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.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結(jié)果,有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自動(dòng)化提取;Lane5-8:手工提取;Lane 1&5: 100mg有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土;Lane 2&6: 100mg花壇土;Lane 3&7: 250mg鹽堿土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同類型土壤DNA進(jìn)行PCR及酶切結(jié)果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土;Lane 2:花壇土;Lane 3:鹽堿土;Lane 4普陀區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取參數(shù)益啟生物公司帶您了解土壤DNA提取詳情。
PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,
-24 5G儀器和裂解介質(zhì)E管同時(shí)使用可在40秒內(nèi)快速裂解難處理樣本,例如***孢子、內(nèi)生孢子、革蘭氏陰性菌和酵母等。釋放出來(lái)的DNA經(jīng)過(guò)硅膠基質(zhì)離心純化,得到的DNA可以直接進(jìn)行下游PCR反應(yīng)、限制性內(nèi)切酶消化、電泳和任何其他所需的應(yīng)用。產(chǎn)品特點(diǎn):1.適用于不同類型的土壤樣本,以及廢水、污泥等樣本。該試劑盒中不存在也不需要再使用有危害的有機(jī)試劑。3.DNA產(chǎn)量高、純度高。4.去除腐殖酸和RCR抑制劑。應(yīng)用實(shí)例:提取多種樣本的500mg上海益啟品牌土壤DNA提取規(guī)格。
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;高質(zhì)量的土壤DNA提取,保證您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。土壤DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系方式
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