:-將含有磁珠和質粒DNA的混合物置于磁分離架上。磁分離架產生磁場,使得磁珠迅速聚集在管壁或管底。4.**未結合物質**:-在磁珠固定后,小心移除上清液,避免擾動磁珠。上清液中含有未吸附的蛋白質、RNA和其他細胞碎片。5.**洗滌磁珠**:-向磁珠中加入洗滌液,輕輕混勻以去除殘留的雜質,然后再次使用磁分離架分離磁珠和洗滌液。6.**重復洗滌**:-根據試劑盒的說明,可能需要進行多次洗滌以確保高度純化。每次洗滌后都需洗滌液。7.**干燥磁珠**(如果需要):-在某些情況下,可能需要去除洗滌后的殘留液體,讓磁珠在磁場作用下干燥,但要注意不要使磁珠完全干燥,以免影響DNA的洗脫。8.**洗脫質粒DNA**:-使用洗脫液(通常是低鹽或高pH的緩沖液)將質粒DNA從磁珠上洗脫。洗脫液可以破壞磁珠與DNA之間的結合力,釋放DNA。。
dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學試劑,通常以100mM的濃度提供。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,如聚合酶鏈反應(PCR)、DNA測序、填入反應、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反應等。dATP的化學結構是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA復制過程中用來合成DNA鏈的原料之一。在Sanger測序中,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一種衍生物,缺少3'-OH基團,用于鏈終止反應。dATP溶液應儲存在-20°C的條件下以保持其穩定性和活性,有效期通常為兩年。在生產過程中,dATP通常按照ISO9001標準進行,并在D級清潔室中進行以確保高質量和純度。HPLC確認的純度通常大于99%。dATP溶液不含qPCR、PCR、逆轉錄抑制劑,也不含DNase、RNase以及人類和大腸桿菌DNA,以避免實驗過程中的污染。在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase可以用于精確地引入特定位點的突變,或在基因組中插入特定的DNA序列。
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的高重復性和準確性主要得益于以下幾個方面:1.**基于熒光探針的檢測方案**:該試劑盒使用熒光標記的DNA探針,當探針被Benzonase核酸酶切割時,會產生熒光信號,這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量。此方法成功避免了ELISA檢測方法的一些限制,例如抗體的親和性能差異、非特異性反應以及蛋白濃度差異的問題。2.**高靈敏度**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這為準確檢測提供了技術保障。3.**操作簡便快速**:檢測過程簡單,只需加入BenzDetectionSolution和待檢樣品,在定量PCR儀上15分鐘內即可完成檢測,減少了操作過程中可能出現的人為誤差。4.**標準曲線的建立**:試劑盒中提供了不同濃度的標準品,通過這些標準品可以建立標準曲線,從而準確計算出樣品中的Benzonase殘留量。5.**環境控制**:建議在超凈工作臺或生物安全柜等潔凈環境中進行檢測,以避免樣品受環境核酸酶的影響,保證檢測結果的準確性。SpCas9-NLS的應用范圍廣泛,可用于細胞內的CRISPR/Cas9系統介導的基因編輯。DL50
牛痘DNA拓撲異構酶I具有解超螺旋的活性,可以解開雙鏈閉合環狀DNA的超螺旋結構,便于后續的酶切反應。Recombinant Human LILRB1/CD85j/ILT2 Protein,hFc Tag
T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環節,確保了酶的穩定性和活性。以下是根據搜索結果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質粒載體中。-然后將這個質粒轉化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產品用于科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。Recombinant Human LILRB1/CD85j/ILT2 Protein,hFc Tag
Recombinant Human Complement factor I Protein
Recombinant Human MFAP4 Protein
N-Boc-Phe-Leu-Phe-Leu-Phe
Recombinant Human CTGF/CCN2 Protein
Rat Eotaxin/CCL11
PAR-1 agonist peptide
Recombinant Mouse MXRA8 Protein
Recombinant Human PKC iota Protein
Recombinant Mouse CD21 Protein
Recombinant Mouse G-CSF