8000rpm離心1分鐘,上清DNA溶液轉移至新的離心管中。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環;60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例2 以硅膠膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有硅膠膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)買土壤DNA提取就找益啟生物。松江區土壤DNA土壤DNA提取規格
土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,對土壤樣品進行DNA提取時,需要考慮樣品來源的二氧化硅對DNA的結合,一旦DNA與樣品來源的二氧化硅發生結合,DNA就會隨著土壤固體顆粒物質一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通過多種方法提取DNA,并用于PCR檢測、STR分型檢測、二代測序分析;但是,尿液中DNA含量較低,尿液浸潤土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要針對土壤尿液進行DNA提取,具有一定難度。 技術實現要素: 本發明為解決上述存在的問題,提供了一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,其解決技術問題的技術方案是: 土壤尿液DNA提取試劑盒,包括以下試劑:上海FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取哪家好上海土壤DNA提取的供應商。
les using SPINeasy DNA Kit for Soil:M: 1kb plus DNA ladder、Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、Lane 3: Flowerbed soil、Lane 4: Saline soil 、L ane 5: Desert soil。結論:采用SPINeasy DNA Kit for Soil提取多種類型土壤基因組DNA,電泳條帶清晰,無彌散。3.提取不同類型土壤基因組DNA進行PCR結果。Figure 2: PCR amplification of 16S rRNA gene from different soil samples using SPINeasy DNA Kit for Soil:Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、M: 1kb plus DN
NA基因擴增子測序及分析,研究菌群分布。參考文獻2:·樣本類型:***種子。·樣本粉碎:每管20粒種子,電動組織研磨器配合研磨杵,研磨5min。·樣本DNA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取?!は掠螌嶒灒杭毦?6S rDNA基因擴增子測序及分析,研究菌群分布。 相關文獻:1.Campisano A ,Antonielli L , Pancher M , et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014, 9.2.Chen X , Krug L ,Yang H , et a上海益啟生物的聯系電話。
內生菌共生于植物內部,要獲得內生菌首先需要破碎植物組織。植物組織和內生菌在形態、硬度等性質上均有差異,想要獲得更多內生菌基因組DNA,對裂解介質的選擇是難點。2、相對于植物基因組,雖然內生菌包括細菌,***,放線菌等不同類型微生物,但其基因組*占微小部分單獨提取內生菌DNA比較困難,提取到的是混合DNA,通過PCR才能鑒定。內生菌DNA提取思路:STEP1破壞植物釋放菌體;STEP2破壞菌體釋放核酸;STEP3提取DNA。有沒有合適的土壤DNA提取是良好的科學儀器。嘉定區土壤DNA提取聯系電話
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94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環;60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例5 以二氧化硅包裹的磁性納米顆粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有15 ul二氧化硅包裹的磁性納米顆粒的離心管中,混勻后靜止15分鐘;上磁力架吸附2分鐘,吸棄上清液;加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;松江區土壤DNA土壤DNA提取規格