細胞RNA提取的方法：實驗提取步驟：標準Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細胞培養(yǎng)皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分鐘，用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進口EP管中。加入1/5體積的氯仿，上下混勻液體，4度靜置10-15分鐘。（氯仿為有機溶劑，有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結合，從而使得蛋白和RNA脫離，RNA進入水相）。4度離心15分鐘，一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層，RNA在上清里，從離心機輕輕拿出EP管，以免管內物質震蕩導致下層沉淀激起。吸取上清的時候一定要動作輕柔，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul，避免吸到下層沉淀，將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇，4度靜置10min，然后12000rpm離心10min。可以用260nm波長分光測定RNA濃度，OD值為1相當于大約40μg/ml的單鏈RNA。南昌RNA提取試劑哪里買

RNA提取試劑的選擇：選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時，操作方便且經濟實用。對于動物組織、簡單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細胞的totalRNA提取，Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市，進一步豐富了TakaraRNA提取的產品線。該產品采用了獨特的細胞裂解系統，無需苯酚氯仿抽提等步驟，簡單快捷。組織或細胞裂解后，提取操作光需20分鐘便可完成。南昌RNA提取試劑哪里買口罩愛帶不帶，做實驗時高冷一點，不要指點江山，唾沫橫飛即可。

常用總RNA提取試劑：異硫氰酸胍法和Trizol法是動物組織及動物細胞總RNA提取較常用的方法，異硫氰酸胍法操作簡單快捷，適用于樣本足夠大的常規(guī)動物組織；Trizol法裂解能力較強，尤其適合小樣本及特別難提取的組織，如兔子皮膚，動物結締組織等總RNA的提取；另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑，還可以用于植物組織、細菌、菌類等組織的提取。對于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進行總RNA的提取。提取RNA時我們經常遇到的問題是：(1)RNA產量較低；(2)RNA有嚴重的鹽類污染；(3)RNA有嚴重的有機溶劑污染；(4)樣品降解等問題。

總RNA的定義：總RNA=mRNA+tRNA+rRNA，即：總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發(fā)現lncRNA等microRNA的時候的概念。但是卻被各大公司默認的概念，一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網站，看一看總RNA提取試劑盒案例提供的RNA電泳圖，只有表示總RNA的2條帶——28s和18s；表示microRNA的5s帶，要不沒有，要不很弱。那么mRNA在哪里呢？從RNA電泳圖上能不能看到呢？真正成熟的mRNA，主要集中在28s和18s之間和上下的熒光背景（一般每條基因mRNA量很少，所以，整體一般看不到明顯帶，只表現為28s和18s中間和上下的連續(xù)的涂抹帶）。排除其它核酸分子（DNA）的污染。

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒：1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術，已成功用于葡萄，中草藥等多糖含量高的樣品，成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑，PCR壓制物清理劑，核酸提取優(yōu)化劑，樣品核酸穩(wěn)定劑，RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產品。2、適用材料普遍：尤其適合解決多醣多酚，色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點：操作簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。RNA純度高，平均OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織，每100mg組織能提取到20～30μg總RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實驗。一站式，提供RNase-free的樣品收集管。普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現貨。南昌RNA提取試劑哪里買

RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。南昌RNA提取試劑哪里買

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法：1、得率過低：提取樣本過低總量不足或者提取樣本過多裂解不徹底；應當使用適當質量的組織或細胞進行提取，樣本前處理一定要做好，裂解應充分。2、基因組殘留：Trizol法提取時，分層后吸取上清時吸到中間層會帶來嚴重的基因組污染；分層吸取時應當格外小心，不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取，可選擇含有DNaseI的試劑盒進行提取，吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進行消化，可極大限度的降低DNA殘留。南昌RNA提取試劑哪里買