細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。目前現有技術中，細胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO)、20％～90％胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養基。培養基以及FBS可為細胞提供必要的營養物質。DMSO是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質，成分比較復雜，在臨床應用上存在潛在的風險，也增加了污染的幾率，并且由于凍存液中含有動物血清，會導致凍存液的成分存在不穩定的因素。需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存。開封無血清細胞凍存液廠家推薦

細胞凍存和復蘇實驗：一般來說，細胞進行轉移和保存，較佳的策略是進行低溫保存（-70℃~-196℃），而細胞深低溫保存的基本原理是：在-70℃以下時，細胞內的酶活性均已停止，即代謝處于完全停止狀態，故而可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過0~20℃階段的處理過程，在此溫度范圍內，冰晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。經過前人的長期試驗，發現細胞的凍存及復蘇基本原則是慢凍速融，這樣可以較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。長沙無血清細胞凍存液供應商無血清凍存液注意事項：請選擇對數生長期細胞進行凍存。

無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比：細胞凍存是細胞培養技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法，其中細胞凍存液，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液，不光光是說只是用來進行細胞的保存，在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細胞，細胞內和外環境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑，在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水份在凍結前透出細胞，可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，在需要時直接復蘇就可恢復細胞活性。

細胞凍存液的原理及配制方法：細胞凍存是細胞培養、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中，及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是必不可少的實驗操作。因為在沒有建立一個穩定的細胞系或穩定分泌抗體的細胞系的時候，細胞的培養過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導致實驗失敗，如果沒有原始細胞的凍存，則因為上述的意外而前功盡棄。無血清凍存液注意事項：若需長期凍存細胞，請轉移至液氮罐中貯存。

細胞凍存：取出凍存管，注明細胞名稱，代數，日期。離心后，以無菌吸管吸棄上清，不要吸到底部的細胞沉淀。將細胞沉淀與凍存液充分混勻，根據計數結果，將細胞總數調節成細胞數量為5-10*105/ml為宜。將細胞凍存懸液分裝進細胞凍存管中，一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴密封口后，使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1℃。或者，將裝有細胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中，然后將凍存盒置于–80℃條件下過夜。若無凍存盒及其他凍存裝置，可以先將凍存管置于4℃30min，再-20℃凍存1h直至完全冷凍，再轉移至-80℃冰箱過夜。第二天將已經冷凍的細胞轉移到液氮容器中，置于液氮上方的氣相空間中儲存無血清快速細胞凍存液：減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。寧波正規無血清細胞凍存液產品介紹

無血清細胞凍存液產品性能：通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成。開封無血清細胞凍存液廠家推薦

復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。開封無血清細胞凍存液廠家推薦