細胞凍存和復蘇操作步驟：細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則，慢速冷凍可使細胞內的水份滲出細胞外，減少細胞內形成冰晶的機會，快融以保證細胞外結晶快速融化，避免慢速融化水份滲入細胞內，再次形成胞內冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。無血清細胞凍存液產品特色：不含動物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。廣州正規無血清細胞凍存液廠家批發價

復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。南京武漢無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液的優勢：不含血清，較大減少細胞污染。

細胞凍存液是如何保護細胞的：細胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機體的主要成份是由液態的H2O組成，但是其結構微小復雜，內部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結冰。如果將細胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細胞內外的水份都會結冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡，這種因細胞內部結冰而導致的細胞損傷稱為細胞內冰晶的損傷。如果將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度的降低，細胞外部的水分會首先結冰，從而使得未結冰的溶液中電解質濃度升高。如果將細胞暴露在這樣高溶質的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質分子會受到損壞，細胞便發生滲漏，在復溫時，大量水分會因此進入細胞內，造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質損傷或稱溶液損傷。

無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。CellFreezingMedium配方成分明確，不含動物來源性蛋白，Chemicalbook不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分，提高細胞存活率和活力，亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。細胞凍存是細胞實驗中的一個常規技術，通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成，由于血清含有異源成分且生長過程中可能帶來的風險Chemicalbook，故傳統的細胞凍存配方并不適于體內研究。本產品完全由化學成分組成，無動物來源，目前測試可以很好的凍存T細胞，NK細胞以及MSC等細胞。無血清細胞凍存液：一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優先結合細胞外的水分子。

無血清細胞凍存液的用途：用途：1.無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。2.無血清細胞凍存液用于T淋巴細胞、NK細胞等免疫細胞的存儲。3.無血清細胞凍存液用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。無血清細胞凍存液產品性能：1.不含牛血清，無動物源組分。傳統的凍存液，一般由胎牛血清、DMSO等組分組成。胎牛血清取自牛，因此，難以應用到需要避免接觸動物源的應用領域。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途，無動物源組分。2.2-8℃即可穩定保存，無需冷凍，即取即用。為了避免反復凍融，傳統的細胞凍存液，需要分裝成小管后置于-20℃環境下保存。無血清細胞凍存液，2-8℃保存即可，無需再進行分裝。無血清細胞凍存液產品性能：通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成。合肥昆明無血清細胞凍存液

細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求。廣州正規無血清細胞凍存液廠家批發價

細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液，4℃預冷（新鮮配制的凍存液會產生大量的熱）；取對數生長期的細胞，用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來；懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中；離心1200rpm，6min；去除上清液，逐漸加入適量預冷的細胞凍存液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml；將細胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml；在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名；凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min；到達-80℃時，則可迅速放入液氮中。廣州正規無血清細胞凍存液廠家批發價