PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環;60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有玻璃纖維的離心柱中,上海益啟生物公司土壤DNA提取的優勢。楊浦區土壤基因組土壤DNA提取聯系電話
NA Kit for Soil或FastDNA Spin Kit for Soil,按照土壤試劑盒提取protocol進行。有效裂解:采用介質E,介質E中研磨珠與菌體大小,可以有效裂解各種菌體細胞。去雜提純:試劑根據微生物DNA提取而優化設計,裂解液、雜質去除劑及漂洗液能夠針對菌體特性很好的去除影響DNA純化及下游實驗的抑制劑,能夠提取更多的微生物DNA。省時簡便:柱膜法提取操作簡單省時。·很硬或韌性的樣本,可以單獨用介質A(1169**050)代替土壤試劑盒中的介質E來裂楊浦區土壤基因組土壤DNA提取聯系電話買土壤DNA提取就找益啟生物。
直接應用于下游實驗。多:完美配合自動化核酸提取儀,實現高通量提取。廣:多種環境土壤均能有效提取,適用性廣,***匹配市面上大多數核酸提取儀和工作站。安:不使用酚、氯仿等有毒試劑,安全環保。PART.02。多重數據表明提取效果。MagBeads FastDNATM Kit for Soil用于提取不同類型土壤DNA,可直接用于PCR、酶切、測序等下游實驗。提取不同類型土壤DNA收率及純度結果:A260/A280比值在1.7~2.0范圍視為提取效果良好,A260/A230比值大于
。如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次。【2】減少樣本用量。問題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數。·洗滌不干凈:增加洗滌次數。問題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加上海土壤DNA提取的供應商。
與現有技術相比,本發明技術克服了樣品土壤來源的二氧化硅對DNA的吸附,從而減少了不必要的DNA損失,可達到獲取高質量、高產量土壤尿液DNA目的。 附圖說明 圖1是本發明實施例1中提取的DNA的復合STR擴增圖譜。 圖2是本發明實施例2中提取的DNA的復合STR擴增圖譜。 圖3是本發明實施例3中提取的DNA的復合STR擴增圖譜。 圖4是本發明實施例4中提取的DNA的復合STR擴增圖譜。 具體實施方式 下面將結合本發明的附圖,對本發明的技術方案進行清楚、完整地描述。益啟生物公司帶您了解土壤DNA提取詳情。崇明區土壤DNA提取土壤DNA提取聯系方式
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les using SPINeasy DNA Kit for Soil:M: 1kb plus DNA ladder、Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、Lane 3: Flowerbed soil、Lane 4: Saline soil 、L ane 5: Desert soil。結論:采用SPINeasy DNA Kit for Soil提取多種類型土壤基因組DNA,電泳條帶清晰,無彌散。3.提取不同類型土壤基因組DNA進行PCR結果。Figure 2: PCR amplification of 16S rRNA gene from different soil samples using SPINeasy DNA Kit for Soil:Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、M: 1kb plus DN楊浦區土壤基因組土壤DNA提取聯系電話
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